鸡喹乙醇中毒的诊治

多年来喹乙醇纯粉在蛋鸡中广泛应用，曾起到一定防治作用。很多养殖户对其毒副作用了解不够，常造成中毒。喹乙醇中毒属慢性蓄积中毒，不易察觉，因此造成中毒致死率极高，损失巨大。现将两例鸡喹乙醇中毒诊治过程介绍如下。     

鸡大肠杆菌多价灭活菌苗(新疆株)应用效果观察

试验应用自制的鸡大肠杆菌多价氢氧化铝佐剂灭活苗对3个鸡群进行对比试验.免疫组和非免疫组在8～43周龄时成活率差异极显著(P<0.01);28周龄时产蛋率差异不显著;43周龄时产蛋率差异极显著(P<0.01);43周龄时料蛋比差异极显著(P<0.01).结果表明,在鸡场中应用自家制备的大肠杆菌多价灭活苗可取得良好的防控效果.     

猪传染性胸膜肺炎的诊断技术

猪传染性胸膜肺炎（PCP）,是一种高度传染性、致死性的呼吸系统传染病。该病的主要特征是急性与亚急性病例呈现纤维素性出血性胸膜肺炎、慢性病例呈现纤维素性坏死性胸膜肺炎。1957年,英国人Pattison等首次发现该病,目前已在世界各国广泛流行,造成巨大的经济损失,严重阻碍了世界养猪业的健康发展,     

牛分枝杆菌Spoligotyping和VNTR—MIRU的基因分型研究

为了探讨间隔区寡核苷酸分型(Spoligotyping)和数目可变串联重复序列·结核分枝杆菌散在分布重复单元(VNTR-MIRU)基因分型法用于国内牛分枝杆菌的基因分型研究,初步了解我国牛分枝杆茵基因型种类、分布以及2种方法在我国应用的可行性.本研究收集东北、西北、华北、华南4个地区分离的10株牛分枝杆菌分离株,分别采用Spoligotyping和VNTR-MIRU对这些分离株进行基因分型,比较两种方法的分型效果,评价其在牛分枝杆茵基因分型中的应用.结果表明,使用Spoligotyping方法,10株牛分枝杆菌呈现出4种基因型,使用VNTR-MIRU方法,10株分离株也呈现4种基因型;当两种方法联合使用时,可以分为5种基因型,其中的2个茵株具有独特的基因型,显示来自不同地区的牛分枝杆菌存在主要的流行型为BCG家族.将Spoligotyping和VNTR-MIRU联合使用,可有效提高牛结核病的分子流行病学调查和病原学的监测效果.     

崇明白山羊gdf-9基因多态性与产仔率的关联分析

上海崇明白山羊具有高繁殖率的优良特性,为探索这一特性的遗传基础,本研究利用PCR-SSCP联合PCR产物测序的方法分析了gdf-9基因的多态性,结果发现在崇明白山羊gdf-9基因的编码区内存在3处多态位点,分别为A183C、G1188A和G1189A。其中G1188A变异位点在其他山羊中尚未有报道。经氨基酸编码分析,A183C和G1188A处的多态性未造成氨基酸的编码改变,G1189A处的G→A多态变化导致了缬氨酸→异亮氨酸的改变。两相邻多态位点G1188A和G1189A的产仔率分析结果表明:在75只崇明白山羊中,G1188A位点的3种等位基因型G(G)、G(A)和A(A)的基因频率分别为86.67%、13.33%和0;G1189A位点的3种等位基因型G(G)、G(A)和A(A)的基因频率分别为60.00%、40.00%和0;G1188A位点处G(G)型个体产仔数的最小二乘均值大于G(A)型个体(P>0.05);G1189A位点G(A)型个体的平均产仔数大于G(G)型个体(P>0.05)。综合G1188A和G1189A两个位点,不同基因型的最小二乘均值关系为AC>AA>AB,但3种基因型间差异不显著(P>0.05)。综上结果,崇明山羊gdf-9基因变异位点的多态性对产仔数没有显著性影响。     

检测牛结核抗体新型ELISA方法的建立及应用

利用分子克隆和Splicing by overlapping extension(SOE)技术,表达了重组蛋白rM70-83-E6,Western blot分析rM70-83-E6具有很好的特异性。以蛋白rM70-83-E6作为诊断抗原建立了间接ELISA方法,ELISA诊断方法的判定标准,即S/P≥0.5为阳性,S/P<0.4为阴性,0.5>S/P≥0.4为可疑。ELISA方法的特异性为96.0%、敏感性为69.4%。对67份PPD皮试阳性和50份PPD皮试阴性(117份)血清样品进行了检测,并与PPD皮试比较。67份PPD皮试阳性血清样品中有46份为ELISA检测阳性,阳性符合率为68.7%,50份PPD皮试阴性牛血清都为阴性,阴性符合率为100%,本ELISA方法与PPD皮试诊断方法总复合率为82.1%。研究表明,ELISA方法具有很好的开发和应用前景。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型7型25-4株ApxIICA基因的克隆和基因缺失

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌血清型7型25＿4株ApxIICA基因用特异性引物进行PCR扩增并克隆到T载体上,构建重组质粒pMD18＿ApxIICA,将pMD18＿ApxIICA转化到E.coliJM83中并测序。序列分析表明血清型7型25＿4株ApxIICA与其它血清型(5型和9型)核苷酸序列同源性达98%以上,氨基酸序列同源性达90%以上。利用ApxIIC基因内部单一的SpeI位点,设计特异性的引物,利用PCR技术在ApxIIC基因内部缺失165bp的核苷酸片段,PCR产物再用SpeI进行酶切,并体外连接构建得到含有ApxIIC缺失基因的重组质粒pMD18＿ApxII△CA。     

猪胸膜肺炎放线杆菌ApxIVA基因特异片段的克隆和表达

以猪胸膜肺炎放线杆菌的血清7型国内分离株25＿4株基因组DNA为模板,PCR方法扩增apxIVA特异片段,PCR产物经纯化后与载体PMD18＿T进行连接、转化,经酶切及序列分析鉴定后,亚克隆到原核表达载体pGEX＿6P＿1中,构建成重组表达质粒pGEX＿apxIVA,转入到大肠杆菌BL21中,以IPTG进行诱导,进行SDS＿PAGE电泳。结果表明,25＿4株apxIVAgene与基因库中标准7型apxIVAgene同源性达97%,所表达的融合蛋白相对分子量为44kD,与实际预测相符。apxIVA毒素特异片段的成功表达为猪胸膜肺炎放线杆菌病的诊断打下基础。     

鼠李糖乳酸杆菌LG_A对鸡小肠上皮细胞β-防御素-9基因表达的影响

本研究旨在研究益生性鼠李糖乳酸杆菌LGA对体外培养的鸡小肠上皮细胞β-防御素-9 (AvBD9)表达的调节作用.选用鼠李糖乳酸杆菌LGA对体外培养的鸡小肠上皮细胞进行剂量依赖性及时间依赖性刺激实验,利用实时荧光定量PCR(fluorescence quantitative PCR,FQ-PCR)从mRNA水平研究刺激后上皮细胞AvBD9基因表达水平的差异.结果表明,不同浓度(2×105、2×106、2×107 cfu· mL-1)鼠李糖乳酸杆菌LGA均能上调AvBD9mRNA的表达,且在不同细菌浓度之间AvBD9 mRNA的表达存在差异.热灭活鼠李糖乳杆菌LGA亦能上调AvBD9基因表达,且上调值显著高于活菌(P＜0.05).鼠李糖乳杆菌LGA刺激上皮细胞后AvBD9表达存在时间依赖关系,12 h时AvBD9的表达达到峰值.Western blot检测结果显示,鼠李糖乳杆菌LGA刺激后的上皮细胞培养上清中存在AvBD9蛋白表达,表明AvBD9蛋白可以分泌到细胞外而发挥其生物学功能.益生性鼠李糖乳酸杆菌LGA与鸡肠道上皮细胞的相互作用过程中,鼠李糖乳酸杆菌LGA能够促进上皮细胞抗菌肽β-防御素-9的表达.本研究结果提示益生性乳杆菌可能通过促进肠道上皮抗菌肽的表达而发挥其益生作用.     

牛结核病病原生态学和流行病学研究

牛结核病是严重危害牛和多种动物的人畜共患病,作者将从牛结核病的病原分类、动物感染谱、传播途径、地区分布和流行情况以及影响疾病的流行因素等方面进行综述,旨在为牛结核病的研究和防制提供参考.