转基因稻谷在肉仔鸡日粮中的应用研究

试验以不同品质稻谷替代40%玉米饲喂肉仔鸡,探讨对其生长情况、内脏器官及血液指标的影响。将200只1日龄AA肉仔鸡随机分成4组,每组50只,公母各半,采用单因素有重复试验设计,对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别用普通稻谷、新高赖氨酸转基因稻谷组、陈高赖氨酸转基因稻谷组替代40%玉米配制日粮。试验分2个阶段,前期1～21日龄,后期22～42日龄。试验结果表明:①3种品质稻谷替代40%玉米对肉仔鸡前期促生长作用明显,其中新、陈高赖氨酸含量转基因稻谷组料肉比均比对照组显著降低(P<0.05);后期普通稻谷组料肉比最低,新高赖氨酸含量转基因稻谷组肉仔鸡平均体重最高。②3种品质稻谷能促进前期肉仔鸡肝脏生长,其中高赖氨酸转基因稻谷组提高最为显著(P<0.05);后期肾脏指数3个稻谷组均比对照组显著提高(P<0.05)。③3种品质稻谷对早期血液生化指标存在一定影响;后期葡萄糖浓度3个稻谷组均比对照组显著提高(P<0.05),其它各项指标差异不显著。3种品质稻谷替代40%玉米配制日粮饲喂肉仔鸡是可行的。     

PRLR基因外显子10多态性与西农萨能奶山羊产奶性能的相关分析

设计4对引物,采用PCR—SSCP技术检测催乳素受体（PRLR）基因外显子10在西农萨能奶山羊群上的单核苷酸多态性,同时研究该基因对其产奶性能的影响。结果表明：引物P2、P3与P4扩增片段具有多态性,P1的扩增片段不存在多态性。应用P2扩增片段,在西农萨能奶山羊中仅检测到AA和AB基因型,纯化测序表明AA与AB基因型相比有2处突变,C27T的突变没有导致氨基酸变化,第189处的碱基缺失导致氨基酸由组氨酸变为酪氨酸和苏氨酸。AA和AB基因型之间产奶量的最小二乘均值差异显著（P〈0．05）,AA基因型在各胎次产奶量和平均产奶量等指标上均高于AB基因型,其中第3胎的产奶量达到显著水平（P〈0．05）;应用R扩增片段,在西农萨能奶山羊中检测到3种基因型（CC、CD、DD）,纯化测序表明CC与DD基因型相比有2处突变（C103A和T106C）,分别导致氨基酸由赖氨酸变为苏氨酸、苏氨酸变为异亮氨酸;3种基因型之间产奶量的最小二乘均值差异不显著（P〉0．05）。应用P。扩增片段,在西农萨能奶山羊中也只检测到EE和EF基因型,纯化测序表明EE与EF基因型相比有1处突变（A114G）,该突变导致氨基酸由蛋氨酸变为缬氨酸;EE和EF基因型之间产奶量差异显著（P〈0．05）。EE基因型的个体各胎次产奶量均比EF型高,其中在第3、4胎产奶量和前4胎平均产奶量3项指标上都达到显著水平（P〈0．05）。研究结果提示：PRLR基因对奶山羊产奶量有显著影响,因此认为PRLR基因外显子10位点可作为奶山羊高产奶量的标记辅助选择的有效分子标记。     

柞蚕蛹、幼虫、蛾速冻食品加工工艺及质量指标

通过对柞蚕蛹、幼虫、蛾产品速冻工艺的改进,较好的保持了柞蚕蛹、幼虫、蛾特有的品质质量,解决了传统加工工艺中易出现的变形、变黑、变味等问题,使柞蚕产品达到常年不间断供应;同时,还介绍了柞蚕食品的感官等级、理化、微生物等质量指标。     

伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株PK基因转移载体的构建及LacZ基因表达

伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株基因组经AscⅠ酶切获得含PK基因的8.7kb片段,将此片段克隆入pPolyⅡ载体的AscⅠ位点,获得中间载体P8-AA,将LacZ表达盒插入其SphⅠ/NdeⅠ位点,构建重组转移载体P8AA-lacZ,将其与伪狂犬病病毒TKˉ/gIˉ株基因组共转染PK-15细胞,细胞出现病变后通过覆盖含有X-gal的营养琼脂进行蓝白斑筛选,通过蚀斑克隆方法分离到重组体PRV（rPRV）,且经过连续传代的rPRV仍能稳定的表达β-半乳糖苷酶活性。通过对重组病毒PRV-LacZ和亲本株TKˉ/gIˉ株TCID50的试验表明,PK基因的缺失对病毒增殖无影响。     

威海市种禽场主要疫病监测情况的分析

为了掌握威海市种禽场主要疫病免疫抗体水平及病毒感染情况,2015-2017年对威海市全部25个种禽场分别进行了新城疫、禽白血病、鸡白痢疫病监测,监测结果显示全市新城疫免疫抗体水平均在90%以上,整体免疫效果良好,暴露风险较低;新城疫病原阳性率0.28%,禽白血病阳性率1.02%,鸡白痢感染抗体阳性率为0.52%。群体健康状况良好,禽白血病和鸡白痢接近国家净化标准。     

鱼腥草芩蓝口服液质量控制方法研究

为建立鱼腥草芩蓝口服液的质量控制方法,采用TLC法对鱼腥草芩蓝口服液中的鱼腥草、黄芩、连翘和金银花进行鉴别;采用HPLC法测定黄芩苷和绿原酸的含量。在薄层色谱鉴别中均能检出鱼腥草、黄芩、连翘和金银花的特征性斑点;黄芩苷进样量在0.1057～2.6413μg范围内与峰面积有良好的线性关系,回归方程为:Y=33.42325X-214.6128,r=0.9997,平均回收率为98.74%;绿原酸进样量在0.041～2.051μg/m L范围内与峰面积有良好的线性关系,其回归方程为:Y=-86.78088+27.5937X,相关系数r=0.9995,回归显著,平均回收率为99.1%,建立的黄芩苷和绿原酸含量测定方法,耐受性良好、灵敏度高、重现性好、专属性强,可以有效控制产品的质量。建立的方法能准确、可靠地对鱼腥草芩蓝口服液中黄芩苷和绿原酸含量进行测定,可作为该制剂的质量控制方法。     

青蟹对蛋白质和脂肪的需求

在室内养殖水槽进行59 d的饲养试验以确定青蟹(Scylla paramamosain)适宜的蛋白质和脂肪需求。采用4×2的双因素的试验方法,设计4种蛋白水平(34%、38%、42%和46%)和2种脂肪水平(6%和10%)。试验锯缘青蟹初始均重为(44.5±5.1)g,每组3个重复,每个重复放养15只青蟹。结果显示,在相同脂肪水平下,饲喂42%和46%蛋白组青蟹终末体重相对高于34%和38%饲料组;在相同蛋白质水平下,饲喂6%和10%脂肪组青蟹的终末体重不存在显著差异(P>0.05);青蟹的形态学参数和生化组成不受饲料蛋白质和脂肪水平的影响。研究结果显示,青蟹饲料中最适的蛋白质和脂肪需求分别为42%~46%和6%~10%。     

华中地区鸡源沙门菌分离鉴定及耐药性分析

为了探明华中地区种鸡场沙门菌(Salmonella)的优势血清型和耐药情况,本研究从湖北、河南、湖南等省市22个规模化鸡场采集病鸡、死胚及弱雏组织样品3 724份,通过分离培养、生化试验、PCR鉴定及血清型试验确定分离菌种属及其血清型,并采用Kirby-Bauer法对分离菌株进行了耐药性分析。结果显示,本试验从3 724份病料中共分离鉴定出124株沙门菌,其中79株为D群肠炎沙门菌(63.71%,79/124),34株为D群鸡白痢沙门菌(27.42%,34/124),8株为B群鼠伤寒沙门菌(6.45%,8/124),有3株沙门菌未能确定血清型。O抗原鉴定79株肠炎沙门菌和34株鸡白痢沙门菌为O9,8株鼠伤寒沙门菌为O4。H抗原鉴定79株肠炎沙门菌为Hg,m,8株鼠伤寒沙门菌为Hi。药敏试验结果显示,124株分离菌株对萘啶酸、氨苄青霉素、四环素和多西环素耐药率分别为95.97%(119/124)、91.94%(114/124)、57.26%(71/124)和70.16%(87/124);对复方新诺明和红霉素耐药率分别为25.81%(32/124)和12.10%(15/124);对氯霉素、庆大霉素、头孢噻肟和卡那霉素耐药率分别为6.45%(8/124)、1.61%(2/124)、1.61%(2/124)和0.81%(1/124);对左氧氟沙星、阿米卡星和多黏菌素B完全敏感。99.19%(123/124)的分离株至少对一种药物耐药,87.10%(108/124)的分离株表现多重耐药。本研究为华中地区养鸡场沙门菌的诊断及防控提供了数据支撑。     

3种转染试剂对牛原代骨骼肌卫星细胞转染条件的优化

为了选择适合牛原代骨骼肌卫星细胞的转染试剂与条件,本研究以带有绿色荧光蛋白(EGFP)的质粒pcDNA3.1-EGFP和pEGFP-C1作为外源基因,分别用Lipofectamine 3000、X-tremeGENE HP和FuGENE HD转染牛原代骨骼肌卫星细胞,通过荧光显微镜观察、实时荧光定量PCR及Hoechst 33342染色评价转染效率。结果表明,对于同一时期、同一转染试剂,pcDNA3.1-EGFP转染效果优于pEGFP-C1;不同转染试剂之间,Lipofectamine 3000和X-tremeGENE HP转染效果优于FuGENE HD。Lipofectamine 3000转染后分化72h肌管最明显,FuGENE HD次之,X-tremeGENE HP转染后细胞死亡较多。采用1.0μL Lipofectamine 3000、1.5μL Lipofectamine 3000和X-tremeGENE HP转染细胞后EGFP表达量极显著高于FuGENE HD (P0.01),但这三者之间差异不显著(P0.05)。细胞转染效率与EGFP定量结果基本一致,1.0、1.5μL Lipofectamine 3000转染效率较高,分别达26.07%和24.77%,极显著高于FuGENE HD(5.59%)和X-tremeGENE HP(10.87%)的转染效率(P0.01),但二者之间无显著差异(P0.05);X-tremeGENE HP的转染效率极显著高于FuGENE HD (P0.01)。综合考虑转染试剂的用量、细胞毒性及经济效益,本试验初步认为牛原代骨骼肌卫星细胞转染宜采用Lipofectamine 3000,其与质粒DNA的比例为1∶1时转染效率最高。本试验结果可为原代细胞的转染提供重要的参考价值。     

陕西省千亿羊乳产业高质量发展建议

在陕西省省委、省政府的高度重视和支持下,2018年陕西省千亿羊乳产业得到了快速发展,具体表现是产销两旺,羊奶产品供不应求,羊奶收购价格月月攀升,但到了2019年5月,羊奶收购价格出现大幅下降,个别地方甚至下降到4 元/千克以下。从表面看似乎是陕西省羊奶收购价格出现了大起大落,但实质是两级分化。通过深入分析陕西省羊奶收购价格出现两级分化的原因,研究防控陕西省羊奶收购价格大起大落的方法,稳定羊奶收购价格,以促进陕西省千亿羊乳产业的发展。