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141.
鸡肝脏β—羟—β—甲戊二酸单酰辅酶A还原酶的提纯和性质 总被引:5,自引:0,他引:5
采用超速离心、热变性处理、硫酸铵沉淀和亲和层析方法,从鸡肝脏中分离提纯了β-羟-β-甲戊二酸单酰辅酶A(HMG-CoA)还原酶。提纯倍数为209倍,比活力188.5U/mg,Km值1.8×10-4mol/L。SDS-PAGE测得分子量为3.2×104。温度对该酶活性影响较大,37℃时活性最高。最适反应pH为7.2。甘氨酸在10mmol/L浓度以上时对该酶呈现明显抑制作用,l-组氨酸、l-精氨酸则无明显抑制作用。Zn2+、Mg2+、Cu2+离子对该酶有明显抑制作用,Zn2+在1.5mmol/L、Cu2+和Mg2+在2.0mmol/L浓度以上时抑制作用明显。中药山楂(CHS)和决明子(CHZ)的水煎液对酶的抑制作用明显 相似文献
142.
人端粒酶催化亚基是端粒酶活性所必须的组分,通过提取端粒酶活性癌组织的mRNA,反转录获得端粒酶活性中心基因的cDNA片段,PCR扩增获得端粒酶催化亚基活性中心基因,并将扩增产物连入真核表达载体pCR3.1,利用pCR3.1载体的自身特点即具有T7启动子,可在真核细胞内启动基因的转录与表达,为将来获得端粒酶酶活性中心蛋白,研究其结构与功能奠定了基础,从而为解决肿瘤问题提供新的思路。 相似文献
143.
与HEp-2细胞粘附现象相关的大肠杆菌O157基因的发现 总被引:1,自引:0,他引:1
将产志贺毒素大肠杆菌O157:H7菌株97094培养于含有不同质量浓度的萘啶酮酸(nalidixie acid,NA)的麦康凯(MacConkey)琼脂平板上,获得对NA有抗性的菌株。用含有自杀性质粒pRT733的供体菌SM10λpir(携带转座子TnphoA)和抗萘啶酮酸的97094菌株做接合试验,使转座子TnphoA转入受体菌97094,经过约200个接合试验,有503个菌株在含有Km、NA、XP的LB琼脂平板上形成蓝色菌落,说明在这些菌株中形成了phoA融合基因,并能表达phoA基因。在这503个Km^r,NA^r变异体中,有6株完全失去了对HEp-2细胞的局灶型粘附(local adherence,LA)现象。对构建的6株大肠杆菌O157 TnphoA变异体,克隆TnphoA及其两侧的大肠杆菌O157 DNA序列,用根据TnphoA融合接点处的phoA的DNA序列设计合成的寡核苷酸引物,对各克隆中TnphoA上游的大肠杆菌O157的DNA片段部分进行测序,测序结果做BLAST搜索,发现有4个变异体的TnphoA插入到已知的大肠杆菌O157紧密素基因eae中,有2个变异体的TnphoA分别插入到eae之外的核苷酸序列中,分别插入到一个功能未知的菌毛分子伴侣基因和一个功能未知的Z4182基因的上游。这项研究表明,除紧密素外,大肠杆菌O157尚有其他因子参与对真核细胞的粘附。 相似文献
144.
145.
一、现金流量表编制方法存在的问题概述现金流量表是以现金(包括现金等价物)为基础编制的财务状况变动表,反映企业一定期间内现金的流入和流出情况,表明企业获得现金的能力,是企业财务会计报告(包括中期财务报告)的重要组成部分。现金流量表的编制方法,有工作底稿法和T形账户法,也可以直接根据有关科目记录分析填列。 相似文献
146.
【目的】通过比较健康和受桉蝙蛾幼虫危害的桉树树干及其林下浅层土壤挥发物的组成与含量,探究桉蝙蛾幼虫由地栖环境向树栖危害的转移机制,为其生态防治提供理论依据。【方法】采用动态顶空吸附法提取健康和受桉蝙蛾幼虫危害桉树树干及其林下浅层土壤挥发物,利用气相色谱—质谱联用仪(GC-MS)测定挥发物的组分及含量,通过随机森林算法分析,选择5种挥发物用于测定桉蝙蛾幼虫的嗅觉行为反应。【结果】从健康和受害桉树树干及浅层土壤中分别鉴定出17、47和23种挥发物。随机森林分析结果显示,健康与受害树干挥发物的比较中,左旋-β-蒎烯、3,3-二甲基-6-亚甲基环己烯和左旋-α-蒎烯的重要性较高;桉树树干(健康及受害)与浅层土壤挥发物的比较中,左旋-β-蒎烯、莰烯、桉叶油醇、邻伞花烃、3,3-二甲基-6-亚甲基环己烯和左旋-α-蒎烯的重要性较高。行为测定结果显示,莰烯和邻伞花烃(浓度10 mg/mL)分别对桉蝙蛾3龄幼虫具有显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)的引诱作用。【结论】桉树树干挥发物中的邻伞花烃和莰烯均可显著吸引桉蝙蛾3龄幼虫,且均在受害桉树树干挥发物中含量更高,推测二者对桉蝙蛾幼虫寻找寄主植物的行为具有调控作用。 相似文献
147.
端粒酶催化亚基活性中心hTERT的克隆及其真核表达 总被引:2,自引:0,他引:2
本实验采用RT—PCR技术,应用高保真DNA聚合酶从人喉癌细胞中扩增端粒酶催化亚基活性中心基因片段,将克隆载体上hTERTcDNA用EcoR I和HindⅢ双酶切,连入真核表达载体pCR3.1,利用pCR3.1载体上带有强的CMV启动子,高效表达活性中心蛋白,采用RT—PCR检测hTERT mRNA的表达情况,结果表明,在细胞内检测到了mRNA,证明该cDNA在细胞内确实得到了表达,并采用TRAF-ELISA方法检测端粒酶活性。 相似文献
148.
[目的]本文旨在研究外源硅(Si)和CO2加富对Ca(NO3)2胁迫下番茄幼苗生长及生理特性的影响,探讨Si和CO2加富缓解番茄Ca(NO3)2胁迫的作用机制。[方法]采用水培法,以2叶1心的“中杂9号”番茄幼苗为试材,CO2浓度分别设置为常规(400±20)μmol·mol-1(以4表示)和加富(800±20)μmol·mol-1(以8表示),Si浓度设置为1.5 mmol·L-1的Na2Si O3·9H2O(以Si表示),以常规CO2浓度、正常营养液为对照(以CK表示),研究外源Si和CO2加富处理对100 mmol·L-1Ca(NO3)2胁迫(以Ca表示)下番茄幼苗生长、光合特性、水分代谢、... 相似文献