利用PCR方法检测锦鲤疱疹病毒3个主要靶基因

为建立锦鲤疱疹病毒(KHV)多靶基因PCR检测方法,本实验将KHV接种鲤鱼鳍条细胞,收获病变细胞悬液,提取DNA,根据GenBank中登录的KHV基因序列及出入境检验检疫行业标准推荐的基因(ORF7),设计合成3对特异性引物,针对胸苷激酶基因(TK)、聚合酶基因(Sph)和ORF7基因进行PCR检测.通过优化后的反应体系进行特异性、敏感性试验和样品检测.结果表明:3对引物能够分别特异性扩增出409bp、292 bp和484bp片段;敏感性试验表明对TK基因检测的敏感性高于Sph和ORF7基因,其最低检测量为1.9×106copies/μL;采用优化的3个PCR方法对8个有临床症状的样品进行检测,其中3份样品的3个基因PCR扩增结果均为阳性.因此,本研究选取的3个基因均可用于KHV的检测及确证实验.     

吉林省鸡肉中O-157：H7埃希氏大肠杆菌的检出状况

O157：H7埃希氏大肠杆菌，属于新型的致病性大肠杆菌，也称肠出血性大肠杆菌。它能引起人类出血性肠炎，溶血性尿毒综合症、血栓性血小板减少性紫癜等，严重时可引起人的死亡。1982年在美国首次爆发流行，而后在世界各地有散发流行和爆发的报导，如美国、加拿大、英国、德国、日本、泰国等。     

雏鸡烟曲霉菌病的诊断

烟曲霉菌和它产生的孢子,在自然界中分布较广,各种禽类均易感,称为禽烟曲霉菌病,也称霉菌性肺炎。各种年龄的鸡都易感,雏鸡更易感且多为急性经过,发病率和死亡率均很高,给养鸡业造成很大的经济损失。     

产蛋下降综合症鸡群血液与卵黄HI抗体效价的对比试验

产蛋下降综合症鸡群血液与卵黄ＨＩ抗体效价的对比试验王作友梁基肖成蕊高春生罗文生江希玲（吉林省畜牧兽医工作总站）监测、检验鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ７６）血液中的ＨＩ抗体效价时，采血麻烦，费时，费力，还影响鸡群产蛋，本文对不同鸡群和免疫不同时间的血液和卵...     

用补体结合试验对吉林省羊衣原体病的血清学调查

羊衣原体病是由鹦鹉热衣原体引起的羊只的多种疾病——地方性流产,羔羊多发性关节炎、羔羊肺炎、结膜炎等。自1949年Stamp首先在苏格兰报导了羊衣原体病流行以后,引起了世界各国畜牧兽医工作者的普遍注意。     

应用PCR技术检测空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的研究

本研究根据空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的16s rRNA基因相同保守序列来设计引物,建立了一种PCR检测方法,该方法具有较强的特异性及灵敏性,其对空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的最低检测限度为5 CFU/mL,它无需增菌培养过程可以直接对样品进行检验,在对鸡肉样品空肠弯曲菌及结肠弯曲菌的检测中取得了较好的效果.     

牛病毒性腹泻/黏膜病RT-PCR 3种体系的试验研究

根据牛病毒性腹泻/黏膜病病毒5′端非结构蛋白基因序列,设计合成1对特异性引物,建立检测牛病毒性腹泻/黏膜病病毒244 bp片段的RT-PCR 3种体系。该3种体系对牛病毒性腹泻/黏膜病病毒NADL、Oregon C24V和长春184毒株各标准毒株的检测结果均为阳性。对标准毒株的细胞毒进行检测,其敏感度达0.1 TCID50;而对牛传染性鼻气管炎病毒、猪瘟病毒、牛轮状病毒和牛冠状病毒的细胞培养物进行检测,结果均为阴性。证明3种体系方法特异性强,敏感性高。初步结果表明所建立的RT-PCR技术3种体系可用于牛病毒性腹泻/黏膜病的检测及流行病学调查。     

进境种鸡雏绿脓杆菌病的诊断

从病死鸡雏的肝、心血等器官内分离到1株细菌，经过培养特性检查、API 20E生化鉴定以及对鸡雏的致病力试验，确定所分离的菌株为致病性绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)。     

黄曲霉毒素B1免疫层析检测方法的研究

以柠檬酸三钠为还原剂,制备了20nm胶体金颗粒,以此胶体金标记纯化的单抗4G6,喷于玻璃纤维上,AFBl蛋白偶联物和羊抗鼠IgG分别结合于硝酸纤维膜上,依次将样本垫、胶金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装,切割成胶体金试纸条。结果：组装的试纸条特异性好,与AF类似物无交叉反应,对AFBl标准品最低检测限为3μg／L,检测时间约为10min,批内和批间重复性为100％,假阳性率和假阴性率均为0。操作简便,成本很低,适于AFBl的现场快速检测。在制备了单克隆抗体的基础上,应用胶体金免疫层析技术,建立了食品中黄曲霉毒素B1（Aflatoxin B1,AFBl）快速检测方法。