硒化大蒜多糖对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响

【目的】 研究硒化大蒜多糖（sGPS）对小鼠腹腔巨噬细胞功能的影响,以期为硒化大蒜多糖的作用挖掘和临床应用提供依据。【方法】 依次通过分离、纯化得到大蒜多糖（GPS）,并经硝酸-亚硒酸钠硒化修饰得到sGPS₃、GPS₅和sGPS₆。以小鼠腹腔巨噬细胞为研究对象,用6.25、12.5、25、50、100 μg/mL sGPS₃、GPS₅、sGPS₆及10 μg/mL脂多糖（LPS组）处理小鼠腹腔巨噬细胞48 h,同时设置不加药物的细胞为对照组,用中性红法测定其吞噬功能,CCK-8法测定其増殖能力,筛选出活性最好的硒化大蒜多糖;然后用ELISA法检测活性最好的硒化大蒜多糖对巨噬细胞上清液中一氧化氮（NO）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、干扰素-γ（IFN-γ）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）、白介素-12（IL-12）含量的影响;再通过小鼠碳廓清实验、小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验测定空白对照组（生理盐水）及高（2 mg/mL）、中（1 mg/mL）、低（0.5 mg/mL）剂量活性最好的硒化大蒜多糖的吞噬指数与吞噬百分率。【结果】 除6.25 μg/mL sGPS₃外,6.25、12.5、25、50和100 μg/mL sGPS₃、sGPS₅、sGPS₆组小鼠腹腔巨噬细胞的A_{490 nm}值均显著高于对照组（P<0.05）,其中,50和100 μg/mL sGPS₆组的A_{490 nm}值显著高于LPS组（P<0.05）,因此选用sGPS₆进行后续试验;12.5、25、50和100 μg/mL sGPS₆组小鼠腹腔巨噬细胞上清中NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量均显著高于对照组,25、50和100 μg/mL sGPS₆组小鼠腹腔巨噬细胞上清中IFN-γ、IL-12显著高于对照组（P<0.05）,其中100 μg/mL sGPS₆组小鼠腹腔巨噬细胞上清中NO、TNF-α、IL-12显著高于LPS组（P<0.05）。2和1 mg/mL sGPS₆组的吞噬指数和吞噬率均显著高于空白对照组（P<0.05）。【结论】 硒化大蒜多糖能增强小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬功能和増殖能力,促进细胞因子TNF-α、IL-1β和IL-6的分泌。     

日粮中添加复方中药对母猪免疫和仔猪腹泻的影响

试验选用临产前1个月的母猪及其仔猪为研究对象,研究在日粮中添加复方中药对母猪免疫和仔猪腹泻的影响。将12只临产母猪随机分为4组,每组3只,分别为对照组和3个给药组（低、中、高剂量给药组）。对照组仅饲喂日粮,低、中、高剂量组在饲喂日粮中分别添加0.3、0.6和0.9g/kg复方中药。分别在给药后第0、10、20和30天采集血液,用于测定IgG含量、CD3+含量和CD4+/CD8+值|在试验期内计算仔猪腹泻率和腹泻指数。结果表明,给药后第20、30天时,所有给药组IgG含量和CD3+含量均显著高于对照组（P＜0.05）|中剂量组在用药后各测定日龄CD4+/CD8+值均显著高于对照组（P＜0.05）|中剂量组和高剂量组仔猪腹泻率分别为9.78%和11.4%,均显著低于对照组（14.76%,P＜0.05）|各给药组仔猪腹泻指数显著低于对照组（0.41,P＜0.05）,且各组之间均具有统计学差异（P＜0.05）。这说明,在日粮中添加复方中药可以有效提高母猪免疫,降低和减轻仔猪腹泻的发生。 [关键词]复方中药|临产母猪|仔猪|免疫功能|腹泻     

日粮中添加复方中草药对巴马香公猪精液品质及免疫功能的影响

试验选用巴马香公猪为研究对象,旨在研究复方中草药在提高公猪精液品质和免疫功能方面的作用。将12只巴马香公猪随机分为4组,每组3只,分别为对照组和3个给药组（低、中、高剂量给药组）。对照组仅饲喂基础日粮,低、中、高剂量组在基础日粮中分别添加1%、2%和3%的复方中草药。分别在给药后第0、7、14和21天采集精液,检测精液量、精子活力和精子畸形率|空腹前腔静脉采血,测定IgA、IgG和IgM含量。结果表明,日粮中添加复方中草药可提高巴马香公猪精液品质和免疫功能。其中,以添加中剂量复方中草药效果最好。 [关键词]复方中草药|巴马香公猪|精液品质|免疫功能     

鱼腥草芩蓝口服液质量控制方法研究

为建立鱼腥草芩蓝口服液的质量控制方法,采用TLC法对鱼腥草芩蓝口服液中的鱼腥草、黄芩、连翘和金银花进行鉴别;采用HPLC法测定黄芩苷和绿原酸的含量。在薄层色谱鉴别中均能检出鱼腥草、黄芩、连翘和金银花的特征性斑点;黄芩苷进样量在0.1057～2.6413μg范围内与峰面积有良好的线性关系,回归方程为:Y=33.42325X-214.6128,r=0.9997,平均回收率为98.74%;绿原酸进样量在0.041～2.051μg/m L范围内与峰面积有良好的线性关系,其回归方程为:Y=-86.78088+27.5937X,相关系数r=0.9995,回归显著,平均回收率为99.1%,建立的黄芩苷和绿原酸含量测定方法,耐受性良好、灵敏度高、重现性好、专属性强,可以有效控制产品的质量。建立的方法能准确、可靠地对鱼腥草芩蓝口服液中黄芩苷和绿原酸含量进行测定,可作为该制剂的质量控制方法。     

硒化修饰提高大蒜多糖体外抗新城疫病毒活性的研究

旨在研究硒化修饰提高大蒜多糖的体外抗新城疫病毒(NDV)活性并筛选出体外抗NDV活性较好的硒化大蒜多糖.依次通过水提醇沉法、Sevage法去蛋白得到大蒜多糖(GPS),并采用硝酸-亚硒酸钠法对大蒜多糖进行硒化修饰,得到9个硒化大蒜多糖8GPS1～sGPS9.以鸡胚成纤维细胞(CEF)为作用对象,采用MTT法通过先加硒化...     

大蒜多糖的提取纯化及对鸡体外外周血淋巴细胞增殖的影响

为了比较5种大蒜多糖(GPS)单独及协同植物血凝素(PHA)对鸡外周血淋巴细胞增殖能力的影响,试验采用水提醇沉、去蛋白、过DEAE-52纤维素柱的方法对大蒜进行提取、纯化,分别得到大蒜粗多糖(GPSc)、去蛋白大蒜多糖(GPSp)及纯化的大蒜多糖GPSp1、GPSp2和GPSp3,检测了5种大蒜多糖的提取率、多糖含量、蛋白质含量,并采用MTT法比较了5种大蒜多糖单独及协同PHA对鸡外周血淋巴细胞增殖能力的影响。结果表明:5种大蒜多糖在单独作用及协同PHA刺激时均能使鸡外周血淋巴细胞增殖,提高淋巴细胞增殖率。说明大蒜多糖具有体外免疫增强活性,其中GPSp1效果最强。     

高效液相色谱法检测鸡可食性组织中的磺胺氯吡嗪残留

对建立的一种鸡组织中磺胺氯吡嗪钠残留检测的高效液相色谱法进行复核验证。鸡组织样品中磺胺氯吡嗪钠残留经乙腈提取,正己烷去脂肪,MCX固相萃取小柱净化。采用高效液相色谱紫外检测器检测,流动相为乙腈-0.02mol/L磷酸二氢钾水溶液(35:65,V/V),紫外检测波长为272nm,外标法定量。结果显示,磺胺氯吡嗪钠标准工作液在0.04~20.0μg/mL范围内具有良好的线性关系(R^2=0.9999)。在鸡肌肉、肝脏、肾脏、皮脂各组织中添加浓度分别为40、100、200μg/kg时,各组织样品中磺胺氯吡嗪钠的回收率范围为74.70%~93.67%。磺胺氯吡嗪钠的检测限为20μg/kg,定量限为40μg/kg。复核验证的鸡组织中磺胺氯吡嗪钠残留检测高效液相色谱法可行,方法简便快捷,回收率高,适合鸡组织中磺胺氯吡嗪的残留检测。     

仔猪腹泻源大肠杆菌耐药性调查及耐药基因检测

对泰州地区分离的仔猪腹泻源大肠杆菌的耐药性及其携带的相关耐药基因情况进行检测,为养殖场今后合理用药提供科学依据。采用微量肉汤稀释法对分离的49株大肠杆菌进行8种抗菌药物的药敏试验;采用PCR方法对多黏菌素耐药基因mcr-1及超广谱β-内酰胺酶(ESBL)耐药基因blaCTX-M、blaSHV和blaTEM进行检测。药敏试验结果显示:大肠杆菌对氯霉素、氟苯尼考、氨苄西林、四环素、庆大霉素和恩诺沙星等的耐药率分别达到100%、97.96%、95.92%、89.80%、59.18%和51.02%;而对多黏菌素E和头孢噻呋的耐药率也达到44.90%和32.65%。进一步耐药基因检测结果显示:ESBL耐药基因中blaCTX-M的检出率最高,达到12.24%(6/49);其次为blaSHV,8.16%(4/49);有一株大肠杆菌携带blaTEM基因。其中一株同时携带blaCTX-M和blaSHV。多黏菌素耐药基因mcr-1的检出率达到30.61%(15/49),其中4株同时携带blaCTX-M基因。泰州地区分离大肠杆菌耐药情况和多重耐药现象较为严重,多黏菌素耐药基因mcr-1及ESBL耐药基因blaCTX-M、blaSHV和blaTEM的广泛分布表明这些耐药基因存在快速传播的风险。因此,有必要加强猪场细菌耐药性监测。     

中草药防治仔猪病原性腹泻的研究进展

仔猪腹泻是集约化养猪模式下的一种常见疾病,其中以仔猪病原性腹泻最为常见,严重制约着养猪业的发展。中草药作为中华民族的瑰宝,具有毒副作用低、不易产生耐药性等优点,对仔猪病原性腹泻具有较好的防治效果。文章介绍了引起仔猪腹泻的原因、防治该病的研究现状,并就中草药防治仔猪病原性腹泻的相关研究及其作用机理进行了综述,为兽医工作者在今后的临床工作中能有效防治该病提供参考。     

硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致免疫抑制鸡的颉颃作用

为探究硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致免疫抑制的颉颃作用,将336只11日龄非免疫健康罗曼雏鸡随机均分为7组:空白对照组(BC)、免疫对照组(VC)、环磷酰胺对照组(Cy)、sGPS3、sGPS5、sGPS6和药物对照组(APS),每组6个重复,每个重复8只鸡。BC组和VC组注射0.5mL生理盐水,其余组均肌肉注射8mg/mL环磷酰胺0.5mL,每天1次,连续3d;14日龄时,除BC组外,其余组均用新城疫疫苗免疫,同时3个硒大蒜化多糖组分别注射0.5mL浓度为1mg/mL的sGPS3、sGPS5、sGPS6,APS组肌肉注射黄芪多糖注射液0.5mL,Cy组、VC组和BC组注射生理盐水0.5mL,每天1次,连续3d,28日龄二免。分别于首免后的第7、14、21、28天,每组随机抽取6只罗曼鸡翼静脉采血,分离血清,β-微量法检测血清ND-HI抗体效价、ELISA法检测血清γ干扰素(IFN-γ)和白细胞介素2(IL-2)含量。称量体重后采集胸腺、脾脏和法氏囊组织并称重,计算免疫器官指数。结果显示,各给药组的血清ND-HI抗体效价、血清IFN-γ和IL-2含量、法氏囊指数均显著高于Cy组(P0.05);sGPS6组血清抗体效价、IFN-γ含量在28d,血清IL-2含量在21、28d均显著高于其余各组(P0.05);在免疫后21、28d,4个给药组中sGPS6组体重、法氏囊指数最高,显著高于其余3个给药组(P0.05);在免疫后28d,4个给药组中sGPS6组胸腺指数、脾脏指数最高,显著高于其余3个给药组(P0.05)。结果表明,硒化大蒜多糖对环磷酰胺所致的免疫抑制具有颉颃作用,其中sGPS6组的活性最高,可作为新型免疫抑制颉颃剂的候选药。