细菌生物学特性对其生物膜形成的影响

Biofilm-associated microorganisms play crucial roles in terrestrial and aquatic nutrient cycling and in the biodegradation of environmental pollutants.Biofilm formation was determined for a total of 18 bacterial isolates obtained from the biofilms of wastewater treatment systems and of little carpolite in soil.Among these isolates,seven showed strong biofilm-forming capacity.The phylogenetic affiliation of the isolates showing high biofilm formation capacity was determined through 16S rDNA sequencing and the isolates were grouped into 7 bacterial species including Pseudomonas sp.,Pseudomonas putida,Aeromonas caviae,Bacillus cereus,Pseudomonas plecoglossicida,Aeromonas hydrophila,and Comamonas testosteroni.The biofilm-forming capacity was closely related with flagella,exopolysaccharide,and extracel-lular protein.According to the coefficient of determination,the relative importance of the five biological characteristics to biofilm formation was,in order from greatest to least,exopolysaccharide > flagella > N-acyl-homoserine lactones (AHLs) signaling molecules > extracellular protein > swarming motility.     

弹性蛋白酶基因的克隆及在毕赤酵母中的表达

本研究以一株产弹性蛋白酶的铜绿假单胞菌基因组DNA为模板,经PCR扩增得到的弹性蛋白基因,与GenBank中的序列对比发现同源性为99%。将弹性蛋白酶基因连入到表达载体pPIC3.5K中,经过酶切和测序鉴定证实弹性蛋白酶基因已插入到载体启动子下游,成功构建了质粒pPIC3.5K/PAE。将pPIC3.5K/PAE线性化,通过电转化将目的基因转入毕赤酵母KM71中,利用MD培养基筛选到近400个转化子,再经G418抗性的筛选,获得48株含高拷贝的重组毕赤酵母转化子并用PCR和弹性蛋白平板验证。经过甲醇诱导表达得到高表达的重组酵母菌株,酶活为1060U/mL是出发菌株的26倍。本研究成功克隆到铜绿假单胞菌弹性蛋白酶基因,为实现活性弹性蛋白酶的高效表达奠定了基础。     

弹性蛋白酶基因(PAE)的克隆及在毕赤酵母中的表达

以1株产弹性蛋白酶的铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)基因组DNA为模板,经PCR扩增得到的铜绿假单胞菌弹性蛋白酶(P.acruginosa elastase,PAE)基因,与GenBank中的序列对比发现同源性为99%.成功地构建了重组表达载体pPIC3.5K/PAE,莺组质粒Sac Ⅰ线性化后转化毕赤酵母(Pichia pastoris)菌株KM71中,通过PCR和表型鉴定表明,PAE基因已经整合到毕赤酵母染色体上.经大量筛选获得48株含高拷贝的重组毕赤酵母转化子.在甲醇诱导下,经过毕赤酵母高密度发酵进行PAE的表达,经SDS-PAGE分析.结果表明,在培养基上清中含有一明显特异性蛋白条带,大小为34kD.活性检测结果,酶活为1 060 U/mL,是出发菌株的26倍.     

粘度对超高温灭菌奶中脂肪球上浮的影响

基于物理反射模型的背反射光检测技术研究不同瓜尔胶添加量对超高温灭菌乳体系粘度及乳脂肪球的稳定性.以0.02%添加量(w/w)的K-卡拉胶作为乳蛋白稳定剂.蔗糖酯SE-15、羟基化改性大豆磷脂及分子蒸馏单甘酯按一定比例进行复配并以0.1%(w/w)进行添加以稳定乳脂肪,在此基础上分别添加0%、0.02%、0.03%、0.04%的瓜尔胶以增加超高温灭菌乳的粘度.分别测定了样品的粘度及顶部脂肪球的迁移动力学并比较4者之间的稳定动力学.实验结果表明,随着瓜尔胶添加量的增加,样品粘度亦随之增加,顶部的脂肪浮油速率呈降低趋势,瓜尔胶添加量为0.03%时样品的稳定性达到最大值.因此,增加粘度可以抑制乳脂肪球上浮速率、增加产品的稳定性.     

兰花炭疽病颉颃细菌Z-62的发酵条件优化

通过单因素试验和正交试验确定了兰花炭疽病颉颃细茵的最佳发酵条件为:葡萄糖3%、大豆蛋白胨3%、FeSO4·7H2O 0.05%、KCl 0.05%、种龄20 h、培养基初始pH值为6.0、250 mL三角瓶装液量30 mL、接种量4%、发酵时间60 h.在该条件下培养得到的发酵液抑菌圈直径可达26,28min,抑菌活性提高了29.4%.     

绵羊注射四联灭活菌苗后发生死亡的情况调查

羊四联统称为羊梭菌性疾病.由梭菌芽胞杆菌属中的微生物所致的一类疫病,包括羊快疫、羊肠毒血症、羊猝狙、羔羊痢疾等病.此类病是绵羊的一种急性传染病,其特点是:发病突然、病程极短、造成急性死亡,对养羊业危害极大.     

需氧芽胞杆菌对大肠杆菌的体外抑菌试验

大肠肝菌病长期危害我国的养殖业,人们多采用抗生素进行防治。随着抗生素广泛大剂量的应用,带来了新问题,耐药菌株越来越多,这势必影响到防治效果。而采用非致病性微生物制成的微生态制剂,预防本病不仅效果肯定,而且可减少耐药菌株的产生。本试验旨在研究从猪体内分离的需氧芽胞杆菌,在体外对猪源致病性大肠杆菌的抑制作用,探讨用其制备微生态制剂的可能性。     

鸡绿脓杆菌病鉴别诊治

1病原 绿脓杆菌属假单胞菌属,革兰氏阴性,为两端钝圆的短小杆菌,其能运动,菌体一端有一根鞭毛。绿脓杆菌病是由绿脓杆菌引起的雏鸡的一种败血性疾病。     

一株茶树根际细菌的鉴定与生防效果研究

炭疽病是茶树的重要病害之一,对茶叶的生长和产量造成严重的危害.目前该病的防治主要依靠化学药剂,开发生物防治产品是推广茶树绿色防控技术主要措施之一.用生理生化特征分析和分子生物学技术鉴定一株茶树根际生防菌JT68,评估其对茶炭疽病菌的抑菌效果以及菌液对菌丝生长和孢子萌发的影响.用对扣法检测该菌株的挥发性有机物对茶炭疽菌的...     

常用家禽疫苗应用机理解析

1 灭活疫苗灭活苗可以分为组织灭活疫苗、油佐剂灭活疫苗、氢氧化铝胶灭活疫苗等.其优点是:使用安全、易于保存,不易有杂菌生长,不存在散毒的危险,免疫持续时间长,受畜禽母源抗体的影响小.但也有其缺点:接种量大,有时会有疫苗反应,免疫效果次于活疫苗.