慢病毒介导的水牛CD14基因shRNA序列的筛选

研究慢病毒载体介导的RNA干扰对水牛CD14基因表达的影响,设计并筛选具有抑制作用的靶序列。将真核表达载体pDsRed-N1-buffaloCD14转染293细胞株,建立稳定表达水牛CD14基因细胞系。同时设计5条水牛CD14 shRNA(319/421/755/970/1 041)以及1条阴性对照序列(NC-1864),构建慢病毒重组质粒pSicoR-GFP-shRNA。采用磷酸钙沉淀法将三质粒共转染293T细胞包装慢病毒,并进行滴度测定。最后,通过对慢病毒感染的pDsRed1-N1-buffalo CD14-293细胞进行QRT-PCR检测,筛选具有抑制效果的shRNA。结果显示:在各感染细胞组中,外源水牛CD14基因mRNA的表达均受到不同程度的抑制,其中,CD14 shRNA-970靶点的干扰效率最高,达到79.3%(P<0.01)。成功筛选出具有较高抑制效果的水牛CD14 shRNA靶序列,为研究CD14基因在布氏杆菌所致炎症反应中的作用,建立家畜布氏杆菌病防治新方法奠定了基础。     

白鬼笔热风干燥特性与干燥动力学模型

考察恒温热风干燥和持续增温热风干燥对白鬼笔质量、感官指标和水分散失率、干基含水量、湿基含水率、实时含水量、水分比等评价指标的影响。结果表明,持续增温热风干燥比恒温热风干燥的效果好,当持续增温鼓风干燥5.2 h,温度增加至61℃时,白鬼笔实时含水量达到12%;干燥6 h,温度增至70℃时,白鬼笔达到恒质量,并测得鲜菇含水量为86.80%。持续增温热风干燥具有干燥时间短,菇体形态好,颜色变化小的优点。通过对烘干过程中的水分比进行数学模型拟合发现,Henderson and Pabis模型能较好地描述白鬼笔在持续增温热风干燥过程中不同时刻水分比的变化(R2=0.994 43),可为白鬼笔的热风干燥提供技术参考。     

不同前处理方式对鲜烟叶主要化学成分和致香物质的影响

为了研究不同前处理方式对鲜烟叶化学成分检测的影响,采用半叶法探索了鲜烟叶经冷冻处理、常规杀青处理和微波处理后的主要化学成分和致香物质的差异.结果表明:经3种方式处理后烟叶的近红外光谱的相似度较高,但与新鲜烟叶的光谱差异较大;经3种方式处理烟叶的烟碱含量相差不大;经微波法处理烟叶的总糖、还原糖和氯离子含量较高;经常规杀青法处理烟叶的各物质含量居中;经冷冻法处理烟叶的中性香气物质优于其他两种处理方式.因此,在测定鲜烟叶主要化学成分的含量时,最适合采用微波法处理,速度快;在测定鲜烟叶中性香气物质时,较适合采用冷冻法处理.     

我国重大动物疫病防治工作现状及改进措施

畜牧业是我国经济发展的重要支柱,畜牧业的快速稳定发展离不开重大动物疫病防治工作的开展,然而现阶段中我国的重大动物疫病防治工作中还存在着诸多的问题,制约着疫病防治工作的开展,因此为了进一步确保好我国的畜牧业发展就必须加强重大动物疫病防治工作,为我国的畜牧业发展创造良好的环境条件。本文将着重分析我国重大动物疫病防治工作中存在的主要问题,并在此基础上探究有效的改进和优化策略。     

动物疫病防治对发展草畜产业起到的作用

在当前经济发展与人们生活水平提高的大背景之下,草畜牧产业的发展已经成为部分地区经济增长的重要模块。而发展草畜牧产业需要面对的一个重要问题就是动物疫病,一旦发生动物疫病就会给草畜牧产业造成严重损失,因此,探讨动物疫病防治对草畜牧产业的作用十分重要。     

猪场常见消化道疾病的防治

随着政府部门支持力度加大,养猪业发展逐渐朝着集约化和规模化方向发展,有效的满足人民群众对猪肉产品的需求。但是在实际养殖过程中,规模化猪场会时常发生一些疾病,对养猪业健康发展造成一定的威胁,对养殖户造成经济损失。     

一起鸡传染性法氏囊炎诊断报告

<正>鸡传染性法氏囊炎是由法氏囊病毒引起的一种高度接触性传染病,主要表现为腔上囊病变,以发病率高、病程短、死亡率低和病鸡的迅速康复为特征,以法氏囊发炎、坏死、肿大和萎缩为主要病理变化,从而导致鸡的免疫缺陷和免疫抑制,也造成其他疫病的免疫失败,是目前养禽业最重要的疾病之一,引起人们普遍关注。1发病情况2012年3月6日,本地一养鸡户送5只24日龄的蛋鸡雏前来就诊。据养鸡户讲,这群鸡共有2000只,在10日龄和14日龄分别对鸡进行了新城疫、禽流感免疫。18日龄时出现了白色粘稠或水样的粪便,不喜欢吃食,闭目昏睡,之后鸡场内的鸡只迅速发病,发病率达60%~70%,并有零星死亡,到22~23日龄时死亡率可达10%~20%。经临床察看、尸体解剖检查、鸡胚     

猪链球菌2型分泌核酸酶(SsnA)的表达、ELISA方法建立及其在鉴别诊断中的应用

猪链球菌2型(Streptococcussuis type 2,SS2)是一种广泛分布的人畜共患病原菌,严重危害着人类健康和养猪业的发展。本试验旨在研究分泌核酸酶基因(SsnA)作为分子诊断标识在对SS2感染的鉴别诊断中所起的作用。作者以SS2-LT菌株基因组DNA为模板,通过PCR扩增SsnA基因片段,将该片段克隆到表达载体pET-28a(+)中,在大肠杆菌BL21(DE3)中成功表达,获得大小为46 ku的融合蛋白,经SDS-PAGE和Western blot分析表明,重组蛋白质具有抗原反应活性。以纯化的融合蛋白作为包被抗原,建立了SsnA-ELISA鉴别诊断方法。对已知背景的人工感染及疫苗免疫血清和临床血清进行检测,比较感染血清和免疫血清的检测结果,结果发现两者差异显著(P<0.05),表明建立的SsnA-ELISA方法具有良好的检测效果。利用该方法对采集自8个省份的1 446份血清进行检测,显示SS2的阳性率为0%~14.77%,平均阳性率为5.39%。本研究结果表明:猪链球菌2型SsnA可以作为一个良好的鉴别感染的分子诊断标识;对临床血清的检测结果表明感染及流行与气候环境存在明显的关系。     

中草药微生态制剂对鸡柔嫩艾美耳球虫防控效果的研究

为探究中草药微生态制剂对鸡柔嫩艾美耳球虫预防效果,将200只1日龄白羽肉鸡随机分成5组,分别为中草药微生态制剂组、磺胺药组、地克珠利组、不感染不用药组、感染不用药组。将各种药物按照有效添加量与饲料混合,中草药微生态制剂组的有效添加量为2g/kg,地克珠利组的有效添加量为1g/5kg,持续添加20d后,用柔嫩艾美耳球虫分离株孢子化卵囊感染鸡,再持续添加8d,磺胺药组的有效添加量为2g/kg,在感染球虫后持续使用3d,检测抗球虫指数、细胞因子水平、肠道病理变化等指标评价其抗球虫效果。结果显示:相较于磺胺、地克珠利,中草药微生态制剂能够降低鸡的死亡率,抗球虫指数能达到176.57,显著提高了IFN-γ、IL-2、IgG、SIgA表达水平,降低盲肠病变损伤程度,说明该中草药微生态制剂可有效防控鸡球虫病。     

郑州市郊区土壤综合肥力评价及空间分布研究

用修改后的内梅罗公式作为土壤肥力的评价模型,将传统的统计方法与地统计学方法及GIS技术相结合,研究了郑州市土壤肥力的空间变异规律,对郑州市土壤质量进行了定量化的评价。结果表明,郑州市土壤速效磷以差级水平为主,全氮含量中等之外,pH、速效钾、CEC和有机质均以中等级以上水平为主;相对来说,速效磷含量总体较低是郑州市土壤肥力的主要限制因子郑州市土壤综合肥力系数的空间分布总体上具有以下特征:在东北西南方向上,土壤的综合肥力系数很较低,大面积处在差的水平,其中少面积具较高肥力。东南和西北方向的肥力较高,大部分处在良和中的水平。