猪垂体特异性转录因子1基因cDNA的克隆及序列分析

本试验根据公开发表的猪POU1F1基因序列设计1对引物,提取猪垂体总RNA,通过RT-PCR方法扩增出POU1F1基因cDNA全序列,扩增产物用琼脂糖凝胶检测为预期的876 bp特异性条带。将扩增产物克隆入PTZ57R/T载体进行序列测定。经DNAStar软件分析序列与已发表序列同源性为99.7%,克隆获得的序列为进一步对猪POU1F1基因不同拼接形式功能性研究奠定了基础。     

应用4个繁殖性状候选基因对太湖猪群体遗传结构分析

采用PCR-RFLP技术分析雌激素受体(ESR)基因、促卵泡素β亚基(FSHβ)基因、催乳素受体(PRLR)基因和视黄醇结合蛋白4(RBP4)基因在太湖猪不同类群中的分布情况。结果表明:ESR基因在小梅山猪、二花脸猪、枫泾猪中B基因频率较高,分别为0.629,0.762,0.649;FSHβ基因在小梅山猪、二花脸猪、枫泾猪中AA基因型频率较高,分别为0.875,0.881,0.833;PRLR基因在小梅山猪、二花脸猪、枫泾猪中AA基因型频率分别为0.631,0.571,0.281;RBP4基因在小梅山猪、二花脸猪、枫泾猪猪群中AA基因型频率较高,分别为0.593,1.000,0.900。对不同基因的特性分析表明:ESR、FSHβ、PRLR和RBP4在3个类群中的多态信息含量和杂合度均不高,大多为中低等多态位点。     

浅谈厚卵砾石层成井施工

近几年来,我院在松花江流域及其他河漫滩地层进行凿井施工,水系纵横,卵砾石层十分发育。随着钻进工作量逐年增加(累计近万米),使我们对厚卵砾石层成井施工有了新的认识。 1.做好充分的准备工作 首先要根据地层资料正确地选择设备、安装、材料等,还要做好厚卵砾石层钻进的思想、技术及物资准备工作。既要克服思想麻痹大意,技     

影响猪精子介导基因转移效果的因素研究

为优化猪精子载体法技术参数,利用荧光定量PCR、荧光显微镜检测和精液常规检测方法,分析不同DNA转染剂、不同孵育温度和不同形态DNA对猪精子转染外源DNA的影响。结果表明,PEI和TransFast转染剂能极显著提高猪精子转染效果,且PEI优于TransFast,而NanoFect转染剂包裹DNA不能转染精子。随着转染温度的升高,精子的活力和活率均明显下降,而转染率和内化外源DNA量基本保持稳定,而吸附外源DNA量呈下降趋势。环状DNA和线性化DNA在与精子共孵育后,两者的精子活力、活率、转染率和内化外源DNA量差异均不显著,精子吸附线性化DNA量极显著高于环状DNA量。综合分析表明,外源DNA形态对猪精子转染效果无显著影响;PEI和TransFast能够显著提高猪精子转染效果;共孵育温度以17℃为最佳,本结果为开展精子载体法制备转基因猪研究提供了基础试验依据。     

猪PSP-Ⅰ/PSP-Ⅱ的生物学特性研究

精浆是精子悬浊在精液中的液体,是附睾和雄性性腺分泌的相当复杂的混合物。精浆的蛋白质组成因不同的家畜而异,在不同的家畜上的报道表明,精浆中包含的蛋白质因子不仅影响精子的受精能力,还在影响雌性动物的繁殖生理学方面发挥重要的作用〔1~2〕。受精起始于精子表面的凝集素与卵母细胞透明带寡聚糖的相互作用。公猪的精浆蛋白是一个糖蛋白家族,它们的分子量在12~16kDa之间。AQN-1、PSP-I、PSP-Ⅱ、AQN-3和AWN(1和2)是精囊腺上皮细胞主要分泌物,他们占精液中总可溶性蛋白的80%〔3,4〕。另外,AWN-1由睾丸网和直精小管上皮细胞合成。…     

扬州鹅不同世代及亲本早期生长发育和肉用性能比较

对扬州鹅零世代(Y0)、扬州鹅一世代Y1(Y0×Y0)、回交一世代Y1(b父本×Y0)、父本中型白鹅、母本太湖鹅早期生长发育、屠宰性能进行了研究,并对改进效果进行了比较。结果表明:10周龄平均体重Y0比太湖鹅提高318.5g,Y1比Y0提高635.44 g,生长速度顺序为Y1>Y1b>中型白鹅>Y0>太湖鹅;10周龄肉用性能比较,Y0屠宰率比太湖鹅提高4.7%,Y1与Y0接近。Y1全净膛率、半净膛率最高,太湖鹅最低,全净膛率Y0比太湖鹅提高2.46%,Y1比Y0提高12.13%,半净膛率Y0比太湖鹅提高3.06%,Y1比Y0提高15.99%,胸肌率、腿肌率Y0比太湖鹅分别提高0.7%、0.76%,腿肌率Y1与Y0接近,胸肌率Y1比Y0降低0.67%。     

ESR和FSH β基因对苏太猪断奶存活率影响的研究

采用PCR-RFLP,PCR-DSCP技术分析了苏太猪雌激素受体基因(ESR)和促卵泡素β亚基基因(FSH β)的基因型对断奶存活率(LW)的影响.结果表明:ESR基因在初产母猪中,LW在ESR基因BB基因型和AA、AB基因型间存在显著的差异(P＜0.05),且BB基因型＞加基因型＞AA基因型.FSH β各基因型,在初产母猪和经产母猪中对LW的影响均不显著(P＞0.05).合并基因型对初产和经产母猪LW的影响显著(P＜0.05),在初产母猪中,BBBB、AABB、ABBB基因型为优秀的合并基因型,且合并基因型的遗传效应高于各个基因效应的简单加和.     

小梅山猪发情周期生殖激素变化的研究

以ESR基因BB型小梅山母猪、大白母猪为研究对象,测定发情周期血清生殖激素(雌二醇、雌三醇、孕酮、促卵泡素和促黄体素)浓度,探讨小梅山猪高产的内分泌机制。结果表明:小梅山猪雌二醇、孕酮浓度均显著(P<0.05)高于大白猪,大白猪雌三醇和促黄体素浓度显著(P<0.05)高于小梅山猪,而两品种猪促卵泡素则无显著差异。初步认为在诸多生殖激素动态相互作用中,雌激素和孕酮是决定小梅山母猪(ESR基因BB型)繁殖力的主效激素。     

不同孵育时间对猪精子转染外源DNA效果的影响

建立稳定的精子载体法技术体系对家畜的转基因育种等研究具有重要意义.为获得公猪精子与DNA最佳共孵育时间,优化建立猪精子载体法技术体系,本研究通过定量PCR、荧光显微镜检测和精液常规分析方法等,研究分析猪精子与DNA不同共孵育时间对猪精子活力、活率、DNA转染率、吸附DNA和内化DNA量的影响.结果表明,多聚乙烯亚胺(polyethyleneimine,PEI)包裹的标记DNA与精子共孵育15、30、60和90 min后,随着孵育时间的延长,精子活力和活率有极显著下降(P＜0.01),而精子转染率呈极显著(P＜0.01)或显著(P＜0.05)上升,吸附外源DNA量和内化外源DNA量也呈上升趋势,但是30 min后不同孵育时间之间差异不显著(P＞0.05).此外,随着共孵育时间的延长,与精子转染率提高幅度相比,精子活力和活率的下降幅度更明显.综合考虑精子活力、活率、转染率、吸附DNA量和内化DNA量等参数,猪精子与外源DNA共孵育时间以30 min为最佳.