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131.
SYBR GreenⅠ荧光RT—PCR方法检测禽流感病毒 总被引:1,自引:0,他引:1
为建立检测禽流感病毒(AIV)的SYBR Green Ⅰ荧光RT-PCR方法,根据AIV的M基因保守区的核苷酸序列设计引物。用4株不同亚型的AIV感染MDCK细胞,收集感染6、12、24、48、72h的病毒。另外采取169份鸡的泄殖腔拭子和咽喉拭子。对上述样品的M基因进行检测,试图建立快速检测AIV的SYBR GreenⅠ荧光RT—PCR方法,并与普通RT—PCR方法和传统的病毒滴定方法进行比较。结果表明:此次建立的检测AIV的SYBR GreenⅠ荧光RT-PCR方法能检测到感染MDCK细胞后72h的AIV,对169份泄殖腔拭子和咽喉拭子中的AIV检出率为5.33%(9/169),而普通RT—PCR方法检出率为6.51%(11/169),病毒滴定检出率为5.62(9/160)。对其他病毒(NDV、IBDV、IBV、VA)则未检测到,且整个检测过程只需4h,表明该方法特异、准确、快速。 相似文献
132.
不同亚型禽流感病毒在MDCK细胞上的生长特性 总被引:2,自引:0,他引:2
禽流感(avian influenza,AI)是由正粘病毒科A型流感病毒(avian influenza virus,AIV)引起的禽类传染病。高致病力禽流感(HPAI)可引起禽类100%死亡,在世界范围内多次暴发,2004年年初HPAI再次在包括我国在内的一些亚洲国家暴发流行,但得到了很好的控制,7月份在泰国和我国的安徽省HPAI又有发生;低致病力禽流感(LPAI)一般不致鸡只死亡,但可以导致鸡产蛋量下降,同样制约着养禽业的发展,所以研究快速有效的诊断方法已刻不容缓。而且许多学者对MDCK细胞用于制作人流感疫苗作了大量研究。 相似文献
133.
134.
禽流感病毒N1和N2亚型神经氨酸酶RT-PCR鉴别方法的建立 总被引:8,自引:1,他引:7
针对家禽中流行较为广泛、危害相对大的禽流感病毒(AIV)N1、N2亚型神经氨酸酶基因设计了2对引物,建立了一种RT—PCR鉴别方法,其目的片段大小分别为358bp、377bp。经对A/goose/Guangdong/1/96(H5N1)、A/Turkey/England/N28/73(H5N2)、A/African starling/983/79(H7N1)和A/Turkey/Wiscosin/1/66(H9N2)病毒株的鸡胚尿囊液样品进行扩增,扩增片段的大小与预期大小完全相符。经对国内不同地区分离的16株AIV N1亚型和21株AIV N2亚型用RT-PCR方法检测,阳性检出率分别为87.5%(14/16)和95.2%(20/21);对50份样品进行盲检,准确率为98%(49/50)。 相似文献
135.
鸡传染性贫血病疫苗免疫母鸡后,对其于代雏鸡免疫器官的抗体生成细胞变化进行了动态研究。结果发现,CIA疫苗免疫母鸡后,于代雏鸡免疫器官抗体生成细胞数量较未免疫对照于代雏鸡明显增加;强毒攻击于代雏鸡后,免疫攻毒组雏鸡免疫器官抗体生成细胞数量在27日龄内明显高于未免疫攻毒组雏鸡。表明CIA疫苗可使于代雏鸡免疫器官的体液免疫功能增强,能抵御强毒攻击。 相似文献
136.
旋毛虫排泄/分泌抗原研究进展 总被引:5,自引:0,他引:5
旋毛虫病由于其对人、畜危害严重历来被人们所重视 ,其免疫防制是当今国内外学者研究的重要方向。通过对旋毛虫几种抗原的对比研究 ,排泄 /分泌抗原效果最好 ,它具有双重的免疫学功能 ,成为众多学者研究的热点 ,人们对排泄 /分泌抗原成分进行了大量研究。作为蛋白质其主要成分是三种糖蛋白 (分子量分别为4.5万 ,4.9万 ,5.3万 ) ,他们可以发生免疫学交差反应。目前人们已经获得了编码这三种蛋白的基因序列 ,并通过分子生物学技术对其基因进行克隆和表达 ,将表达蛋白用于旋毛虫病的防制。本文介绍了旋毛虫排泄 /分泌抗原的组成成分与功能 ,以及检测抗原和免疫原方面研究状况。 相似文献
137.
摘要: 准确衡量鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)毒力特征对研究IBDV毒力变异的分子基础、变异规律,以及影响IBDV毒力的相关分子生物学、病原生物学和细胞生物学机制有重要意义。但是,IBDV的毒力测定方法一直没有一个统一的标准。常规以SFP鸡和商品鸡的死亡率表示IBDV的毒力,但IBDV的定量方法和接种剂量并没有一个统一的标准。研究采用尿囊膜接种途径和灵敏度较高的双抗夹心ELISA方法,大幅度提高EID50定量的灵敏度,使EID50能够准确定量不同致病类型的毒株。SPF鸡和商品鸡的接种剂量根据Eterradossi的研究结果确定为2×103EID50。通过7株中国IBDV的毒力测定及相关分析,证明该方法灵敏度高,重复性好、通用性强, 有利于IBDV毒力测定方法的标准化和规范化。 相似文献
138.
全面回顾和总结了内蒙古自治区甜菜育种50年所走过的历程,从育种机构的建立到各种育种方法的探索、育成的品种及在生产上发挥的作用等作了比较详细的总结和概括。 相似文献
139.
140.
CAV对BWEL-SPE鸡的致病性试验及毒价测定 总被引:1,自引:0,他引:1
本实验用鸡传染性贫血病病毒标准株(CAV和Cux-1)和国内分离株(CAV M9905 CAV和H9906分别对BWEL-SPF雏鸡1-7家系进行1日龄和1月龄攻毒的致病性试验。1日龄雏鸡接种CAV Cux-1毒株,12天后观察到感染鸡的喙、腿、冠和爪等部位颜色变浅,16天剖杀,观察剖检变化,并进行IFA和PCR检测,确定感染率和CAV毒价。结果CAV Cux-1株对1日龄BWEL-SPF雏鸡半数感染量(CID50)为10^4.3/0.2ml。同时检测到CAV Cux-1株对1月龄BWEL-SPF雏鸡发病率为60%;CAVM9905和CAV H9906对1日龄BWEL-SPF雏鸡发病率为100%,死亡率为40%、20%。 相似文献