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为进一步研究主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(major histocompatibility complex classⅠ,MHCⅠ)的作用机制,提高其抗原呈递效率,通过基因重组技术获得犬DLA-12基因,插入pcDNA3真核表达载体,成功构建了重组质粒pcDNA3-DLA-12。用重组质粒脂质体法转染FK81细胞,G418筛选稳定转染细胞,获得表达MHCⅠ克隆细胞。Western blot检测可见43 000左右的蛋白特异反应带,与目的蛋白大小相当。流式细胞仪分析表明,超表达DLA-12增加了MHC I的细胞膜呈递。 相似文献
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为了制备大量廉价的可溶性犬细小病毒(CPV)VP2蛋白抗原,试验截选了VP2抗原表位集中的基因片段VP2-70进行密码子优化及合成,将合成基因克隆到pET-32a(+)载体中,构建原核表达载体pET-32-VP2-70,转化BL21(DE3)工程菌,IPTG诱导表达后进行Ni-NTA亲和层析纯化,Western-blot检测验证其生物学活性。结果表明:试验构建的VP2-70表达载体能够介导VP2-70融合蛋白在大肠杆菌中高效表达,表达量高出野生型VP2-70融合蛋白16 mg/L;Western-blot检测显示,该蛋白具有很好的免疫反应原性,可为CPV亚单位疫苗和免疫学诊断方法的研究提供候选抗原。 相似文献
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绵羊肺炎支原体间接血凝诊断方法的建立 总被引:3,自引:1,他引:2
用绵羊肺炎支原体抗原致敏经戊二醛处理的绵羊红细胞,制备成间接血凝试验抗原,通过IHA来检测绵羊支原体性肺炎血清抗体.致敏绵羊红细胞的最佳抗原浓度为100μg/mL,血清效价≥1∶8即为阳性,效价≤1∶4者判为阴性.该方法具有很好的敏感性、特异性和可重复性,而且操作简单,适合大范围推广应用. 相似文献
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绵羊和山羊霉形体病研究概述 总被引:7,自引:0,他引:7
绵羊和山羊霉形体病(Mycoplasmal diseases of sheepandgoats),是一类疾病的总标,泛指由霉形体侵入机体引起的绵羊和山羊的多种急性或慢性、传染性疾病。世界上所有养羊国家和地区都有不同种类的羊霉形体病发生,临床表现包括乳房炎、肺炎、胸膜炎、关节炎、角膜结膜炎、败血症甚至怀孕羊流产等,有些羊霉形体病可以导致重大的经济损失,严重危害养羊业的发展,如山羊传染性胸膜肺炎(Contagious Caprine pleuropneumonia,CCPP)和传染性无乳症(Contagious agalactia,CA)。在我国,羊霉形体病的发生也比较普遍,尤其绵羊和山羊的霉形体性肺炎,已成为影响我国养羊业发展的重要疾病之一。 相似文献