犬细小病毒宿主范围和入侵途径研究进展

犬细小病毒(Canine parvovirus,CPV)引起的犬细小病毒病是犬科动物的主要传染病,病毒在进化过程中出现了多个不同的分型,这些分型对细胞和组织嗜性及宿主范围都是由病毒的分子生物学特点所决定,本文综述了犬细小病毒细胞嗜性及宿主范围的分子特点和病毒的入侵途径,为细小病毒的控制提供基础。     

注射生长激素对猪脂肪组织中脂肪合成酶的影响

注射重组猪生长激素(rpGH)能加快生长速度、降低脂肪率、提高瘦肉率。本试验测定了北京黑猪60头,其中试验组30头,每天注射rpGH2毫克,对照组30头注射1毫升75mMNaHCO_3,均连续注射28天后屠宰,在屠宰时测定了血浆游离脂肪酸(FFA)含量(试验组为673.16±232.35微克当量/升,对照组为412.09±241.84微克当量/升),试验猪比对照猪FFA含量增高63.04％,差异极显著(P<0.01)。取肩背部皮下脂肪组织,分别测定葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(0.313±0.064IU/毫克蛋白),NADP-苹果酸脱氢酶(1.199±0.208 IU/毫克蛋白),NAD-苹果酸脱氢酶(0.9425±0.233 IU/毫克蛋白),异柠檬酸脱氢酶(0.324±0.104 IU/毫克蛋白)的活性,试验猪4种酶活性均低于对照组,差异极显著,(P<0.01),上述酶活性与胴体瘦肉率 呈负相关趋势。     

鸡传染性法氏囊病毒3个毒株VP2高变区的基因扩增与序列分析

以用疫苗株V-hb和V1免疫后又发病的病鸡法氏囊分离毒株HeB-bdI的基因组RNA为模板,利用RT-PCR/Nested-PCR扩增出了cDNA产物.并对其VP2高变区基因序列测定,同时测定了V-hb和V1的基因序列.序列分析表明HeB-bdI毒株与UK661同源性较高为98.4%,而与弱毒株Cu-1、非致病性株PBG98和变异株相差较大;而疫苗株V-hb和V1疫苗株与HeB-bdI毒株的同源性较低仅为93.1%.     

MBP-狂犬病毒NP融合蛋白在大肠杆菌中的表达及NP的纯化

将狂犬病毒核蛋白结构基因重组到原核表达质粒ｐＭＡＬ－Ｃ２Ｘ中,经ＩＰＴＧ诱导表达出的ＭＢＰ－ＮＰ融合蛋白分子量约９８ｋＤ;用支链淀粉琼脂糖凝胶亲和层析纯化得到电泳均一的融合蛋白,融合蛋白用因子Ｘａ裂解后,经Ｑ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换层析可将ＭＢＰ与ＮＰ分开,得到了电泳均一、分子量约５６ｋＤ的ＮＰ蛋白,经Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析证实抗原性正确,为进一步利用ＮＰ蛋白制备抗体或单克隆抗体打下了基     

河北地区鸡IBDV分离株VP2高变区的序列分析

以河北地区不同鸡IBDV基因组RNA为模板。采用RT-PCR／Nested-PCR的方法，得到其VP2高变区的cDNA片段后进行测序，并将其序列与本实验室已测定的周边省市及文献已报道的IBDV毒株相应区域进行了比较。结果表明，河北地区与周边省市间的IBDV毒株同源性极高，与欧洲细胞毒株Cu1和P2间具有很高的同源性，而与美国变异株VariantE的亲缘关系相距较远。     

2株鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株的分离鉴定

用分离的疑为鸡传染性法氏囊病病毒 (IBDV)超强毒株 (vv IBDV) He B- lf和 He B- bd接种 SPF鸡 ,36 h后接种鸡开始发病 ,发病率为 10 0 %,死亡率为 5 0 %以上。剖检可见与野外病例相同的病理变化 ,如肌肉、心脏、腺胃出血 ,法氏囊水肿或呈“紫葡萄”样外观。经血清学试验、毒力试验、鸡胚接种试验、分子生物学和电镜形态学观察均证明该两分离物为超强毒株 ,从而证明河北省鸡群中存在不同于经典 IBDV的超强毒株。     

日粮磷和钙磷比例对小型猪(香猪)血清、肠、骨碱性磷酸酶及血清钙磷的影响

36头生长阶段香猪去势公猪 ,通过3×3析因安排分组 ,完全随机区组设计 ,随机分配到9个处理中 ,每个处理4个重复 ,每个重复1头猪。试验两个因子中日粮磷的3个水平分别为0.3 %、0.6 %和0.9 % ;日粮钙磷比例的3个水平为1 :1、1.25 :1和1.5 :1。试验基础日粮由玉米、豆粕、血粉和苜蓿粉组成 ,各处理日粮磷水平和钙磷比例用CaCO3、Na2HPO4 和CaHPO4 调配。从试验开始到结束 ,每隔两周颈静脉采血一次测血清AKP活性和钙、磷 ,并于试验结束时屠宰全部试验猪取小肠和肋骨样测AKP活性。试验结果表明 ,血清AKP活性和第六肋骨AKP活性随日粮磷从0.3 %增加至0.9 %显著下降(P<0.05) ,但十二指肠AKP活性不受日粮磷水平影响。日粮钙磷比例不影响血清、第六肋骨和十二指肠AKP活性(P>0.05)。血清磷随日粮磷增加而增加 ,随日粮钙磷比例增加而下降。血清钙不受日粮磷水平影响 ,但在日粮钙磷比例为1.25 :1时最高     

北京黑猪和长白猪脂肪代谢的比较

猪在断奶后的生长期内,体内脂肪逐渐增加,和其它家畜相比,猪更倾向沉积体脂。但猪体脂的沉积还要受遗传、年龄、日粮营养水平等因素的影响。在饲粮消化能量(DE)水平保持在3000—3200Kcal/kg,蛋白质含量为14％—15％的饲养条件下,我们分别测定了纯系北京黑猪(肉脂兼用型,平均瘦肉率为51％)和纯系长白猪(瘦肉型猪、平均瘦肉率为62％)的某些脂肪合成酶活性和脂肪代谢的一些生化指标。北京黑猪(公母各半)脂肪组织(背膘)中苹果酸酶(ME),葡萄糖—6—磷酸脱氢酶(G—6—PDH),异柠檬酸脱氢酶(ICDH)三种NADPH—生成酶活性随体重增加而升高,差异极其显著(P<0.001)。体重90kg的酶活性比56kg约高三倍。脂纺组织中上述NADPH生成酶活性北京黑猪比长白猪(体重均为90kg,公母各半)高一倍(P<0.001)。给北京黑猪(30头,公母各半,起始体重为60kg)注谢重组猪生长激素(rPGH,每天每头2mg,连续注谢28天),除表现生长加快,脂肪率下降约21％—23％外,其脂肪组织中NADPH生成酶活性降低十分明显(P<0.001)。苹果酸酶,葡萄糖—6—磷酶脱氢酶,异柠檬酸脱氢酶,三种酶总活性比对照组降低20％。血精中三酰甘油,游离脂肪酸,总胆固醇,高密度脂蛋白(HDL)胆固醇、乳糜微粒,极低密度脂蛋白(VLDL)胆固醇含量,6月龄时,北京黑猪明显高于长白猪(P<0.001—0.0005);而4月龄时,北京黑猪血清中三酰甘油,高密度脂蛋白胆固酶含量则均明显低于长白猪。北京黑猪血清中三酰甘油,高密度脂蛋白胆固醇含量,随月龄(4月龄—6月龄)增长而增加(P<0.0005)。而长白猪则相反,随月龄而呈下降趋势(P<0.05—0.0005)。两种猪的脂蛋白电泳和含量测定未见有年龄和品种间的差异。     

反转录─套式PCR方法检测鸡传染性法氏囊病病毒

采用蛋白酶 Ｋ 消化,酚、氯仿抽提的方法提取法氏囊匀浆和细胞培养液中的鸡传染性法氏囊病病毒（ Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ）基因组 Ｒ Ｎ Ａ,用特异的寡核苷酸引物对其 Ｖ Ｐ２ 高变区进行反转录套式 Ｐ Ｃ Ｒ 扩增。应用该方法从一个法氏囊匀浆中即可特异地检出 Ｉ Ｂ Ｄ Ｖ Ｒ Ｎ Ａ,得到的扩增产物可用于分子流行病学的进一步分析,而从感染材料的处理到扩增结果的电泳检测,在两个工作日之内可轻松完成。本实验为法氏囊病病毒的诊断和分子流行病学的分析提供了一种快速、简便、可靠的手段。     

牧羊犬IFN-β基因的克隆和序列分析

为对犬干扰素-β(IFN-β)进行研究,用PCR技术从犬血细胞基因组DNA中扩增了牧羊犬IFN-β基因,并克隆到pGEM-T载体,转化大肠杆菌JM109感受态细胞,阳性克隆经PCR和酶切鉴定后进行测序。结果表明:牧羊犬IFN-β基因含561bp,编码186个氨基酸,前21个为信号肽。成熟蛋白理论分子量为20kD,等电点为5.737,有2个潜在磷酸化位点、5个N糖基化位点和4个半胱氨酸残基,大部分为亲水区。二、三级结构预测显示,蛋白主要由5段α螺旋组成。犬IFN-β基因与赤狐的完全相同,与貉、雪貂和猫的同源性很高(85%～98.4%),在进化树中处于同一分支,而与禽类和鱼类的同源性仅为2.9%～8.6%。