东北红豆杉（Taxus cuspidata）细胞悬浮培养研究

用东北红豆杉的愈伤组织建立细胞悬浮系。培养研究发现，最适宜细胞生产的培养基仍为Ｂ５，最佳接种量应控制在２ｇ鲜重／瓶左右。在培养基中添加酷蛋白水解物经水解乳蛋白更利于悬浮细胞生物量的增加。培养基的ｐＨ值随细胞的培养周期而有相应的变化。     

具集中质量悬索在轴向激励作用下的主共振分析

针对具有集中荷载作用的两端固定悬索在悬索端点外激励作用下悬索系统发生的强迫振动,研究了激励频率接近悬索主共振频率时,系统产生的主共振.1)采用多尺度法,得到了不同振型的主共振分叉图和主共振分叉点的解析解;2)通过实例计算,得到了悬索的不同振型的主共振分叉图和主共振分叉点位置.     

疏水缔合阳离子淀粉的合成研究

本研究以环己烷为连续相,Span 80/Tween 80为分散剂,采用氧化还原引发体系,通过反相悬浮聚合技术,合成疏水缔合阳离子淀粉接枝共聚物。研究了反应温度,引发剂用量,反应时间对接枝性能的影响及溶解性能。并用IR、X衍射对共聚物进行了表征。结果表明:采用氧化还原引发剂可使聚合反应低温快速进行,在m(St)∶m(AM)∶m(DMDACC)∶m(OA)为4∶7.4∶1.5∶0.6时,引发剂用量3.1 mmol/L,30℃反应3 h,单体转化率92.6%,接枝率53.8%,粘均相对分子质量(MV)3.26×106。     

猪丁型冠状病毒在悬浮培养猪肾细胞LLC-PK1上的增殖特性分析

旨在分析猪丁型冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV)在悬浮培养的猪肾细胞LLC-PK1上的增殖特性,为PDCoV灭活疫苗的规模化生产提供细胞材料。采用逐步降血清法优化LLC-PK1细胞悬浮培养工艺;利用有限稀释法筛选PDCoV适应性细胞株;利用间接免疫荧光法鉴定PDCoV对LLC-PK1细胞的感染性;分别对PDCoV接种LLC-PK1悬浮细胞的初始密度、MOI、收毒时间、TPCK胰酶浓度等参数进行优化,确定最佳悬浮培养条件。成功筛选出可高效增殖PDCoV的单克隆悬浮细胞株LLC-PK1Sa,且利用其增殖的PDCoV可特异性的感染LLC-PK1细胞;PDCoV按MOI为10^-3接种于密度为2×10⁶ cells·mL^-1的LLC-PK1Sa细胞,当TPCK胰酶终浓度达到7.5 μg·mL^-1时,接毒后48 h收获的病毒液滴度最高。本研究首次实现了PDCoV在LLC-PK1Sa悬浮细胞中的高效增殖,并对悬浮培养条件进行了初步优化,可为PDCoV灭活疫苗的规模化生产提供理论参考。     

生物反应器培养BHK-21悬浮细胞增殖伪狂犬病病毒工艺优化

旨在筛选伪狂犬病病毒（PRV）敏感的BHK-21细胞并分析其生长和病毒增殖特性,优化反应器中BHK-21悬浮细胞的培养和病毒增殖条件,建立生物反应器培养BHK-21悬浮细胞增殖PRV工艺。本研究利用响应面和单因素优化法,以细胞生长动力学特性、TCID₅₀病毒滴度等参数为指标,优化1.2 L生物反应器中BHK-21悬浮细胞的最佳培养和增殖病毒条件,在5 L生物反应器中进一步批培养验证。结果显示,筛选获得PRV高敏感的BHK-21-02贴壁细胞和BHK-21-XF02悬浮细胞各1株,BHK-21-XF02悬浮细胞在含3%血清的SLM-BHK低血清培养基和SFM-BHK无血清培养基中均能实现良好的生长和病毒增殖。利用响应面法优化得到1.2 L反应器最佳培养条件为接种密度1.20×10⁶cells·mL^-1、搅拌转速120 r·min^-1、DO值40%,5 L反应器批培养72 h细胞密度可达（7.61±0.18）×10⁶ cells·mL^-1、细胞活率为（96.93±1.18）%。利用单因素法优化得到1.2 L反应器最佳病毒增殖条件为MOI 0.001、培养温度37℃、细胞密度2.0×10⁶cells·mL^-1、搅拌转速80 r·min^-1,5 L反应器批培养接毒后48 h病毒滴度达到最大值（7.13±0.11） lgTCID₅₀·mL^-1。本研究可为PRV疫苗相关研究和规模化生产提供参考。     

低温驯化的黑荆树悬浮培养细胞中可溶性蛋白质含量变化*

低温驯化能够诱导黑荆树悬浮培养细胞增强抗冻性，ＬＴ５０从－４．３℃下降到－８．２℃。低温驯化诱可溶性蛋白质含量增加，其增加的时间进程与细胞抗冻性发育呈平行关系。环已亚胺抑制可溶性蛋白质含量增加，同时也抑制细胞抗冻性发育。在低温驯化期不同时间加入环已亚胺抑制抗冻性发育，表明低温驯化１０ｄ后抗浆性发育接近完成。糖对增加驯化细胞中可溶性蛋白质有促进作用，加快增加含量的时间进程，但对最终提高蛋白质含量水平     

黄竹细胞悬浮培养和原生质体分离*

以牡竹属黄竹（ＤｅｎｄｒｏｃａｌａｍｕｓｍｅｍｂｒａｎｃｅｕｓＭｕｎｒｏ）的竹节及无菌苗根颈为外植体，培养于含有５ｍｇ／Ｌ２，４－Ｄ、０．２ｍｇ／ＬＫＴ和２００ｍｇ／ＬＬＨ的ＭＳ培养基上诱导愈伤组织，然后移至相同成份或不同浓度２，４－Ｄ的液体培养基中，进行悬浮培养，以建立分散性良好的悬浮细胞系。利用悬浮细胞和无菌苗叶片经酶解获大量原生质体，其产量分别约为每克鲜重２．５×１０５个和５×１０５个，活力均可达８０％。     

Development, manufacture and application of Beta-Cypermethrin aqueous capsule suspension

The optimal formula of Beta-Cypermethrin aqueous capsule suspension was screened out through the experiment,preparation and manufacture of basic formulas, which has no sedimentation, suspended drops of oil, peels and agglomerating and the diameter of capsule is in range of 10-30μm, conformed to the technical requirement. The aftereffect of the 3.3% Beta-Cypermethrin aqueous capsule suspension which was manufactured according to the optimal formula was up more than 25 days. The experiments on controlling the larvae of Dendrolinmus superans Butler and the adults of Xylotrechus rusticus L were carried out with different concentrations of this chemical. The death rate reached 80% when 250 times solution of the chemical was sprayed on stem to control the larvae of D. superans. For control of the adults of X. rusticus, 200, 400 and 600 times solution of the chemical were applied and their control effects (death rate) reached 85.23%, 74.21% and 66.59% respectively. Two kinds of solution (200 times and 300 times) of the chemical were used to control the larvae of D. superans in large area, and the control effect for both concentrations was over 90%.     

不同光质对长鞭红景天悬浮细胞生长及苯丙氨酸解氨酶活性的影响

对不同光质条件下长鞭红景天悬浮细胞生物量及苯丙氨酸解氨酶(PAL)的活性水平进行检测,探讨长鞭红景天次生代谢和环境调节之间的相关性.结果表明:1)长鞭红景天悬浮培养细胞生物量变化为S型曲线,6～9 d进入直线生长期,PAL活性也表现出一定的规律性,在细胞指数生长期急剧上升,至细胞干质量最大时,活性最大,生长停止期时急速下降至初始水平;2)不同光质在较长时间辐射处理下,长鞭红景天悬浮细胞生物量表现出一定的差异,PAL活性也随之不同,其中长时间的红光处理有利于酶活性的提高,但生物量显著低于白光处理.