3-羟基,12-羧基印楝素的制备、结构鉴定及生物活性测定

对印楝素进行水解反应,得到3-羟基,12-羧基印楝素,以浸叶喂食法研究了3-羟基,12-羧基印楝素对小菜蛾Plutella xylostella、斜纹夜蛾Spodoptera litura和棉铃虫Heliothis armigera的生物活性.结果表明,在室温敞开体系贮存15 d后,印楝素、印楝素干粉和印楝种子甲醇粗提物溶液中印楝素大部分降解,但溶液仍对斜纹夜蛾幼虫具有良好的毒杀活性.处理后24 和48 h,3-羟基, 12-羧基印楝素对斜纹夜蛾3龄幼虫的AFC50值分别为37.19 和 50.18 μg/mL.在3 μg/mL的剂量下处理后24 h,3-羟基,12-羧基印楝素对小菜蛾3龄幼虫的拒食率为 46.69 %;在5 μg/mL的剂量下处理后24 h,对棉铃虫3龄幼虫的拒食率为75.65 %;在3 μg/mL的剂量下处理后72 h,小菜蛾3龄幼虫的死亡率为61.28 %;在5 μg/mL的剂量下处理后72 h,棉铃虫3龄幼虫的死亡率为47.65%;在 2.0 μg/mL 的剂量下处理后72 h,棉铃虫3龄幼虫的体质量下降率为48.93 %;在1.0 μg/mL的剂量下处理后 72 h,斜纹夜蛾3龄幼虫的体质量下降率为41.18 %.     

鸡新城疫Ⅰ系疫苗诱导鸡IL-2基因转录及cDNA克隆的研究

应用RT-PCR方法从鸡新城疫 系疫苗接种鸡胚的脾淋巴细胞中扩增出IL-2基因cDNA。结果表明,以鸡新城疫 系疫苗稀释50倍或100倍接种10日龄鸡胚,培养48h的脾脏提取mRNA的扩增效果最好。测序结果显示,所扩增片段的核苷酸序列及其所编码的氨基酸序列,与已发表的IL-2基因的同源性分别为97.7%～99.8%和95.1%～99.3%。其中第8位、68位和130位氨基酸(分别是L,V和S)的变异是其他品种鸡所没有的。     

鸡IL-2基因cDNA输卵管组织特异性表达载体的构建与表达

将克隆并测序的鸡卵清蛋白基因5′端调控序列和鸡IL-2基因cDNA,以串联方式置于真核表达载体pcDNA3的CM V启动子下游,构建了鸡输卵管定位表达载体pcDNA3-OVP-IL 2。将真核表达载体pcDNA3-IL 2和构建的输卵管定位表达载体pcDNA3-OVP-IL 2分别转染鸡输卵管上皮细胞,激素诱导72 h后,用淋巴细胞转化试验检测细胞培养液中IL-2的表达水平及生物学活性。结果显示,转染细胞均可表达IL-2,且所表达的IL-2有促进T淋巴细胞转化和淋巴母细胞成熟的活性;转染pcDNA3-OVP-IL 2的输卵管上皮细胞表达产物在1∶256稀释水平下仍具有促进T淋巴细胞转化和淋巴母细胞成熟的活性。转染pcDNA3-IL 2载体的输卵管上皮细胞虽有IL-2表达,但水平较低。     

不同培养基对姬菇P12菌丝体生长的影响

[目的]探明姬菇P12的生物学特性以及同化碳源、氮源和无机盐等的能力。[方法]通过单因素试验和正交试验研究了碳源、氮源、无机盐和pH值对姬菇P12菌丝体生长的影响。[结果]在5种碳源中,姬菇P12菌丝体在蔗糖中的生长速度最快,依次是葡萄糖、麦芽糖和淀粉,乳糖最差;在5种氮源中,蛋白胨最好,酵母膏、豆饼粉和黄豆粉次之,(NH4)2SO4最差;在4种供试无机盐中,差异均不显著(P>0.05),以MgSO4较好。姬菇P12菌丝体生长的最适培养基为:4.0%蔗糖、0.10%蛋白胨、0.10%MgSO4,培养基的最适pH值为7.0。在这种培养基中姬菇P12菌丝体的生长速度最快,长势最好。[结论]姬菇P12菌株对不同的碳源、氮源和无机盐的同化能力不同。     

棉花FAD 2-1基因的克隆及其ihpRNA和amiRNA干扰载体的构建

 采用RT-PCR方法克隆了棉花△-12脂肪酸去饱和酶基因(GhFAD2-1)的cDNA全长序列,该基因含有1158 bp的完整开放阅读框。棉花FAD2-1是种子中编码催化油酸形成不饱和脂肪酸的关键酶的基因,选取GhFAD2-1基因中的一段特异的515 bp片段,构建了种子特异性启动子NAPIN调控的ihpRNA干扰表达载体pFGC1008-NAPIN-FAD2-1,同时构建了针对GhFAD2-1基因的人工miRNA表达载体pCAMBIA1302- amiRNA-FAD2-1。     

Tillage effects on soil organic matter in density fractions of a Cerrado Oxisol

Reclamation of Brazilian cerrados (savannas) has been intensified in the last decades, with implications for soil quality and soil organic matter (SOM) dynamics. Studying the impact of different tillage systems is essential to define better strategies for land use in Cerrado, which may favor C sequestration and improve soil quality. We used density fractionation and ¹³C natural abundance to assess changes in SOM in an Oxisol previously under a cerrado sensu-stricto following 30 years of cultivation. The objectives of the study were to: (i) evaluate the long-term impact of tillage systems on SOM stocks in a Dark Red Latosol (Oxisol) from the Cerrado Biome, and (ii) better understand the dynamics of SOM in different density fractions of this soil. Cultivation led to compaction, which significantly increased soil bulk density. This resulted in the systematic overestimation of C and N stocks in cultivated areas when compared to the natural cerrado. Conversion of the cerrado into cropland using plow tillage (PT) or no-tillage (NT) system did not alter the total C (100 Mg ha⁻¹) and N (7 Mg ha⁻¹) stocks in the first 45 cm depth at the end of 30 years of cultivation. However, about 22% of the total C was replaced by C from maize. The relative replacement of C decreased following the order: free light fraction (F-LF)>heavy fraction (HF)>occluded light fraction (O-LF). The low substitution in the O-LF was attributed to a possible presence of charcoal. Converting cerrado into cropland significantly decreased F-LF quantity. The proportions of C replacement in this fraction were higher in PT than NT, suggesting a faster turnover in PT. Nevertheless, because most C (95%) was held in the HF, C dynamics in the whole soil were controlled by the behavior of this fraction. The maintenance of C levels even at the end of 30 years of cultivation and the lack of differentiation between NT and PT were attributed to the high clay contents and Fe+Al oxi-hydroxides concentrations of the studied soil as well as to a sufficient C supply by the maize crop.     

中国人白细胞介素-12 (hIL-12)cDNA克隆及序列分析

根据已发表的IL-12两个亚基P35 cDNA序列（NM-000882）与P40 cDNA序列（NM-002187）设计2对引物。以LPS刺激的人脐血淋巴细胞为材料，采用RT-PCR技术从总RNA扩增hIL-12基因，包括完整的前体蛋白编码序列。所得到的序列与GenBank中发表的一致，但与CLMF和NKSF序列有所差异。P35同CLMF相比，244aa密码子GAC（Asp）→GAT（Asp）、247aa密码子ACG（Thr）→ATG（Met）；与NKSF比较，44aa密码子GTC（Val）→GTG（Val）。P40同NKSF比较239aa密码子AAC（Asn）→AAG（Lys），291aa密码子ACC（Thr）→ACG（Thr）；P40同CLMF相比较，氨基酸与核苷酸序列完全一致。通过与不同物种氨基酸及核苷酸序列比较分析，P40亚基与其它动物的同源性80％以上，P35亚基与其它动物同源性在70％。     

山羊实验性内毒素血症时颈静脉、肝静脉及门静脉血TNF-α和IL-6的动态变化

在实验性内毒素血症诱导的全身性炎症及免疫反应中,肝脏发挥着十分重要的作用.为了进一步分析这种机能,选用8头1～2、15～22kg的去势公山羊,外科手术装置颈静脉瘘管、门静脉瘘管和肝静脉瘘管.手术4 d后,从颈静脉一次性灌注脂多糖(1ipopolysacchride,LPS,3μg/kg)生理盐水溶液,于灌注前、灌注后1～5、8 h采集各静脉血样,并测定体温和白细胞总数.分离血浆,采用放射免疫测定法检测其中TNF-α和IL-6水平的动态变化.结果表明,在LPS灌注后0.5 h直肠温度即有上升,并保持在较高水平达4 h,其后迅速下降.白细胞总数在灌注LPS后l h内迅速降低,在2～8 h内缓慢回升.灌注后l h颈静脉、肝静脉和门静脉血TNF-α水平迅速上升达到峰值,分别为0.76±0.052 ng/mL、0.82±0.050ng/mL、0.711±0.071 ng/mL,其中以肝静脉血中TNF-α的浓度变化最为显著.颈静脉血中的IL-6水平在灌注后1 h达到峰值,1～3 h则逐渐回落到基础水平并一直保持到实验结束;肝静脉和门静脉血IL-6水平在0～2 h范围内呈下降趋势,在4 h出现峰值,4 h后则呈下降趋势.颈静脉、肝静脉及门静脉血IL-6的峰值分别为70.325±4.094pg/mL、80.337±14.919pg/mL和74.433±25.187 pg/mL.推测肝脏及腹腔消化道等器官IL-6的分泌除受TNF-α和IL-1β的诱导外,还可能受其它因素的影响.     

多抗节水型小麦品种沧麦12的选育及利用

[目的]为小麦抗逆育种奠定基础。[方法]结合沧麦12小麦品种的育种经验,阐述沧麦12的育种方法、特征特性和栽培技术。[结果]沧麦12节水、抗寒、抗病、丰产稳产,遗传背景丰富,适宜河北省黑龙港流域冬麦区种植。2013年通过河北省品种审定委员会审定通过,并申请国家植物品种权保护,公告号为CNA010879E。[结论]沧麦12的抗旱耐盐等抗逆性状与丰产性及产量潜力等性状有效结合起来。