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为研究油菜蜂花粉总黄酮(rape bee pollen flavonoids,RBPF)抗心血管疾病的作用机制,以RBPF为研究对象,利用人工建立的血管内皮细胞氧化损伤模型,对RBPF的抗氧化活性进行初步研究,在体外水平探索RBPF对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。采用超声醇提及大孔树脂纯化的方法提取富集RBPF,同时采用过氧化氢叔丁醇(tert-Butyl hydroperoxide,TBHP)诱导细胞氧化损伤,建立人脐静脉内皮融合细胞系EA.hy926的氧化损伤模型,并利用此模型研究RBPF在细胞水平的抗氧化作用,以公认抗氧化性质良好的黄酮类化合物槲皮素作为阳性对照,CCK8法检测细胞活力。首先,用梯度稀释的RBPF及槲皮素作用于正常培养细胞,分析其细胞毒性,确定毒性阈值;然后,在毒性阈值范围内设置梯度浓度的槲皮素溶液作用于细胞损伤模型,确定槲皮素最佳抗氧化浓度剂量,并以此剂量组作为阳性对照组,与毒性阈值范围内梯度浓度的RBPF同时作用于细胞损伤模型,研究RBPF对血管内皮细胞氧化损伤的保护情况。结果表明:其一,体外血管内皮细胞EA.hy926氧化损伤模型的最佳建模条件确定为500μmol·L~(-1)TBHP作用3h;其二,细胞毒性试验结果表明,对于血管内皮细胞EA.hy926,RBPF的毒性阈值为24mg·L~(-1),阳性对照品槲皮素的毒性阈值为50mg·L~(-1);其三,CCK8法测定RBPF对细胞氧化损伤模型的保护作用,结果显示在6~18mg·L~(-1)剂量范围内,RBPF预处理对EA.hy926细胞氧化损伤模型具有明显的保护作用(p≤0.05),其抗氧化作用在低浓度(≤10mg·L~(-1))范围内呈上升趋势,在高浓度(≥14mg·L~(-1))范围内呈下降趋势,在10,12,14mg·L~(-1)3个剂量组其抗氧化性优于槲皮素(25mg·L~(-1)),RBPF浓度为10mg·L~(-1)时效果最佳。综上所述得出结论,对于血管内皮细胞氧化损伤模型,RBPF表现出了极好的体外抗氧化效果,可作为优质的预防心血管疾病的天然产物资源进行深入开发利用。 相似文献
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【导读】近十年来我国果汁业快速发展,但掺杂使假现象也层出不穷,手段和方式不断翻新,检测和鉴定困难重重,给产业持续健康发展带来严重隐忧。为此,必须大力开发实用、快捷、方便、准确的果汁检测技术,尽快完善和健全果汁标准检测体系,加大执法监管力度,维护果汁行业的正常生产经营秩序,确保食品安全。 相似文献
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Bt棉棉子中Bt蛋白定量检测方法建立及变化规律研究 总被引:2,自引:1,他引:1
应用Envirologix试剂盒测定99B、33B棉子仁中Bt蛋白的含量,分别为4376.4ng·g1和4321.7ng·g1;测定系列稀释的棉子仁提取液,Envirologix试剂盒测得的OD450和Agdia试剂盒测得的OD630间的相关性很好,相关系数接近0.99;而Agdia试剂盒测得的系列稀释液的OD630与其Bt蛋白含量间有很好的相关性,相关系数大于0.99。据此,利用Agdia试剂盒测得99B、33B棉子、棉子仁、棉子壳在12个月的贮存过程中Bt蛋白含量的变化规律,棉子、棉子仁中Bt蛋白含量降低一半,棉子壳中Bt蛋白含量降低四分之一。 相似文献
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以13个石榴品种为试材,测定不同石榴品种的花瓣数、花药数、单花药花粉量及花粉的生活力,研究不同测定方法、贮藏温度对花粉生活力的影响。结果表明:不同石榴品种花朵各指标间无明显相关性;石榴花粉在含有100、200、300 g/L蔗糖的培养基中萌发能力不同,300 g/L蔗糖质量浓度下萌发率最高;悬滴液发芽法测得的花粉生活力值较联苯胺染色法低,采用悬滴液发芽法测定13个品种花粉萌发率为32.2%~98.6%,其中,峄城软籽、大红甜、新疆大籽花粉萌发率高,分别为98.6%、92.9%、92.0%,采用联苯胺染色法测得多个品种花粉染色率达100%;所有供试石榴品种花粉生活力室温贮藏5 d后全部失活,4℃条件可有效延长石榴花粉贮藏时间至20 d。 相似文献
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转基因玉米EPSPS蛋白适体的筛选与结构分析 总被引:1,自引:0,他引:1
通过体外合成长度为70个碱基的随机ssDNA文库,采用指数富集配基的系统进化(SELEX)技术,以转基因玉米EPSPS蛋白为靶目标进行16轮筛选,将筛选到的适体群进行克隆、测序,初步获得与转基因玉米EPSPS蛋白特异性结合的适体。并用Macaw2.05和DNAMAN软件对每个适体的保守序列和二级结构进行分析。结果表明:一级结构分析序列同源性可分为四大群,其中A群有11条序列含有67个保守碱基;二级结构分析结果表明,茎环状和口袋状等结构可能是适体与转基因玉米EPSPS蛋白结合的结构基础。利用SELEX技术获得与转基因玉米EPSPS蛋白特异结合的适体群,其一级和二级结构与亲和力密切相关。 相似文献
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转基因棉子对平菇菌丝生长的影响 总被引:1,自引:1,他引:0
棉子壳是食用菌栽培的主要原料 ,迄今为止 ,人们对 Bt棉棉子对平菇生长的影响认识不一。利用液体培养基中加入棉子成分的方法 ,进一步探索了 Bt棉棉子对平菇菌丝生长的影响。1材料和方法Bt蛋白提取液稀释 Bt蛋白 ( 1 0 0μg· ml-1)至3μg·ml-1,即为 Bt蛋白液。 1 0 g棉子 ,粉碎 ,加入蒸馏水 1 0 0 ml,搅拌 1 h;提取液 0 .2 μm过滤 ,用蒸馏水补足至 1 0 0 ml,即为棉子提取液。双倍 PD(双倍 PD培养基 ) :马铃薯浸粉 0 .2 5 g,葡萄糖 1 .0 g,蒸馏水 2 5 ml;1 2 1℃、 1 5 min。特殊 PD(特殊 PD培养基 ) :蒸馏水 2 0 ml,其余与双倍 PD… 相似文献
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