配子水平上动物性别控制的研究进展

动物性别控制是指通过人为干预获得所需性别后代的技术,是生命科学的重要研究课题之一。文章介绍了动物性别控制的机理以及实际生产意义,并从配子水平上阐述动物性别控制的研究方法,以及对今后研究的方向进行展望,为动物性别控制进一步应用于实际生产提供现实依据。     

Temperature and storage period over spermatic parameters of jundiá, Rhamdia quelen (Quoy & Gaimard, 1824)

The aim of this work was to evaluate the spermatic parameters of jundia, Rhamdia quelen, semen stored for short periods under different temperatures. Fifteen males were used in a time factorial experimental design (13 × 3 × 3 × 3). The sperm was stored at: 15; 25 and 35°C and activated in water at: 15; 25 and 35°C each, respectively, within storage periods of: 0; 2; 4; 6; 8; 10; 12; 16; 20; 24; 32; 40 and 48 h after collection. The treatments were performed in triplicates and in sequential protocols every 50 h. The motility parameters were evaluated using Pearson's correlation analysis and the significant parameters (P < 0.05) were summarized using principal component analysis forming two predicted groups. Group 01 composed the following parameters: curvilinear velocity, wobble and linearity; group 02 comprised average path velocity, straight line velocity, beating cross frequency and motility rate. Effects (P < 0.05) of treatments were observed only in group 02, with interaction between time and temperature of exposure and between exposure time and water temperature. Superior results of spermatic parameters of group 02 were observed right after collection. However, the exposure and spermatic activation at 15°C assured significant results 48 h after collection when compared with 25 and 35°C.     

紫贻贝配子细胞表面糖基的定位研究

细胞表面糖蛋白中糖的特性对于细胞的相互识别起重要作用,配子细胞表面糖配基的差异恰恰体现不同物种间受精作用的特异性,本研究分别选用可以特异性结合半乳糖、葡萄糖、甘露糖、岩藻糖的FITC标记凝集素,对紫贻贝配子细胞中对应的糖进行研究。结果显示,4种糖在卵细胞边缘的标记特征不明显,仅半乳糖和葡萄糖在一些卵细胞边缘有区域性分布,但在细胞质区,这4种糖均有少量分布;半乳糖和岩藻糖在贻贝的精巢的精细胞和成熟精子区为较均匀的弱阳性标记,甘露糖仅在输精小管边缘有分布,葡萄糖的含量相对较多,但也只是在输精小管边缘以及成熟精子区有一定的标记。上述结果表明,紫贻贝配子细胞表面不同糖基的分布和含量存在一定的差异,造成配子间起到识别作用的糖蛋白组成和结构不同,决定了紫贻贝配子识别的特异性。     

The application of tannic acid to the elimination of egg stickiness at varied moments of the egg swelling process in pikeperch,Sander lucioperca (L.)

The aim of this article was to analyse the process of pikeperch, Sander lucioperca, egg swelling and to apply tannic acid to eliminate egg stickiness at different moments of the swelling process on artificially obtained eggs. The first experiment involved observation of egg swelling process and the second determined the effect of temperature (12, 14 and 16°C) on the egg swelling rate. The third experiment involved elimination of egg stickiness in a tannin solution (0.75 g L^?1) where eggs were submerged in a solution for 0.5, 1, 2 and 5 min – 5, 10, 15, 20, 25 and 30 min following gamete activation. The results indicate that the pikeperch egg swelling process lasts 30 min. It was found that the temperature did not affect the process duration. The results of the third experiment showed that the effectiveness of tannic acid application in egg stickiness elimination increases with time. The best result was obtained in groups of eggs submerged for 1 and 2 min (86.5% and 80.5% of larvae were obtained respectively) 30 min following the gamete activation. The results presented in this study for the first time indicate the possibility of highly effective procedure of egg stickiness elimination with tannic acid in pikeperch aquaculture.     

毛白杨杂种三倍体的2n雌配子形成途径鉴定

由于受杨树大孢子母细胞减数分裂不同步性影响,通过施加理化处理诱导杨树大孢子染色体加倍授粉杂交获得的三倍体,可能既包括来源于第一次减数分裂核复原形成的2n雌配子(FDR),也有来源于第二次减数分裂核复原形成的2n雌配子(SDR),难以进行表型鉴别,而通过分子标记分析可以实现不同类型2n雌配子的区分。本研究以通过高温诱导毛白杨大孢子染色体加倍所获得的87株三倍体及其亲本为材料,从母本杂合且与父本有差异的SSR多态性引物中,筛选出5对适宜于2n配子诱导途径来源鉴定的重组率较低的SSR分子标记。在此基础上,利用这5对低重组率SSR分子标记,开展毛白杨杂种三倍体的2n雌配子诱导途径来源分析。结果表明,不同毛白杨杂种三倍体的2n雌配子相应简单重复序列区域的等位基因配置不同,利用筛选出的5对低重组率SSR标记可以实现毛白杨杂种三倍体的2n雌配子诱导途径鉴定,其中35株三倍体来源于FDR型2n配子,另52株来源于SDR型2n配子。此外,选用5个位于高重组率位点的SSR引物进行检测分析,结果验证了随机挑选的SSR引物用于鉴别结果是不完全可靠的,只有挑选低重组率的SSR位点才可能准确鉴定2n配子来源。开展毛白杨杂种三倍体的2n配子诱导途径鉴定研究,对于FDR、SDR不同形成途径的2n配子传递亲本杂合性分析,以及毛白杨三倍体育种策略制定等具有重要意义。      

精子抗原基因在猪生殖道及成熟精子中的表达特性

【目的】揭示若干精子抗原基因(SPAG1、SPAG5、SPAG6、SPAG11C和SPAG11E)在梅山公母猪生殖道及成熟精子中的mRNA时空表达规律。【方法】利用RT-PCR技术分析各基因在生殖道和精子中组织表达谱,利用半定量RT-PCR分析其在初生至150d梅山公猪睾丸中的发育性表达特性。【结果】5个基因在梅山公母猪生殖道组织中呈现不同的表达特性。其中SPAG1在睾丸中表达丰度最高,在精囊腺、前列腺、附睾体、子宫角和输卵管呈现中等丰度表达,而在附睾尾、子宫颈和卵巢的表达信号较弱。SPAG5在睾丸中表达丰度最高,在前列腺、附睾体和子宫颈中表达信号较弱。而SPAG6在睾丸中高丰度表达,在输卵管中呈现中等丰度表达,在子宫角的表达信号很弱。SPAG11C在附睾体和睾丸中高水平表达,而SPAG11E则在附睾体和附睾尾中低水平表达。在成熟精子中只有SPAG11E有mRNA表达。SPAG1、SPAG5、SPAG6和SPAG11C基因在公猪睾丸中发育性表达分析表明,总体上所检测的4个精子抗原基因的表达水平都随着日龄增加而提高,但存在一些差异。其中SPAG1和SPAG11C呈现相似的表达规律,在初生和30日龄时表达相对较低,但在60、90、150日龄都有显著提高(P0.05)。而SPAG5在初生和30日龄时表达也相对较低,在60和90日龄时均有显著提高(P0.05),但150日龄时略有下降,但差异不显著。SPAG6在初生和30日龄时表达水平很低,至60日龄有显著提高(P0.05),90日龄时维持这一水平,而到150日龄时则有显著下降(P0.05)。【结论】SPAG1、SPAG5、SPAG6、SPAG11C和SPAG11E在梅山公母猪生殖道组织广泛表达,在睾丸组织中其mRNA表达水平变化与性发育相一致,SPAG11E在精子中存在低丰度mRNA表达。     

苦马豆素人工抗原的合成及其免疫原性的研究

本实验用溴乙酸制备的活性酯与苦马豆素（SW）反应得到季铵盐,与牛血清白蛋白（BSA）偶联后,产物经透析、冻干后呈白色片状结晶。通过化学检验,制备的结晶为SW—BSA人工抗原,经SDS—PAGE电泳分析,分子量为29．0Kda,平均每个牛血清蛋白分子上结合47个季铵盐分子。将SW—BSA免疫小鼠后,采用间接ELISA实验检测血清抗体效价,结果表明合成的人工抗原具有较好的免疫原性,为动物小花棘豆中毒的防治奠定了基础。     

H-Y抗原候选基因的研究进展

雄性特异性组织相容性抗原(male specific minor histompatibility antigens,H-Y抗原)是由Y染色体上的基因编码,在雄性动物细胞中普遍表达(包括胚胎和滋养层细胞)。H-Y抗原不仅能引起基因型相同的雌性动物排斥雄性组织,也能导致人白细胞抗原匹配干细胞移植术后出现移植抗宿主性疾病(GVH)。细胞毒性T淋巴细胞检测到几个不同的H-Y抗原表位,这些肽是从胞内蛋白分离出来,由主要组织相容性复合分子结合呈递在细胞表面。H-Y抗原肽与人白细胞抗原Ⅰ类和Ⅱ类分子特异结合参与免疫反应,从而影响移植结果。近年来越来越多的文献报道了H-Y抗原的相关研究,作者主要综述编码H-Y抗原的相关候选基因,并对它在疾病等方面的前景作出了一些展望。     

白菜2n配子诱导及有性多倍化创制四倍体的研究

以165份白菜(2n=2x=20)品系中筛选出的11份含2n配子较高的株系为材料,用不同浓度秋水仙素处理花蕾,诱导2n配子;以其为父本,以四倍体雄性不育系为母本进行有性多倍化杂交,从F1中筛选鉴定四倍体。结果表明:用0.20%秋水仙素5~10μL微量注射3mm的二倍体白菜花蕾,处理1次,诱导2n配子效果最好,2n配子频率达20.20%,是未经秋水仙素处理对照的3.63倍。80株杂交F1中,染色体计数显示14株为四倍体(2n=4x=40),占17.5%。与二倍体相比,有性多倍化获得的四倍体在植株形态、气孔、花器官等方面均表现巨大性,气孔密度和结实率降低。