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根据新城疫病毒(NDV)F48E9国内标准强毒株编码序列设计了2对特异性引物,分别用于扩增M和NP基因。经序列测定,将其克隆到原核表达载体pET-30a(+)上,转化E.coliBL21(DE3),筛选表达NDVF48E9株M蛋白和NP蛋白的菌株。IPTG诱导表达后,SDS-PAGE分析结果表明,NDVM蛋白在E.coliBL21(DE3)内以可溶形式存在,而NP蛋白以包涵体的形式表达。用纯化的M和NP蛋白免疫鸡制备超免疫血清,进行Western-blot分析;结果,它们可以与真核表达系统表达的M和NP蛋白以及NDV发生特异性反应,表明,原核表达系统表达的NDVM和NP蛋白具有良好的免疫原性和反应原性。 相似文献
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分泌性蛋白Ag85B、MPB64和ESAT-6为Mycobacterium boris的主要保护性抗原,在诱导机体免疫反应和抵抗感染中发挥重要作用。本研究以peDNA3.1(+)为载体,构建了由上述3种抗原基因构成的不同疫苗:3基因融合(peDNA-MPB64-Ag85B-ESAT-6,pCMAE)DNA疫苗和三价(pcDNA-Ag85B+peDNA-MPB64+pcDNA-ESAT-6)DNA疫苗,评价各种DNA疫苗诱导的体液免疫、细胞免疫及以BCG攻毒后的免疫保护水平。试验结果表明,多基因融合DNA疫苗免疫后的小鼠血清抗体水平、淋巴细胞增殖(SI值)、gamma interferon(IFN-γ)和interleukin-2(IL-2)水平明显高于其他各组(P〈0.05),攻毒保护效果也优于多价DNA疫苗,达到了BCG疫苗的免疫保护水平,表明本研究制备的融合DNA疫苗具有良好的应用前景。 相似文献
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棉籽饼粕饲料中游离棉酚测定方法的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
本文对棉籽饼粕饲料进行自然浸提,建立了游离棉酚含量的测定方法,并与国标法进行了比较。结果表明:(1)随着浸提时间的延长,游离棉酚的含量逐渐增加,当浸提13h后,游离棉酚的含量不再随着浸提时间的延长而增加;(2)并且自然浸提13、26、39h时游离棉酚的含量与国标法的测定结果无显著差异(P>0.05),相对偏差均小于5%;(3)同时自然浸提13h时游离棉酚的回收率也与国标法差异不显著(P>0.05)。证明此法操作简便,结果准确、可靠,可应用于基层单位大批量样品的检测。 相似文献
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利用靶基因步行 PCR 方法扩增得到鸭肠炎病毒(DEV Clone-03)5352 bp 基因片段,并进行克隆和测序.序列分析发现,该片段包含2个ORF.Blast 分析表明,这2个ORF分别与单纯疱疹病毒1型(HSV-1)UL51 和UL52 基因同源,命名为DEV Clone-03 UL51和UL52,分别编码252和1124个氨基酸.DEV Clone-03 UL51和UL52基因排列方式与HSV-1同源基因相一致,为"头对头"的转录方向,两个ORF间有236 bp 间隔序列.用DNAStar(Megalign)软件分别对这2个ORF和11株α-疱疹病毒参考毒株进行分析,发现DEV Clone-03 UL51 与HSV-1的氨基酸序列有相对较高同源性,DEV Clone-03 UL52与EHV-4 同源性相对较高.并且DEV Clone-03UL51基因在α-疱疹病毒中比较保守.与HSV-1 UL52 蛋白相似,DEV Clone-03 UL52蛋白C末端存在锌指结构.系统发育分析表明,DEV Clone-03与α疱疹病毒亚科成员的关系比较保守,与Mardivims属的成员具有较近的亲缘关系. 相似文献
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棉籽饼粕是一种富合营养物质的蛋白质饲料,含蛋白质40%以上,赖氨酸1.59%,蛋氨酸0.52%,可作为一种蛋白质资源用于动物饲料中,在一定程度上弥补了蛋白资源的不足,但是由于棉籽饼粕中含有大量的游离棉酚,棉酚有一定的毒性,就限制了它的有效利用。笔者为了确定安阳某奶牛养殖场的14头病牛的中毒原因,对该养殖场的饲料、棉籽饼1、棉籽饼2、棉籽4种待测饲料样品中的游离棉酚和钙的含量进行了检测,结果显示:其中游离棉酚的含量分别为2223.9mg/kg、2224.9mg/kg、2223.8mg/kg、2368.0mg/kg,远远超过了《中华人民共和国饲料卫生标准》中规定的允许含量1200mg/kg,且饲料样品中的钙含量均较低〈0.01%,通过综合分析确定:安阳某奶牛场的14头中毒病牛为棉籽饼粕饲料中毒。 相似文献
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新城疫(ND)是由新城疫病毒(NDV)引起的一种禽类急性、高度接触性、致死性传染病,被国际动物卫生组织(OIE)列为危害禽类的两种A类传染病之一。尽管世界各国对ND采取了严格的防控措施,如对强毒感染的扑杀措施、限制使用中等毒力疫苗及强制性免疫等措施,但它仍然是危害禽类的主要传染病,并且呈现新的流行趋势,使防制工作变得复杂化。 相似文献
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本项研究以马传贫驴白细胞弱毒疫苗毒感染细胞总DNA和驴强毒感染驴外周血病毒RNA为起始材料,应用PCR和RTPCR的方法,分段扩增出马传贫弱毒疫苗毒前病毒和驴强毒各基因,并将各基因克隆后进行测序。根据与国外发表的马传贫病毒核苷酸序列比较,推导出马传贫疫苗毒和马传贫驴强毒全基因组核苷酸序列。 相似文献