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1.
以临床疑似犬瘟热病犬外周血总RNA为模板,采用RT-PCR方法扩增犬瘟热病毒(CDV)血凝素(H)基因。序列测定和分析表明该病料犬瘟热病毒H基因序列与国内其他地区分离到的毒株同源性较高(94.6%~99.2%),而与Onderstepoort株、Convac株等疫苗毒株的同源性较低(90.4%~91.2%)。分子遗传进化分析显示所有毒株可分为7个大的分支,且各分支间具有一定的地域性,其中待检病料中CDV与大多数中国分离株一样处于Ⅰ型。进一步以H全基因为模板,截短表达其3′端816 bp、459 bp两个片段,并克隆入原核表达载体pET30 a进行表达。结果显示它们分别能表达大小约为36.4 ku和22.2 ku的融合蛋白。免疫转印表明该纯化蛋白均可与犬瘟热病毒抗血清发生阳性反应,说明重组蛋白具备抗原性,可用于进一步的血清学研究。  相似文献   
2.
为确定MTT(四甲基偶氮唑盐)法检测中华鳖脾淋巴细胞体外转化的条件,对脾淋巴细胞浓度和培养时间、丝裂原种类和浓度等影响因素进行优化.结果显示:2×106 cells.mL-1的脾淋巴细胞用10μg·mL-1Con A(伴刀豆蛋白A)诱导培养120 h或用5μg.mL-1 PHA(植物血凝素)诱导培养144 h,能获得良好的检测效果.研究表明,采用MTT法测定中华鳖脾淋巴细胞体外转化方便可行,可为中华鳖脾淋巴细胞体外转化方面的研究提供参考.  相似文献   
3.
采用饲养试验、代谢试验、屠宰测定等方法,研究在基础日粮中添加不同剂量蛋氨酸硒对岭南黄肉鸡生长性能、胴体特性和硒存留率的影响.结果表明,在基础日粮中分别添加0.1、0.15、0.2、0.25mg/kg Se水平的蛋氨酸硒比对照组(添加0.15 mg/kg Se水平的亚硒酸钠)体增重分别增加了9.52%(P<0.05)、11.78%(P<0.05)、8.85%(P<0.05)和8.22%(P<0.05);饲料转化率分别提高7.25%(P<0.05)、9.78%(P<0.05)、8.70%(P<0.05)和7.97%(P<0.05);硒存留率分别提高26.47%(P<0.05)、22.95%(P<0.05)、16.95%(P<0.05)和16.77%(P<0.05);蛋氨酸硒对肉鸡的胴体特性无显著影响.  相似文献   
4.
伊维菌素治疗犬疥螨,蠕形螨效果好皮肤病是犬的一种常见病,多发病,其中以感染犬疥螨,犬蠕形螨来我院求诊的占95%以上,主要特征:犬患处脱毛;全身搔痒,出现红斑或丘疹样小结,皮肤有结痂,皮屑有明显增多,经镜检能发现虫体,确诊为犬螨病后,用伊维菌素(美国M...  相似文献   
5.
近年来的许多研究表明,中草药饲料添加剂能促避畜禽生长,抑制病原菌,增强动物体免疫功能,提高抗病力。但对中草药渣在畜禽生产中的开发利用,迄今鲜有报道。为此,试验以中草药取汁后的副产品——中草药渣作为研究对象,探讨其在生长猪饲料中的应用可行性及对生长和免疫等方面的影响,为中  相似文献   
6.
大约在100多年以前,Klemperer发现免疫的鸡可以将Ig从血清转移到蛋黄中,具有IgG样的免疫球蛋白作用.用禽卵大量制备多克隆抗体它有几个优势:饲养成本较低;不会造成动物的伤害;易产生高水平的抗体;在pH4~11时较稳定,可作为口服剂和检测试剂用于预防、治疗和诊断动物疾病,是近年来抗体制备技术中新兴的研究领域。  相似文献   
7.
表达猪链球菌溶血素基因的减毒沙门氏菌的构建及鉴定   总被引:3,自引:1,他引:3  
将猪链球菌溶血素(suilysin,SLY)基因克隆入原核表达栽体pBV220,将重组质粒再导入减毒鼠伤寒沙门氏菌SV4089株,经PCR和酶切鉴定,构建成携带猪链球菌溶血素基因的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌。结果表明:该减毒株具有相对安全性;用酶切和PCR鉴定法证实在无抗生素存在的条件下携带重组质粒的减毒株比较稳定;SDS-PAGE显示SLY能在宿主菌中进行表达。该结果为进一步研究制备猪链球菌口服活疫苗奠定了基础。  相似文献   
8.
将猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)核衣壳蛋白(nucleocapsid protein,NP)的基因片段克隆至载体pET-30a,转化重组质粒至Escherichia coli BL21(DE3)表达融合蛋白6×His-N,并以其为抗原免疫蛋鸡,制备特异性抗PRRSV-N卵黄抗体(egg yolk immunoglobulin,IgY).结果显示:6×His-N在BL21中的表达量为60.2mg·L-1;将纯化浓缩的6×His-N与弗氏佐剂乳化,连续3次免疫海兰蛋鸡后,经ELISA检测,首免后第36天抗6×His-NIgY抗体为阳性(P/N=2.44);第83天的P/N值达到最高,为5.63,抗体经1:640稀释后,P/N值为2.29;经SDS-PAGE和Western blot分析,提取的卵黄抗体的纯度高且具有良好的免疫反应性.研究表明,抗PRRSV-N蛋白的IgY制备具有简便、成本低廉等特点,可用于PRRSV检测试剂盒的开发.  相似文献   
9.
中华鳖MyD88部分序列克隆及其在组织中的表达差异分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
朱炳林  李俊  方维焕  李肖梁 《水产学报》2010,34(7):1018-1024
MyD88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)是多数TLRs(Toll like receptor,TLRs)信号转导过程中的关键接头分子。研究根据MyD88(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)TIR结构域(Toll-like/IL-1 receptor domain)保守区设计简并引物,通过PCR扩增,成功地从中华鳖脾脏cDNA中扩增出351bp的目标序列。测序后经结构域和序列比较分析,扩增片段为中华鳖的MyD88 TIR结构域。该序列与大黄鱼、鸡等脊椎动物的MyD88的TIR结构域序列同源性和相似性分别为72.9%~86%和77.6%~83.6%。以热灭活嗜水气单胞菌刺激中华鳖后,经荧光定量PCR检测,在48h内,肝、脾和肾组织中MyD88 mRNA相对表达量均出现不同程度的增加,尤以脾脏中的增幅最为明显,为对照组的6.89倍;中华鳖心脏成纤维样细胞经20ng LPS刺激后1~8h,MyD88表达量有所提高,24h的表达量最高。该研究结果将为开展中华鳖天然免疫奠定良好基础。  相似文献   
10.
【目的】目前使用的基因Ⅰ型猪瘟兔化弱毒C株疫苗是公认的安全、有效疫苗,但近年来基因Ⅱ群的猪瘟流行毒株比例增高,因此对猪瘟(CSF)的有效防控提出了更高要求。本研究旨在通过反向遗传学技术构建适应CSFV基因Ⅱ型的新型C株疫苗,为标记疫苗的开发奠定基础。【方法】在构建的C株感染性克隆基础上,拯救嵌合CSFV基因Ⅱ型HZ1-08毒株E2抗原区的重组C株病毒RecCHZE2,并分析其致病性和免疫原性。【结果】重组嵌合病毒RecCHZE2接种家兔后出现典型的定型热,兔脾脏肿大;重组嵌合病毒RecCHZE2接种猪只后没有发热和明显的白细胞减少,在接种后第12天检测到一过性的病毒血症;对接种猪血清检测结果表明,针对2型毒株的相应抗体在接种后的20 d达到高峰;接种猪血清针对C株和HZ1-08毒株的中和抗体效价相当,但C株免疫猪血清对流行毒株的中和抗体水平降低。【结论】重组嵌合病毒RecCHZE2不仅保留C株病毒弱毒的特性,且可提高针对Ⅱ型流行毒株的抗体水平。  相似文献   
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