犬组织相容复合物Ⅰ类分子的真核表达和细胞膜呈递

为进一步研究主要组织相容性复合体Ⅰ类分子(major histocompatibility complex classⅠ,MHCⅠ)的作用机制,提高其抗原呈递效率,通过基因重组技术获得犬DLA-12基因,插入pcDNA3真核表达载体,成功构建了重组质粒pcDNA3-DLA-12。用重组质粒脂质体法转染FK81细胞,G418筛选稳定转染细胞,获得表达MHCⅠ克隆细胞。Western blot检测可见43 000左右的蛋白特异反应带,与目的蛋白大小相当。流式细胞仪分析表明,超表达DLA-12增加了MHC I的细胞膜呈递。