禽肉弯曲菌污染分析及冷藏条件下失活动力学特征

为了解空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni)和结肠弯曲菌(Campylobacter coli)在浙江省肉鸡产业链中的污染状况,及其冷藏过程中的失活特征。研究采用多重PCR方法对肉鸡养殖、屠宰和销售环节中分别采集的肛拭子、屠宰场环境和鸡肉等样品进行检测,平板计数法对人工污染鸡肉进行活菌数检测,用于失活特征分析。结果显示,采集的样品中,C. jejuni和C. coli的检出率分别为45.3%(182/402)和4.9%(20/402);其中,养殖环节中的检出率分别为81.2%(65/80)和0,屠宰环节中的检出率分别为30.5%(48/157)和5.1%(8/157),销售环节中的检出率分别为41.8%(69/165)和7.3%(12/165)。在6℃冷藏条件下,鸡肉中的C. jejuni和C. coli失活曲线具有相似的特征,在30 d贮藏期内,lg cfu分别下降了1.98和2.19;其中,0~14 d细菌数量下降速度较快,14~30 d细菌数量下降较为平缓。Log-logistic模型相比于Weibull模型对2种细菌的失活曲线有较好的拟合性。上述研究表明,肉鸡养殖、屠宰和销售环节中均存在着一定程度的空肠弯曲菌和结肠弯曲菌污染,其中,销售环节中检出率高于屠宰环节;在6 ℃冷藏条件下,Log-logistic方程作为2种菌的一级预测生长模型具有较好的拟合性。     

嵌合猪瘟病毒基因Ⅱ型E2抗原区的重组C株病毒 构建及其生物学特性

【目的】目前使用的基因Ⅰ型猪瘟兔化弱毒C株疫苗是公认的安全、有效疫苗,但近年来基因Ⅱ群的猪瘟流行毒株比例增高,因此对猪瘟(CSF)的有效防控提出了更高要求。本研究旨在通过反向遗传学技术构建适应CSFV基因Ⅱ型的新型C株疫苗,为标记疫苗的开发奠定基础。【方法】在构建的C株感染性克隆基础上,拯救嵌合CSFV基因Ⅱ型HZ1-08毒株E2抗原区的重组C株病毒RecCHZE2,并分析其致病性和免疫原性。【结果】重组嵌合病毒RecCHZE2接种家兔后出现典型的定型热,兔脾脏肿大;重组嵌合病毒RecCHZE2接种猪只后没有发热和明显的白细胞减少,在接种后第12天检测到一过性的病毒血症;对接种猪血清检测结果表明,针对2型毒株的相应抗体在接种后的20 d达到高峰;接种猪血清针对C株和HZ1-08毒株的中和抗体效价相当,但C株免疫猪血清对流行毒株的中和抗体水平降低。【结论】重组嵌合病毒RecCHZE2不仅保留C株病毒弱毒的特性,且可提高针对Ⅱ型流行毒株的抗体水平。     

犬传染性肝炎概述

犬传染性肝炎概述李肖梁（浙江农业大学动物科学学院）犬传染性肝炎（ＩｎｆｅｃｔｉｏｎｓＣａｎｉｎｅＨｅｐａｔｉｔｉｓＩＣＨ），主要由犬腺病毒Ⅰ型（ＣＡＶ—１）引起的一种急性败血性传染病，发生于犬及狐，犬主要表现肝炎和眼疾，狐狸则表现为脑炎。１．病原：Ｃ...     

樱桃谷鸭Se／Ve缺乏及食盐慢性中毒的病例初报

桐乡市洲泉镇霸桥乡自去年底至今年初发生雏鸭(2—7周龄)大北死亡(约1—2万只,全乡有18万只),经济损失达二十余万元,所喂料在11日龄前用乳猪全价颗粒料(大江或新市料),12日龄起采用肉猪配合料(新市产)和稻谷(粮管所供)混合喂养至出售。现将该病发生经过,试验研究情况初报如     

优质鸡疾病发生特点与综合防治技术

一、优质鸡疾病发生特点 我国优质鸡规模化发展起步较晚,但发展速度快,成为当前肉鸡生产中产业化前景最为广阔的行业之一。与此同时,疾病发生频繁,危害甚大,其中环境被各种病原体污染是最重要的原因。就目前情况而言,我国优质鸡疾病发生具有如下特点。 (一)死亡率高 有些集约化养鸡场或养鸡专业户的鸡只死亡率高约20%,严重的批次可达30%～70%,甚至全群毁灭或被淘汰。造成死亡的原因比较复杂。但总的来说,发生的主要原因离不开疾病。 (二)疾病发生的种类增多,危害严重 危害养鸡业最严重的是传染性疾病,而传染病中又以病毒性传染病…     

犬肺炎的诊治

犬肺炎的诊治近来，由于气候变化，本门诊部连续碰到犬患肺炎的病例，现将诊治情况报告如下。犬肺炎多由感冒，环境应激，以及全身抵抗力下降等因素引起，使寄生于呼吸道内的微生物乘虚发育繁殖，增强毒力后，逐步侵袭到气管，支气管及肺实质所致。病犬全身症状明显，精神...     

蛋黄中抗嗜水气单胞菌IgY的提取和纯化

通过对蛋黄中抗嗜水气单胞菌IgY的提取,分别进行了两种粗提方法(水稀释法、Pectin法)和纯化方法(硫酸铵法、PEG6000法)的比较。结果显示,当蛋黄液经pH5.0蒸馏水10倍稀释粗提后,上清液中脂肪和IgY残余率分别为32.69%和68.34%,效果较好。采用12%(w/v)PEG6000、33%(v/v)饱和硫酸铵纯化IgY,其免疫活性残余率分别为63.5%和64.1%。SDS-PAGE显示,水稀释法和Pectin法提取的上清液中杂蛋白减少,硫酸铵和PEG6000纯化后的上清液中几乎无其他杂带。研究表明,水稀释法和Pectin法提取IgY具有简便、高效和无污染的特点,硫酸铵和PEG6000适合纯化IgY。     

猪繁殖与呼吸综合征病毒N蛋白特异性卵黄抗体的制备与鉴定

将猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,NP)的基因片段克隆至载体pET-30a,转化重组质粒至Escherichia coli BL21(DE3)表达融合蛋白6×His-N,并以其为抗原免疫蛋鸡,制备特异性抗PRRSV-N卵黄抗体(egg yolk immunoglobulin,IgY).结果显示:6×His-N在BL21中的表达量为60.2mg·L-1;将纯化浓缩的6×His-N与弗氏佐剂乳化,连续3次免疫海兰蛋鸡后,经ELISA检测,首免后第36天抗6×His-NIgY抗体为阳性(P/N=2.44);第83天的P/N值达到最高,为5.63,抗体经1:640稀释后,P/N值为2.29;经SDS-PAGE和Western blot分析,提取的卵黄抗体的纯度高且具有良好的免疫反应性.研究表明,抗PRRSV-N蛋白的IgY制备具有简便、成本低廉等特点,可用于PRRSV检测试剂盒的开发.     

中华鳖MyD88部分序列克隆及其在组织中的表达差异分析

MyD88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)是多数TLRs(Toll like receptor,TLRs)信号转导过程中的关键接头分子。研究根据MyD88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)TIR结构域(Toll-like/IL-1 receptor domain)保守区设计简并引物,通过PCR扩增,成功地从中华鳖脾脏cDNA中扩增出351bp的目标序列。测序后经结构域和序列比较分析,扩增片段为中华鳖的MyD88 TIR结构域。该序列与大黄鱼、鸡等脊椎动物的MyD88的TIR结构域序列同源性和相似性分别为72.9%～86%和77.6%～83.6%。以热灭活嗜水气单胞菌刺激中华鳖后,经荧光定量PCR检测,在48h内,肝、脾和肾组织中MyD88 mRNA相对表达量均出现不同程度的增加,尤以脾脏中的增幅最为明显,为对照组的6.89倍;中华鳖心脏成纤维样细胞经20ng LPS刺激后1～8h,MyD88表达量有所提高,24h的表达量最高。该研究结果将为开展中华鳖天然免疫奠定良好基础。     

气单胞菌在中华绒螯蟹中的检出率与耐药性

中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)，又名湖蟹，是中国的一种名贵淡水养殖品种，随着养殖规模化，人们已从发病的湖蟹中分离到各种气单胞菌。气单胞菌在自然界广泛存在，可以从淡水、盐水、废水、蔬菜、肉、鸡和各种鱼中分离到。单胞菌可以引起儿童、老年人消化道疾病和疮口的感染。近年来，随着水产集约化养殖的迅速发展，抗生素广泛应用于水生动物疾病防