猪δ冠状病毒检测方法研究进展

猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCo V)是近年来新发现的可引起猪只严重腹泻、呕吐、脱水和新生仔猪死亡的一种猪肠道疾病病原体。PDCo V于2012年首次在香港的猪群中发现,2014年在美国报道,随后陆续在加拿大、韩国、中国大陆和泰国检出。鉴于PDCo V是一种新的疫病,建立快速有效的检测方法是十分必要的,是对该病准确诊断和防控的关键。本文对PDCo V病原学和血清学检测方法的研究进展进行了综述。     

应用PCR技术检测空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的研究

本研究根据空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的16s rRNA基因相同保守序列来设计引物,建立了一种PCR检测方法,该方法具有较强的特异性及灵敏性,其对空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的最低检测限度为5 CFU/mL,它无需增菌培养过程可以直接对样品进行检验,在对鸡肉样品空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的检测中取得了较好的效果.     

有害生物风险评估计算机系统

随着我国加入WTO和植物及其产品的国际间贸易的发展,为更好地适应新的世界贸易体制,遵守SPS协定及其透明度的原则,同时有效地发挥检疫的技术性贸易壁垒作用,迫切需要利用计算机技术建立有害生物风险分析模式.     

警惕入侵性杂草——光叶水菊

光叶水菊是重要的恶性杂草,已在多个国家或地区显示入侵本性,严重破坏生态环境和生态平衡。该杂草在我国广西部分地区已有分布,本文深入研究该杂草的危害特点和扩散途径等,对防治该杂草的进一步传播和扩散、保护我国湖泊或湿地有重要意义。     

昆虫嗅觉在监测物质开发上的应用

本文对昆虫嗅觉传导信息化合物的机理在监测物质开发方面的应用前景进行了综述。首先介绍了参与昆虫嗅觉传导的多种蛋白组分、关键组分OBPs和Ors缺失后对昆虫行为的影响;其次对昆虫嗅觉及其关键组分在害虫监测仪器的开发和高效诱集物质研发上的应用进行了阐述,以期提高害虫监测水平。     

油菜蜂花粉总黄酮对体外TBHP诱导细胞氧化损伤的保护作用

为研究油菜蜂花粉总黄酮(rape bee pollen flavonoids,RBPF)抗心血管疾病的作用机制,以RBPF为研究对象,利用人工建立的血管内皮细胞氧化损伤模型,对RBPF的抗氧化活性进行初步研究,在体外水平探索RBPF对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。采用超声醇提及大孔树脂纯化的方法提取富集RBPF,同时采用过氧化氢叔丁醇(tert-Butyl hydroperoxide,TBHP)诱导细胞氧化损伤,建立人脐静脉内皮融合细胞系EA.hy926的氧化损伤模型,并利用此模型研究RBPF在细胞水平的抗氧化作用,以公认抗氧化性质良好的黄酮类化合物槲皮素作为阳性对照,CCK8法检测细胞活力。首先,用梯度稀释的RBPF及槲皮素作用于正常培养细胞,分析其细胞毒性,确定毒性阈值;然后,在毒性阈值范围内设置梯度浓度的槲皮素溶液作用于细胞损伤模型,确定槲皮素最佳抗氧化浓度剂量,并以此剂量组作为阳性对照组,与毒性阈值范围内梯度浓度的RBPF同时作用于细胞损伤模型,研究RBPF对血管内皮细胞氧化损伤的保护情况。结果表明:其一,体外血管内皮细胞EA.hy926氧化损伤模型的最佳建模条件确定为500μmol·L~(-1)TBHP作用3h;其二,细胞毒性试验结果表明,对于血管内皮细胞EA.hy926,RBPF的毒性阈值为24mg·L~(-1),阳性对照品槲皮素的毒性阈值为50mg·L~(-1);其三,CCK8法测定RBPF对细胞氧化损伤模型的保护作用,结果显示在6~18mg·L~(-1)剂量范围内,RBPF预处理对EA.hy926细胞氧化损伤模型具有明显的保护作用(p≤0.05),其抗氧化作用在低浓度(≤10mg·L~(-1))范围内呈上升趋势,在高浓度(≥14mg·L~(-1))范围内呈下降趋势,在10,12,14mg·L~(-1)3个剂量组其抗氧化性优于槲皮素(25mg·L~(-1)),RBPF浓度为10mg·L~(-1)时效果最佳。综上所述得出结论,对于血管内皮细胞氧化损伤模型,RBPF表现出了极好的体外抗氧化效果,可作为优质的预防心血管疾病的天然产物资源进行深入开发利用。     

猪传染性胃肠炎病毒、猪流行性腹泻病毒和猪轮状病毒A多重荧光定量RT-PCR检测方法的建立

为对引起腹泻症状的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪轮状病毒A(PRoVA) 3种病毒同时快速地鉴别检测,本研究对GenBank中登录的TGEV的S基因、PEDV的S基因、PRo VA的NSP基因进行序列分析,分别设计了针对3种病毒的特异性引物和用3种荧光基团标记的核酸探针,通过条件优化建立了针对这3种病毒的多重荧光定量RT-PCR方法。结果显示,该方法能够特异性检测PEDV、TGEV和PRo VA,而与其它病原无交叉反应;对TGEV、PEDV和PRo VA的最低检测量分别为1.12拷贝/μL、39拷贝/μL和25拷贝/μL;组内和组间变异系数均小于5%;该方法与商品化的试剂盒检测结果符合率达100%。该方法快速、敏感,检测结果准确可靠,为猪病毒性腹泻疾病的流行病学调查和分子生物学快速诊断奠定了基础。     

胶体金免疫层析技术在食源性致病微生物检测中的应用

<正>随着人们生活水平的提高,肉、蛋、奶类在人们日常餐桌上出现的数量猛增。因此,动物食品安全问题成为我国市场监督管理部门关注的重点。很多家畜因感染某些疾病,致使肉、蛋、奶中带入传染源,此类疾病传染性强,危害大,严重威胁人类健     

非洲猪瘟病毒核酸定性检测方法比对

为提升兽医实验室非洲猪瘟病毒核酸检测能力和质量控制水平,积累检测经验,以更好地开展非洲猪瘟检测,2020年7月,参加了北京市农业农村局组织的“非洲猪瘟实验室检测能力比对”项目。本次比对同时选用《非洲猪瘟检疫技术规范》(SNT 1559—2010标准)中的普通PCR方法、荧光定量PCR方法以及商品化试剂盒,对5份验证样品开展非洲猪瘟病毒核酸检测和结果比对。比对发现,3种检测方法结果一致,样品检测结果与预期一致,结果满意。此次比对确认了实验室现有检测方法能够满足非洲猪瘟病毒核酸的日常检测需求,同时提升了实验室人员的检测能力,积累了检测经验,可为非洲猪瘟防控提供有力的技术支撑。     

转人血清白蛋白基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立

建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境监测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据转基因奶牛内源基因β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,B2 M),外源基因人血清白蛋白基因(Human α-lactalbumin,α-LA)及标记基因绿色荧光蛋白基因(EGFP)和新霉素磷酸转移酶基因(NPTII)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。该方法敏感、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。