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应用重叠PCR的方法获得NS1A融合基因片段,并将融合基因片段成功地插入pET-20b原核表达载体,将阳性重组质粒转化表达受体菌BL21(DE3)感受态细胞中,经IPTG诱导表达。进行表达产物的变性聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting检测,结果表明NS1A融合基因获得高效表达,薄层扫描分析表明表达蛋白占菌体蛋白的15%。大量培养NSIA工程菌,用侧带法纯化蛋白后对日本大耳白兔进行常规免疫,应用间接ELISA测定抗体的效价达1∶25 600,为下一步NS1A融合基因真核表达产物的检测奠定基础。 相似文献
124.
猪脂肪细胞特异膜蛋白的分离鉴定 总被引:6,自引:1,他引:5
用蔗糖密度梯度离心制备脂肪细胞及其他组织细胞膜蛋白 ,通过 SDS- PAGE分离并用薄层扫描测定不同组织细胞膜蛋白的组成、相对分子质量及含量。结果表明 ,猪皮下脂肪细胞有 19种膜蛋白 ,心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌肉细胞及其他脂肪细胞有 13~ 2 4种膜蛋白 ,红细胞膜有 6种膜蛋白。经 Western- blot鉴定 ,猪皮下脂肪细胞有 8种特异性膜蛋白 ,分别为 110 770、10 3910、39970、3110 0、2 94 2 0、2 5 4 80、2 35 4 0和 2 2 0 0 0。结果显示 ,脂肪细胞与其他组织细胞膜蛋白组成及含量存在较大差异 相似文献
125.
鸡下丘脑组织表达序列标签初步分析 总被引:5,自引:1,他引:4
为了鉴定所构建的鸡下丘脑组织 c DNA文库能否用于下丘脑表达谱的建立 ,从 c DNA文库中随机挑取 12个克隆 ,对其表达序列标签 (expressed sequence tags,ESTs)进行了测定和初步分析。经 BL ASTn和 FASTA3.1分析后发现 ,1个 ESTs在 Gen Bank中可以找到鸡的同源序列 ,4个在其他物种中也可以找到同源序列 ,1个在 ESTs database中有同源 ESTs序列 ,还有 6个为未知功能基因。 12个 ESTs序列均已录入 Gen Bank。 相似文献
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利用不连续系统聚丙烯酰胺凝胶电泳法测定了辽宁绒山羊 (12 6只 )、内蒙古绒山羊二狼山品系 (48只 )、内蒙古绒山羊阿尔巴斯品系 (48只 )的血红蛋白 (Hb)、血清白蛋白 (Alb)、酯酶 (Es )、碱性磷酸酶 (Alp )和淀粉酶 (Am )的多态性 ;发现血红蛋白和血清白蛋白表现为单态 ,而另三种酶表现为多态。结果表明 :血清酯酶共有三种基因型 ,即EsAA、EsAB、EsBB ,受两个共显性基因ESA 和ESB 控制 ;碱性磷酸酶共有二种基因型 ,即Apf和Apo型 ,受两个基因Apf 和Apo控制 ;淀粉酶共有三种基因型 ,即AmAA、AmAB、AmBB ,受两个共显性等位基因AmA 和AmB 控制。各品系间Es、Alp、Am的基因频率有很大差异。AmAB型个体产绒量明高于AmAA和AmBB型个体 ;Apf型个体产绒量高于Apo型个体 ,酯酶只与出生重和双羔率有关 相似文献
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目前,林业中无法避免的病虫害带来的破坏、成活率低、授粉率低、水腐烂根、花期受损、缺少光合作用等十分严重.我国林业也大多处于粗放型管理模式,对于林木作物的温度、水分、养料、日照还无法达到精准化控制.加快林业技术创新改革,加快改革林业管理模式,以经验化为数字化、科学化.即在林业管理中要使用数字化、自动化、精准化管理设备,对林园的水分、温度、养料、日照进行直观的测量,准确把握并分析出此阶段作物所需的外部环境及营养供给,并给出合理化意见,对所缺或过剩的元素进行调节,使林业管理员更有针对性地进行环境处理.因此,林业合理使用创新技术,可打破林业发展瓶颈,促进林业向数控化管理方向发展. 相似文献
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发酵床养猪废弃垫料的资源化利用评价 总被引:13,自引:0,他引:13
发酵床养殖技术是基于控制畜禽粪尿排放与污染的一种新型生态养殖模式,但其有机废弃物的处理和应用值得进一步研究.本文测定了我国山东、吉林两省5个发酵床养猪场的废弃垫料的有机质、氮、磷、钾、重金属元素、抗生素和盐分含量以及有害微生物数量.结果表明,废弃垫料中富含有机质、氮、磷、钾等营养元素.其中有机质含量为42.62%~54.12%,全氮1.54%~2.12%,全磷(P2O5)2.24%~5.55%,全钾(K2O)0.57%~2.15%;Cu、Zn、Cr、As、Ni、Pb、Cd、Hg等8种重金属元素含量均符合国家有机肥料农业行业标准(NY 525-2012)和城镇垃圾农用控制标准(GB 8172-1987)的限量标准;土霉素(Oxytetracycline,OTC)、四环素(Tetracycline,TC)、金霉素(Chlortetracycline,CTC)等四环素类抗生素含量低,环境风险小;蛔虫卵和大肠杆菌含量均超过NY 525-2012和GB 8172-1987的规定限值,蛔虫卵死亡率范围为90%~94%,总大肠杆菌的数量范围为1.29×105~2.24×106cfus/g;垫料盐分含量达到22.11~45.71g/kg.评价结论:发酵床废弃垫料具有有机肥料的基本性质,但是盐分含量偏高;肠道寄生虫卵严重超标,具有生物安全隐患,施用前必须对其进行无害化处理. 相似文献