基于主成分分析的常绿—半常绿杨树磷素利用率评价

采用砂培试验,对常绿杨3个无性系在低磷胁迫下的苗高生长量、地径生长量、根冠比、生物量、单叶面积、叶绿素含量及光合速率等7个指标进行主成分分析.结果表明,选用的7个指标之间存在显著的相关性.选取代表常绿杨生长性状78.58％的前2个主成分作为常绿杨低磷胁迫下的生长性状选择的综合指标,得出3个无性系中磷素利用率最优是A-61/186,其次是A-65/27、A-65/31.     

通过耐酸性改造在昆虫细胞中组装FMDV空衣壳结构

 【目的】口蹄疫病毒（FMDV）对酸很敏感,当pH值低于7时,二十面体对称的衣壳结构就会裂解成12S的五聚体。而昆虫细胞培养基的正常pH值在6.3左右,很难应用杆状病毒表达系统在昆虫细胞中组装天然的FMDV空衣壳结构。本研究旨在通过耐酸性改造,应用杆状病毒表达载体在昆虫细胞中组装产生AsiaⅠ型FMDV空衣壳结构。【方法】应用定点突变技术改变VP3上的H140和H143为亮氨酸,以提高空衣壳对酸的耐受性。将改造和未改造的P12A基因和3C基因插入带双启动子的杆状病毒转移载体pFastBacTM Dual 中,通过在大肠杆菌内转座重组,获得重组杆粒,转染Sf 9细胞,获得两株表达FMDV全衣壳蛋白的重组杆状病毒Bac mP12A3C和Bac P12A3C。重组杆状病毒经增殖后感染High FiveTM细胞,进行目的蛋白的表达。【结果】通过Western blotting检测表明目的基因均获得表达,且衣壳蛋白被3C蛋白酶成功地加工裂解。双抗体夹心ELISA和免疫荧光检测结果表明表达蛋白主要集中在细胞膜上,且具有很好的抗原性。通过电镜观察到P12A基因改造的重组杆状病毒在昆虫细胞内产生了直径为25～30 nm的空衣壳结构,而P12A基因未改造的重组杆状病毒观察到很多直径小得多的结构。【结论】本研究首次用电子显微镜在昆虫细胞中观察到FMDV完整的空衣壳结构,为基因工程亚单位疫苗和新型诊断试剂的研发奠定了基础。     

细胞内转录拯救Asia1型口蹄疫病毒

 【目的】建立口蹄疫病毒（FMDV）感染性分子克隆的体内拯救技术平台,为深入研究该病毒基因组的结构与功能奠定基础。【方法】将置于T7启动子下的FMDV Asia1/JS/China/2005株全长cDNA的真核重组质粒pFMDV-A经Not I线化后和表达T7 RNA聚合酶的真核质粒pcDNAT7P共转染BHK-21细胞,进行病毒体内拯救的研究。【结果】转染细胞盲传第3代48 h后出现致细胞病变（CPE）,第4代10 h出现典型的CPE。RT-PCR、间接免疫荧光、电镜等均检测到了拯救的FMDV,而且存在分子标签,表明构建的FMDV全长cDNA分子克隆在BHK-21细胞内成功包装出FMDV。拯救毒与亲本毒对乳鼠的致病力（LD50）差异不显著,具有相似的生物学特征。共转染试验重复多次,均拯救到FMDV病毒。【结论】成功建立了基于质粒为基础的FMDV的体内拯救方法。     

基因芯片技术及口蹄疫病毒基因芯片研究进展

口蹄疫的暴发与流行给世界各国的畜牧生产、社会经济和国际贸易构成严重威胁并造成巨大的经济损失,经典的血清学和PCR检测方法越来越不适应进出口动物检疫的快速、准确、高通量的要求.建立一种快速的诊断方法,使其在很短时间能够区别各血清型口蹄疫和其他水泡性疾病是非常必要的.口蹄疫病毒基因芯片包括155个寡核苷酸探针,总长35 bp～45 bp,设计在VP3-VP1-2A区,既有共有的病毒型别,也包含特异的血清型别.这项技术的优点是能在单一的芯片上检测多元病原体.     

外来口蹄疫流行毒株跟踪分析与防控

2008年以来,外来口蹄疫流行毒株不断侵入,给我国造成巨大危害。分子流行病学研究表明,我国现有的主要流行毒株,如A/Sea-97、O/Mya-98、O/PanAsia和O/Ind-2001等,均系外来毒株。结合全球口蹄疫流行形势和毒株遗传衍化关系推测,这些毒株由东南亚地区传入我国的可能性最大。此外,常年流行于中亚、西亚等国家的O/PanAsia-2、A/Iran-05和Asia1/Sindh-08等毒株,以及在印度等南亚地区流行的A/G VII和Asia1/G VIII等毒株传入我国的风险依旧存在。为及时判定外来口蹄疫威胁,做好诊断、免疫等阻断技术储备,本文就外来口蹄疫毒株流行情况和国家口蹄疫参考实验室有关技术储备工作进行总结,以期为我国外来口蹄疫防控提供参考。     

长苞铁杉林林隙梯度物种多样性

对长苞铁杉林林隙梯度上物种α多样性及β多样性进行了研究。结果表明：从林隙中心到非林隙的微观空间异质性梯度上，乔木层及灌草层物种α多样性呈现下降趋势，物种均匀度变化均呈现两端高中间低的现象；乔木层从林隙近心区到扩展林隙区物种β多样性最小，从林隙中心区到近中心、扩展林隙区到林隙边缘区及林隙边缘区到非林隙区这3个过渡区β多样性依次升高；灌草层β多样性从林隙中心到林隙近心区最小，而在其它3个过渡区无明显差异。     

鲤鱼冻藏期间品质变化的研究

以新鲜鲤鱼为原料,采用复合蒸煮袋(PE BOPP复合材料)包装,镀冰衣和未镀冰衣两种处理,在 18C冻藏5个月内,对样品进行感官检验、含水量测定、鱼肉pH值、总挥发性盐基氮的测定。结果表明,新鲜 切段鲤鱼块包装后,在-18C,镀冰衣鱼体可冻藏130d,未镀冰衣鱼块品质下降较快,仅可冻藏70 d。     

剖析影响凝固型酸牛乳质量的因素

结合凝固型酸牛乳的生产工艺流程以及西安雁塔汇沣乳品厂“口口香”牌凝固型酸牛乳的生产实际情况,对影响凝固型酸牛乳质量的因素进行系统地分析,提出了具体的操作方法,得出了关键的控制参数。     

Asia1型FMDV感染BHK-21细胞差异蛋白质点2-DE分析

为研究Asia 1型口蹄疫病毒(FMDV)感染BHK-21细胞后蛋白质组的变化及差异,将FMDV接种于培养的单层BHK-21细胞,同时设未接毒的BHK-21细胞作对照组.待细胞病变后分别提取2组细胞总蛋白借助2-DE技术及PDQuest8.0软件进行细胞蛋白质组二维电泳图谱差异性分析.结果显示感染组有1 457个可见蛋白质点,而对照组可见的蛋白质点为1 427个.感染组蛋白点的表达量与对照组相比,二者具有统计学差异(P<0.05)的蛋白质点472个,其中表达上调251个点,表达下调221个点,新合成蛋白点30个.结果表明FMDV感染BHK-21细胞后弓l起了细胞蛋白质组表达模式的改变,这种变化是病毒与细胞相互作用的结果.本研究首次利用蛋白质组学技术研究Asia 1型FMDV感染BHK-21细胞后蛋白质组学差异,有助于深入研究Asia 1型FMDV和BHK-21细胞相互作用的分子机制.