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建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境监测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据转基因奶牛内源基因β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,B2 M),外源基因人血清白蛋白基因(Human α-lactalbumin,α-LA)及标记基因绿色荧光蛋白基因(EGFP)和新霉素磷酸转移酶基因(NPTII)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。该方法敏感、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。 相似文献
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利用基因工程技术制备的猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)N基因原核表达产物重组N蛋白作为抗原诊断试剂,抗重组N蛋白的单克隆抗体作为抗体诊断试剂建立了间接竞争性ELISA检测细胞培养物中的TGEV病原的方法,并确定了间接竞争性ELISA操作流程中的最佳反应条件。在间接竞争性ELISA中,最佳抗原包被量为0.25卢g/孔;竞争抗原与单克隆抗体作用的最适时间为1h,反应温度为37℃;选择1h作为酶标抗体作用的最佳时间;底物液最佳作用时间为10min;选择样品的抑制率50%为其临界值;所用封闭液0.5%的聚乙烯醇PBS溶液在4℃冰箱中可密封保存6个月,封闭时间为120min;特异性试验表明与猪轮状病毒、猪流行性腹泻病毒等肠道腹泻性病毒均无交叉反应。本试验建立的间接竞争性ELIsA诊断方法具有良好的敏感性和特异性,为TGEV的疫情监测、及时而准确的诊断奠定了基础。 相似文献
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转人溶菌酶基因奶牛多重PCR快速检测方法的建立 总被引:1,自引:0,他引:1
建立转基因奶牛多重PCR快速检测方法,为转基因动物及产品进出境检测技术平台的建立提供技术支持,并为转基因动物及产品检测技术标准的制定提供参考。根据牛物种特异性基因线粒体DNA(mitochondrial DNA,mtDNA)设计奶牛内源性基因引物,根据外源基因人溶菌酶基因(human lysozyme,hLY)及标记基因新霉素磷酸转移酶基因(NPTⅡ)设计特异性引物,优化反应条件,建立转基因奶牛多重PCR检测方法。结果表明,建立的方法灵敏、快速、特异,一个反应可以检测多个基因片段,可有效用于转基因奶牛外源基因的检测。 相似文献
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兽药影响动物源性食品质量安全,加大兽药监督执法力度是保障兽药质量,确保动物源性食品安全的重要内容。基于《兽药管理条例》修订滞后及兽药严重违法行为从重处罚情形等新规定出台等因素,致使执法人员在法律适用、违法事实认定和证据收集、货值及违法所得认定等方面存有争议。本文提出了应修订《兽药管理条例》及自由裁量基准,对无证经营兽药案中兽药进行定性,根据检验报告认定假劣兽药适用法律依据,正确认定兽药违法所得及文书制作等相关思考,旨在为规范兽药监督执法行为,提升执法队伍依法行政水平提供参考。 相似文献
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采用自动生化分析仪对克隆公猪在12月龄和18月龄时的32项血液生化指标进行测定和分析。结果表明,克隆公猪在12月龄和18月龄两个阶段仅有蛋白比值(A/G)、碱性磷酸酶(ALP)和二氧化碳总量(TCO,)与对照组均显示出统计学差异,具体为:12月龄时的总蛋白(TP)、蛋白比值(A/G)、碱性磷酸酶(ALP)、葡萄糖(GLU)、肌酐(CREA)和二氧化碳总量(TCO:)的测定值与对照组差异显著(P〈0.05);18月龄时的白蛋白(ALB)、蛋白比值(A/G)、碱性磷酸酶(ALP)和铁(Fe)的测定值与对照组差异极显著(P〈0.01),二氧化碳总量(TCO2)的测定值与对照组差异显著(P〈0.05)。血液生化指标的测试结果说明,克隆公猪与普通种公猪在生理状态方面基本相似,而且在代谢和免疫水平上表现出更优的状态。 相似文献
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一、存在的问题(一)缺乏农药使用知识1、盲目用药不分防治对象,见药就用,有的用药户看邻居打什么药,他就买什么药,不知其农药的作用、特点、毒性,更谈不上对农药理化性质的认识。因此,出现了把杀菌剂用来杀虫和防治生理性的病害,特别是在农药紧缺的情况下,此类情况尤为严重。有的人错误认为"是药就治病",如把阿波罗、尼索朗、卡死克用来防治红蜘蛛成螨,结果越防越重。2、随意加大浓度一些农民朋友在使用农药时,存在惜水不惜药的现象,往往多加药少加水,随意加大药物浓度。其实,在农药有效浓度内,效果好坏取决于药液的覆盖度,如喷施封闭除草剂时,土壤墒情差, 相似文献
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