肉碱对中华鳖脂肪代谢的影响

选用1 170只211日龄中华鳖进行养殖试验,研究不同剂量(0,50,100 mg/kg)的l-肉碱对中华鳖脂肪代谢的影响. 通过解剖取样测定肝脏、四肢肌肉和脂肪块的脂肪代谢酶活性及肌细胞内脂肪酸β-氧化反应等生化指标,探讨其作用机理. 结果表明,在饲料中添加100 mg/kg l-肉碱显著降低了中华鳖四肢的脂肪沉积量的27.11%(P<0.01),肝脏和脂肪中的苹果酸脱氢酶及脂肪中激素敏感脂酶总活力分别提高了24.32%(P<0.01)、32.22%(P<0.01)和14.88%(P<0.05),肌肉和脂肪中脂蛋白脂酶总活力分别提高了27.08%(P<0.01)和13.18%(P<0.05),肌肉中游离肉碱、总酸不溶肉碱含量分别升高了16.92%(P<0.01)和38.24%(P<0.01).     

Development of an Indirect Enzyme-Linked Immunosorbent Assay for Seromonitoring Contagious Bovine Pleuropneumonia Using Recombinant Lipoprotein LppQ of Mycoplasma mycoides subsp mycoides SC as Antigen

Mycoplasma mycoides subsp mycoides SC （MmmSC） is the etiological agent of contagious bovine pleuropneumonia （CBPP）. The lipoprotein LppQ encoded by lppQ gene is specific to MmmSC and is found in the type strain and in field strains isolated in Europe, Africa, and Australia, as well as in vaccine strains. No serological cross-reactions were observed with the related mycoplasmas of the Mycoplasma mycoides cluster. The N-terminal domain of the mature lipoprotein LppQ is hydrophilic, and it induces a strong, specific, early, and persistent immune response in naturally and experimentally infected animals. Mycoplasma-specific TGA （Trp） codons are utilized as stop codons in most other organisms. The lppQ N-terminal fragment from MmmSC HVRI X strain, the Chinese strain for CF antigen production, was mutated with one-step overlapping extension PCR. Sequence analysis confirmed the successful mutation from A to G in codon 198 in the lppQ gene. The fragment containing the mutation site was subcloned into the pET32a expression vector. The recombinant protein with molecular weight of 42 kDa was purified using the Ni-NTA His.Bind purification kit, with a purity of up to 95%. Western blot indicated that the standard positive serum of CBPP could react with the recombinant protein. The purified protein was diluted to 0.35 μg mL^-1, and coated to microtiter enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） plates. Indirect ELISA reaction conditions were optimized. The value of P/N was determined to be 4.8 （0.934/0.193）, the sensitivity to be 95.8% （46/48）, and the specificity to be 98.9% （161/163）. 3 817 cattle serum samples from three different provinces were detected by the indirect ELISA and CFT. The Kappa value is 0.63, which is middle or high agreement between the two methods.     

鹅LPL基因外显子4、5、6克隆及序列分析

为揭示鹅脂蛋白脂酶(LPL)脂质和肝素结合区域的特性,对鹅LPL基因外显子4~6进行了克隆和序列分析。以皖西白鹅血清总DNA为模板,设计引物对鹅LPL基因的第4~6外显子区域进行扩增和测序,分析鹅与其他物种之间该区域的DNA序列同源性、密码子非随机应用以及相应氨基酸残基区域的亲水性。结果表明,鹅LPL基因外显子4~6的片段大小分别为112、234和243 bp,其序列与鸡LPL基因相应序列的同源性达到91.9%,与人、羊、牛、猪等哺乳动物的同源性为74%~77%;鹅与鸡密码子非随机应用的相似系数为0.839,与猪和鼠的相似系数为0.580~0.650;LPL中由外显子4~6编码的氨基酸残基有4个区域具有较大的表面概率,分别位于残基145~148、残基187~190、残基255~257和残基293~299区域,表面概率分别1.62~4.29、2.06~3.01、2.75~4.46和3.03~6.01,这些区域伴随有较强的亲水性。     

南极假丝酵母脂肪酶B的修饰与改造

南极假丝酵母脂肪酶B是用途最为广泛的脂肪酶之一,可用于许多有机化合物、医药中间体等的合成。为了改善南极假丝酵母脂肪酶B的催化性能,提高其环境适应性,同时提高蛋白的表达量,降低生产成本,从而使其更适于工业化应用,许多针对酶蛋白分子的修饰及改造方法已在南极假丝酵母脂肪酶B中得到大量应用。本文从化学修饰、理性设计和非理性设计3个方面详细综述了南极假丝酵母脂肪酶B的修饰与改造的关键技术,包括定点突变、蛋白质融合、易错PCR和DNA改组等,同时也介绍了以上技术在改良南极假丝酵母脂肪酶B特性方面的诸多成功实例。     

低温热处理对超高温灭菌乳中假单胞菌脂肪酶的活性影响

通过分析不同因素对假单胞菌脂肪酶活性的影响以及假单胞菌脂肪酶活性与超高温灭菌(UHT)乳脂肪上浮的关系,研究了控制UHT乳中假单胞菌脂肪酶活性和延缓脂肪上浮现象的措施。结果表明pH值对假单胞菌脂肪酶的活性有显著性影响(P<0.01),50、55、60℃(20min)的低温热处理能显著降低假单胞菌脂肪酶的活性(P<0.01)。贮藏试验表明低温热处理对控制UHT乳在贮存过程中的假单胞菌脂肪酶活性水平(P<0.01)和脂肪上浮现象(P<0.05)有明显的作用,而55℃和15min的低温热处理对缓解UHT乳在贮藏过程中的脂肪上浮现象最为有效。     

产脂肪酶乳酸菌对羊肉发酵香肠脂肪酸的影响

脂肪酶在肉制品加工中会影响风味物质的积累与产生,发酵肉制品生产中常通过添加产脂肪酶菌株来改善制品的风味。通过乳酸菌在代谢过程中分解三丁酸甘油酯产生透明圈的大小,判断菌株产脂肪酶的活力,同时结合脂肪酶基因Lip0069、Lip0893表达量的变化情况,筛选产脂肪酶能力较高的乳酸菌,研究该菌株对发酵香肠中脂肪酸的影响。结果表明,瑞士乳杆菌TR1-1-3代谢过程中产酶活力最强,编码脂肪酶的基因Lip0069、Lip0893表达量最高。发酵香肠试验组共检测到34种脂肪酸,其中饱和脂肪酸(Saturated Fatty Acids, SFA)16种、单不饱和脂肪酸酸(Monounsaturated Fatty Acids, MUFA)9种和多不饱和脂肪酸(Polyunsaturated FattyAcids, PUFA)9种。含量较高的MUFA主要是油酸(C18:1C9)、棕榈油酸(C16:1)、十七碳烯酸(C17:1)、肉豆蔻烯酸(C14:1)。含量较高的PUFA主要是亚油酸(C18:2C9)、亚麻酸(C18:3N6、C18:3N3)、花生四烯酸(C20:4)、二十二碳六烯酸(C22:6,Docosahexaenoic Acid,DHA)。TR1-1-3和ZF22组发酵2 d后,MUFA的含量明显上升(P0.05)。12 d时5个试验组MUFA的含量均达到最高,其中TR1-1-3增长比例最高,且与ZR、M组差异显著(P0.05)。TR1-1-3组发酵2 d后PUFA的含量发生了明显的变化(P0.05),12 d时TR1-1-3组PUFA的含量增长了54.17%,且与其他试验组相比差异显著(P0.05)。乳酸菌TR1-1-3可降低产品中SFA在脂肪酸中所占比例,明显加快MUFA、PUFA的增加速度及其含量,可为研究改善香肠脂肪特性提供良好的前景。     

血浆极低密度脂蛋白浓度的双向选择对肉鸡腹脂、肝脂和产肉性能的影响

对零世代８周龄血浆极低密度脂蛋白（ＶＬＤＬ）浓度进行降低腹脂的间接选择，一世代取得了明显效果：腹脂和肝脂向两极分化，其中肌胃脂和肝脂选择反应较大。低血浆ＶＬＤＬ的选择使腹脂降低，肝脂增加，对产肉性状未产生不利影响。９周龄腹脂率、板油率和肌胃脂率在高ＶＬＤＬ系分别高于低ＶＬＤＬ系２１％，１６％和５１％；肌胃脂率品系间差异极显著（Ｐ＜０．００１）。品系与性别互作对肌胃脂率有明显影响（Ｐ＜０．０５）。腹脂、肌胃脂存在性别差异，腹脂率雌性略高于雄性，而肌胃脂率雄性高于雌性。９周龄肝脂率，高ＶＬＤＬ系显著低于低ＶＬＤＬ系（Ｐ＜０．０１），雌性高于雄性。一世代８周龄血浆ＶＬＤＬ产生了直接选择反应，血浆ＶＬＤＬ浓度，高ＶＬＤＬ系高于低ＶＬＤＬ系。血浆ＶＬＤＬ存在性别差异，雄性高于雌性。一世代高、低ＶＬＤＬ系血浆ＶＬＤＬ和腹脂的变异系数仍然很大，继续对其选择仍然有效。由于血浆ＶＬＤＬ属中等遗传力，并且家系间差异显著，因此，在世代选育中应采取家系结合个体选择法     

Congenital lipoprotein lipase deficiency in hyperlipemic kitten siblings.

The nature of the hyperlipemia in two 3-week-old male kittens, one of which was presented with the owner's complaints of retarded growth and white streaks on its eyes, was studied. Hypertriglyceridemia, hypercholesterolemia, and reduced Post-Heparin Plasma Lipolytic Activities (PHPLA) were observed in both animals. One of the kittens, however, was more severely affected and in addition, had lipemia retinalis and a marked lactescent, hyperchylomicronemic serum in spite of a short-term fast before sampling. These findings are strikingly similar to those found in human Type I hyperlipoproteinemia due to familial Lipoprotein Lipase (LPL) deficiency. Diagnosis of persistent hyperlipemic syndromes in kittens should include the possibility of LPL deficiency as determined by PHPLA measurements.     

果蔬源胰脂肪酶抑制剂的筛选

通过从三油酸甘油酯释放油酸的释放率来判定胰脂肪酶活性的方法,研究并比较了30种果蔬乙醇提取物的减肥作用.30种果蔬70％乙醇提取物对胰脂肪酶作用的测定结果表明:青辣椒乙醇提取物对胰脂肪酶的抑制作用最强,抑制率为46.15％,山竹提取物抑制率为29.87％,白萝卜、柠檬和圣女果提取物对胰脂肪酶的抑制率均达到20％以上.大蒜提取物对胰脂肪酶有较强的促进作用(29.64％),陈皮和山楂提取物对胰脂肪酶的促进率分别为6.38％和7.66％.     

抑制膳食相关酶活性的红曲霉菌株的选育

为弄清红曲霉在降脂减肥方面的作用,进一步开发红曲产物类药物应用于市场,以产红曲红色素的红曲霉菌株为出发菌株,经60Co诱变,对抑制与膳食相关的α-淀粉酶、胰蛋白酶和脂肪酶3种酶活性的红曲霉菌株进行了选育。结果表明:选育出1株能显著抑制3种与膳食相关酶的突变菌株M3-19,菌株M3-19液体发酵产物对α-淀粉酶、胰蛋白酶、脂肪酶有明显的抑制作用,抑制率分别为55.83%、25.4%和31.5%。经传代10代遗传稳定。