应用SYBR Green I的Real-time PCR方法定量检测空肠弯曲杆菌

空肠弯曲杆菌(Campylobacterjejuni)被认为是人类主要食源性病原菌之一。由于空肠弯曲杆菌特殊的生长条件和容易进入不可培养但存活的状态(Viablebutnonculturable,VNC),所以传统的生化鉴定结果不一定可靠,并且是一项费时而繁琐的工作。核酸检测方法的出现为空肠弯曲杆菌的检测带来了方便。本文基于LightCycler为平台,利用SYBRGreenI染料能特异与双链DNA结合而发荧光的特性,建立一种Real-timePCR方法来定量检测空肠弯曲杆菌。用该方法检测时,发现所有空肠弯曲杆菌(11株)都呈阳性,所有其它弯曲菌(3株)和其它菌株(5株)都是阴性。整个检测过程60min内可以完成,检测限度为5CFU,标准曲线的相关系数为1。结果表明基于SYBRGreenI的定量PCR方法既为空肠弯曲杆菌提供了一种特异、敏感、快速和简洁的定量检测方法,又为研究空肠弯曲杆菌致病机理提供了一种重要方法。     

常规鱼类养殖技术之五广东鲂人工繁殖技术

广东鲂是珠江水系西江著名特产之一,也是西江重要的经济鱼类,近年来,其自然资源量呈逐渐衰退之势,90年代的渔获量仅在5t左右徘徊.为此,广东省封开县水产研究所开展广东鲂人工繁养殖技术研究,笔者总结5年来的经验,介绍广东鲂人工繁殖技术如下:     

论城中村农民的现代化改造

针对当前我国城中村改造中存在的一些问题,以系统论为基础,对城中村改造工作的方向和改造工作应遵循的基本原则予以一定的分析,提出城中村改造工作的重点和关键所在是对城中村农民的现代化改造。进一步阐述了城中村农民的现代化改造对于推进城中村改造的重要意义。     

导入AGPase基因的转基因可育水稻及其经济性状的研究

以农杆菌介导法将淀粉合成关键酶AGPase(腺嘌呤二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶）基因导入云南地方优质水稻合系35，38，39，41，42中，获得了大量的可育转基因植株。PCR扩增检测，外源基因已稳定整合进水稻基因组中。大量的农艺性状及淀粉含量研究表明，转基因水稻种子的千粒重比对照明显提高，但总淀粉含量没有显著变化。     

韩国人口政策及对中国农村人口政策的启示

人口政策是一个国家或地区用采影响和干预人口运动过程以及人口因素发展变化的法规、条例和措施的总和.韩国的人口政策经历了由控制人口增长的计划生育政策到鼓励人口增长的新人口政策的转变,该政策成功控制了人口的快速增长,缓解了人口与经济、社会资源、环境之间的矛盾,但也引起了人口老龄化、出生婴儿性别比失调等一系列社会问题.这些问题也正在中国农村上演,如能借鉴立法先行、大力发展社会福利事业、善于运用经济杠杆等经验,对维持中国农村人口的低出生率,控制人口老龄化等具有积极的意义.     

大豆30 cm平作窄行密植应用技术研究

通过10年的试验数据阐述了大豆30cm平作窄行密植（以下简称“大豆30cm平窄密”）增产增效是非常显著的。还阐述了该项技术的增产机理和技术关键。并且还对该项技术目前存在的问题进行了认真的讨论。     

饲料企业降低沟通成本之浅见

在生产经营活动中．说到成本．人们大都会想到直接成本与间接成本．或生产成本与营销成本等有形成本．但有一类无形成本却往往容易被忽视，那就是沟通成本。沟通成本是指由于沟通不畅等原因造成的营运成本增加。由于其无形的特征．所以由它导致的成本上升很难用一个确切的数字来描述。我国饲料工业的历史不过20余年．即使是一些成功的饲料公司也难以通过根深蒂固的企业文化来规范员工的言行。加之缺乏诚信环境和市场不规范现象比比皆是．人员流动频繁，盈利导向至上，员工缺乏系统培训即上岗．唯亲是用等，这都或多或少导致了企业内部的信息与沟通不畅，甚至阻塞逆反．互相扯皮推诿，进而导致沟通成本上升，隐性费用增加，企业市场竞争力下降。     

恒河猴肾上腺皮质的显微与超微结构

应用光镜和透射电镜观察，恒河猴肾上腺皮质可分为球状带、束状带和网状带。其特点是：（1）被膜较发达，有时可伸入球状带将其细胞分隔为团块。（2）球状带有时呈指状指入束状带和网状带，其内可见嗜铬细胞；球状带细胞可分为明、暗2种类型，他们排列成团球状、滤泡状、索状和不规则形。（3）网状带较发达，有的可分为内、外2个区；有时网状带呈刺状伸入束状带；有时网状带细胞可见于被膜下或髓质内。（4）有时部分被膜连同皮质一起呈指状伸入髓质内。（5）皮质细胞均含丰富的溶酶体、线粒体和内质网，但不同部位的细胞所含的脂滴在数量、大小、形态和电子密度等方面存在差异。     

大肠杆菌耐热性肠毒素ST1—K99／LacZ基因重组的研究

将构建的ｐＢＳＴ２～６工程菌质粒用限制性内切酶ＢａｍＨＩ／ＢｇｌⅡ酶切，经琼脂糖凝胶电泳和电洗脱，回收１４７ｂｐ的目的ＳＴ１基因。随之将该基因分别重组到能有效表达Ｋ９９菌毛抗原和ＬａｃＺ酶的ｐＧＫ９９之Ｋ９９基因ＢｇｌⅡ位点和ｐＵＣ１８的ＢａｍＨＩ位点中。通过ＳＴ１基因探针菌落原位杂交、特定酶切分析及ＤＮＡ序列分析，筛选并鉴定出了理想重组子，从而构建出了能分别表达ＳＴ１融合基因产物的工程菌株ｐＳＫ２１９和ｐＸＳＴ１。     

香菇新菌株宁香8号选育初报

采用多孢分离技术产生多个新组合，经驯化筛选获得香菇新菌株宁香8号。宁香8号菌丝生长适温10－25℃，子实体生长适温10－23℃，菌丝生长期58－60d，室内栽培生物学效率达81．60％，室外栽培生物学效率达92．85％，宁香8号不仅适于阔叶木屑栽培，亦适公杉木屑袋栽。