鸡源大肠杆菌耐药性分析及中药对大肠杆菌耐药性消除作用的研究

研究鸡源大肠杆菌耐药性及中药对大肠杆菌耐药性消除作用。选择22种抗生素采用Kirby-Bauer法对山西省部分地区分离的20株致病性鸡源大肠杆菌进行耐药性检测,对分离菌株进行质粒分析和耐药质粒转化试验,并分析多种中药对大肠杆菌耐药性的消除作用。结果显示,20株试验菌对测试抗生素均存在不同程度的耐药性,其中5耐及5耐以上的菌株占分离菌株的90%,试验菌对青霉素耐药率最高(90%),其次为恩诺沙星(85%),而对黏杆菌素和呋喃妥因的耐药性最低;分离出12种质粒谱型,同一地区、同一鸡场菌株的质粒图谱相同或相似,不同地区菌株的质粒图谱不同,仅有部分相同或相近的流行质粒共存;对其中5株菌株进行耐药质粒的转化试验,发现同一质粒可编码1个至数个耐药性基因,不同质粒可以携带相同的耐药性基因;中药单剂或合剂对大肠杆菌的耐药性有一定的消除作用,其中黄芩的消除效果最好,中药处理后部分菌株质粒图谱无变化,只有黄连和双黄连造成2条质粒带丢失;对中药提取物作用后的消除子进行药敏试验,结果发现大肠杆菌对环丙沙星等多种抗生素恢复了敏感性。研究结果提示联合使用中药治疗鸡源大肠杆菌病有显著效果。     

10种中药提取物对耐药金黄色葡萄球菌抑菌作用的研究

为了解研究中药提取物对耐药菌的抑菌作用,采用纸片法和倍比稀释法研究10种中药水提取液对耐氟喹诺酮类药物金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用;用点种法和药敏纸片法研究耐药抑转作用。结果显示,10种中药水提物中黄芩水提取物对耐氟喹诺酮类药物金黄色葡萄球菌抑制效果最明显。耐药性抑制试验结果表明,只有黄芩水提取物对Sa1的耐药性有明显的抑制作用,抑制率达65%,但对其他菌株的抑制作用则表现不明显;药敏纸片法显示黄芩对细菌耐药性有最强抑制作用。表明中药水提取物对耐氟喹诺酮类药物金黄色葡萄球菌有抑制作用,且部分药物抑菌作用明显;黄芩水提取物对Sa1菌株具有耐药逆转作用。     

地锦草等中药提取物对大肠杆菌耐药消除作用的初步研究

对动物源大肠杆菌采用二倍稀释法对氨基糖苷类药物及其他药物进行了MIC的测定,结果显示对十种西药全部耐药。应用1/2MIC的中药提取物对耐药菌株进行了耐药性消除的初步探索研究,结果表明临床多重耐药大肠杆菌用中药提取物作用24代以后,地锦草提取物耐药消除最强,三黄汤提取物次之,对某些氨基糖苷类药物的MIC明显下降。另外,对消除前后的细菌提取质粒,扩增氨基糖苷类的耐药基因,发现随着MIC的降低,耐药基因的数量也不同程度地减少和消失。由此可见地锦草等中药提取物对可移动的耐药基因元件有一定的消除作用,对耐药基因的扩散有抑制作用。     

中药制剂对大肠杆菌耐药性逆转的作用研究

经药敏试验测定,复方苍术口服液和复方十大功劳颗粒对5株耐药大肠杆菌无抑菌活性。但将其加入耐恩诺沙星大肠杆菌的肉汤培养基中进行传代,连传7代后,发现3株菌株的MIC降低了8倍以上,耐药逆转率为60%。其中2号菌株GyrA基因83位氨基酸突变为正常的氨基酸序列,3号菌株ParC基因80位氨基酸也有原来的氟喹诺酮耐药性突变状态转变为正常状态。结果表明中药制剂能逆转大肠杆菌的耐药性。     

中药提取物恢复耐药大肠杆菌对氨基糖苷类药物敏感性的研究

为考察五倍子、黄芩、黄连、艾叶、鱼腥草5种中药提取物恢复耐药大肠杆菌对氨基糖苷类抗生素敏感性的作用,采用1/2 MIC中药提取物对耐药菌株进行耐药性消除,通过影印培养法筛选出耐药性消除菌落,观察耐药消除率和消除子MIC值变化,并检测质粒及耐药基因rmt B的携带情况。结果表明:5种中药提取物对耐药大肠杆菌均有一定的抑制作用,耐药菌经1/2 MIC作用48 h后,五倍子、黄芩、黄连、艾叶、鱼腥草的耐药消除率分别为20.67%、21.33%、17.33%、16.67%、9.33%;消除子对庆大霉素(GEN)、卡那霉素(KAN)、阿米卡量(AMK)、新霉素(NEO)的MIC值均由高度耐药(512μg/m L)降至敏感(2~4μg/m L);5种中药提取物不能使耐药菌质粒丢失,却能导致耐药基因rmt B丢失。5种中药提取物可能是通过使高度耐氨基糖苷类药物的细菌丢失耐药主效基因来恢复对药物敏感性的。     

不同中药提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用和逆转机制

采用(K-B)药敏纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的药物敏感性,并用二倍稀释法分别测定10种中药提取物对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),选取抑菌效果最好的中药提取物(黄芩)通过棋盘法测定其与5种常用抗生素的联合抑菌效果。观察黄芩不同亚抑菌浓度作用下对MRSA耐药性的逆转效果,并通过荧光实时定量PCR法检测耐药基因mec A在mRNA表达水平上的变化。结果表明,MRSA具有多重耐药性,10种中药提取物里黄芩的抑菌和杀菌效果最为显著,MIC和MBC均为156 mg/L,但其与5种抗生素没有显著的联合抗菌作用,在黄芩亚抑菌浓度130 mg/L作用20 h后,MRSA主要耐药基因mec A的表达量下调并恢复了对药物的相对敏感性。     

十大功劳对大肠杆菌耐药性的消除作用

取阔叶十大功劳叶和功劳木,分别用水提和醇提2种提取方式制得4种提取物,经高效液相色谱法分析,这些提取物中主要成分为小檗碱、药根碱、巴马汀等,对18株耐药大肠杆菌的抑菌活性很低,功劳叶水提物的最小抑菌浓度（MIC）范围为15．6-250g／L（生药）,其余提取物的MIC均大于250g／L（生药）。在耐药菌的肉汤培养基中加入不同质量浓度的中药提取物进行传代培养,18株耐药菌有8株菌的MIC降低了8倍以上,耐药逆转率为44％。结果表明,十大功劳提取物能消除大肠杆菌的耐药性。     

中药连翘对耐药大肠杆菌抑制作用的研究

大肠杆菌是临床感染中最常见的病原菌之一,目前国内外一般借助于抗生素治疗大肠杆菌病,效果良好.但随着抗生素的不断应用及不合理用药,导致细菌的耐药问题越来越严重,随着耐药水平的不断提高和耐药谱的不断扩大,多数病原菌对抗生素都可产生多重耐药性,因而给抑制剂的开发带来一定困难.研究发现,有些中药具有一定的抗菌、抗病毒作用,并且中药价格低,不产生耐药性,可以克服抗生素的诸多弊端,可作为新型的多重耐药抑制剂进行开发、研究[1].试验在前人研究的基础上,采用体外培养试验来初步研究中药连翘对耐药大肠杆菌的抑制作用,以期为进一步探讨耐药抑制剂的作用机制提供基础资料.     

盐酸黄连素增强耐药鸡大肠杆菌敏感性的初步研究

<正>大肠杆菌是鸡临床感染中最常见的病原菌之一,目前国内外一般借助于抗生素治疗大肠杆菌病,效果良好。但随着抗生素的不断应用及不合理用药,导致细菌的耐药问题越来越严重,随着耐药水平的不断提高和耐药谱的不断扩大,大多数病原菌对抗生素都可产生多重耐药性,因而给鸡大肠杆菌病的治疗带来很大困难。研究发现,有些中药或中药提取物,特别是清热类中药具有很强的抗菌、抗病毒作用,并且中药一般不易产生耐药性,残留量少,毒副作用小,可以克     

中药消除大肠杆菌对氟喹诺酮类耐药性的作用研究

通过对重庆市部分养殖场分离到的120株致病性大肠杆菌进行了耐药谱的调查，并利用加有100μmol／1的黄连、丹参提取液的培养基进行感触培养，观察培养前后大肠杆菌对氟喹诺酮类药物耐药谱的变化。试验结果显示，经两种不同中药提取液感触培养后，8耐以上的菌株从72．5％分别下降到61.7％和54.2％.表明中药可部分逆转致病性大肠杆菌对氟喹诺酮类药物的耐药性。     

一种防治鸡大肠杆菌病的中药复方的筛选

为筛选出具有显著效果的治疗鸡大肠杆菌病的中药复方,本试验拟定了5个中药复方,通过进行体外体内抑菌试验来评价其抗菌效果。体外抑菌试验主要通过牛津杯法测定单味药及不同中药复方的抑菌圈大小来评价大肠杆菌对药物的敏感度,体内试验主要利用对人工建立的病鸡模型的治疗效果对5个中药复方进行筛选。结果显示,浓度为1.0 g/m L的提取液抗菌效果较0.5 g/m L的提取液抗菌效果好,当提取液浓度为1.0 g/m L时,大肠杆菌对大黄、地锦草高度敏感;对黄芩、十大功劳中度敏感;对中药复方组方I、II、III、IV、V中度敏感。临床试验结果显示,中药复方III组治疗效果较好,治愈率为71.4%,死亡率为14.3%,而模型组治愈率为11.1%,死亡率为66.7%,差异极显著(P<0.01)。结论提示,中药复方III组对鸡致病性大肠杆菌病有较好的治疗效果。     

内蒙古中东部地区不同来源大肠杆菌耐药性调查

本研究旨在调查内蒙古赤峰、通辽地区不同来源的大肠杆菌对抗生素类药物的耐药情况。采用K-B法分析来源于鹅、牛和猪等患病动物分离出的46株大肠杆菌对13种常用的抗生素类药物的耐药性;鹅源和猪源大肠杆菌对盐酸多西环素的耐药率最高,分别达95.2%和93.3%;牛源大肠杆菌对盐酸沙拉沙星、恩诺沙星和盐酸多西环素的耐药率最高,达80.0%。多重耐药性结果表明,患病动物的大肠杆菌以6耐（23.9%）为主;牛源大肠杆菌则以7耐（40%）最多。总体耐药谱型以恩诺沙星/氟苯尼考/盐酸多西环素/阿莫西林/硫酸新霉素为主（24.4%）。不同来源的大肠杆菌对抗生素类药物均产生了严重的耐药性,因此不但要求养殖人员学会合理使用抗生素类药物,同时研究开发逆转耐药性的新药物或对抗生素类药物有增敏效用的新药物十分必要。     

动物源性大肠杆菌耐药性分析

目的:对吉林省长春市伊通地区分离出的113株动物源性大肠杆菌耐药性进行分析,了解猪源和鸡源大肠杆菌耐药程度及其耐药谱。方法:采用K-B纸片扩散法对大肠杆菌耐药性初步定性分析,并从中选出十株耐药谱不同的大肠杆菌测定其抗生素的最小抑菌浓度(MIC)。结果:113株均表现出不同程度的耐药,耐药谱广,且多表现为多重耐药。结论:动物源性大肠杆菌对抗生素的耐药性以多重耐药为主。113株对喹诺酮类、磺胺类、利福平耐药率达到90%以上,其中鸡源、猪源大肠杆菌耐药情况各不相同,二者均对丁胺卡那霉素、先锋必/舒巴坦较敏感,耐药率低于15%,可知丁胺卡那霉素、先锋必/舒巴坦可作为这些地区防治致病性大肠杆菌的首选药物。本实验结果对临床科学合理用药有重要指导意义。     

抗鸡大肠杆菌病中药复方筛选试验

从常用具有清热解毒、燥湿止痢功效的中药中选择11味,经体外抑菌试验筛选出对鸡源性大肠杆菌具有较强抑菌作用的地锦草、黄芩、苍术等为主,组成3个中药复方,采用2倍稀释法进行体外抑菌试验,结果复方1具有较好的抗鸡源性大肠杆菌的作用。采用雏鸡人工感染大肠杆菌病模型比较复方1和复方2的抑菌效果,结果复方1对人工感染大肠杆菌雏鸡具有显著的保护作用。     

四川某些规模化猪场大肠杆菌的分离鉴定及耐药性监测

为有效监测四川某地区猪致病性大肠杆菌的耐药性,本试验采用纸片扩散法对采自该地区不同区域的8个猪场的70株致病性大肠杆菌进行药物敏感性测定,结果表明,分离菌对12种药物存在不同程度的耐药性:对阿莫西林、红霉素高度耐药,耐药率分别为100％、82.86％,敏感性最高的氧氟沙星、头孢唑啉敏感率分别为82.86％、60％,所有菌株耐药性至少3耐,最高达11耐,51.43％呈7耐以上,共39种耐药谱型.由此可见,该地区规模化猪场大肠杆菌耐药程度严重.故筛选有效抗生素,采取必要措施防治此病已势在必行.     

植物源抑菌物质的筛选及其应用

本试验主要研究了植物源抗菌物质特性,筛选可替代抗生素的原料。利用药敏试验（标准菌株大肠杆菌各型、金黄色葡萄球菌、沙门氏菌及霉菌）及临床攻毒试验对12种常见中草药进行研究分析。结果表明,12种单味中草药的粗提物中黄连、夏枯草、黄芩、连翘、石榴皮对大肠杆菌均有抑制作用,且效果明显强于其他提取液;临床试验结果表明黄芩、夏枯草、连翘和金银花对鸡的攻毒保护率高于感染对照组5%～10%。     

黄芩提取物对耐药性金黄色葡萄球菌的体外抑菌和耐药抑制作用研究

目的:采用纸片法和倍比稀释法研究黄芩水提取物与醇提取物对耐药性金黄色葡萄球菌的体外抑菌作用;用点种法研究黄芩水提取物对耐药性金黄色葡萄球菌的体外耐药抑制率。结果:黄芩水提物对耐药性金黄色葡萄球菌的抑菌作用强于醇提取物。耐药性抑制试验结果表明,黄芩水提取物对耐药性金黄色葡萄球菌的耐药抑制作用具有选择性。结论:黄芩提取物对耐药性金黄色葡萄球菌有明显的抑菌作用,对Sa1菌株具有耐药抑制作用。     

猪致病性大肠杆菌耐药质粒检测及其中药消除作用研究

为探讨中药对河南省规模化养猪场致病性大肠杆菌(E.coli)耐药质粒消除的效果,本研究在对87个猪致病性E.coli分离株进行耐药质粒检测的基础上,将各分离株分别于含有不同浓度的石榴皮、黄芩、黄连等中药提取液的培养液中培养,进行耐药质粒消除试验;并采用影印培养法和纸片扩散法进行耐药性消除菌落筛选及其对抗菌药物敏感性恢复的检测.结果表明:各分离株均含有2个～8个质粒,大小约为1.0 kb～87.0 kb;经石榴皮、黄芩、黄连作用后,各分离株均可以获得数量不等的耐药性消除菌落,消除率为0.34％～16.2％,以黄连的平均消除率最高,为9.33％;在耐药性消除的各分离株中,有25个分离株未发生质粒消除,其余均消除了1条～3条质粒,并且对7种抗菌药物的平均敏感率由消除前的5.39％分别提高至60.4％、75.2％和76.5％.表明石榴皮、黄芩、黄连对猪致病性E.coli具有质粒消除和耐药性逆转作用,其中黄连作用效果最好.     

香芪口服液对大肠杆菌耐药抑制作用

通过香芪口服液对耐药大肠杆菌作用前后环丙沙星和庆大霉素最小抑菌浓度测定、质粒图谱分析以及外膜蛋白图谱分析,研究香芪口服液对耐药大肠杆菌的体外耐药性的抑制作用.结果表明:中药作用后,大肠杆菌对环丙沙星和庆大霉素最小抑菌浓度无变化;中药作用后的大肠杆菌的质粒图谱部分质粒消失,1号菌株ompA恢复表达,2号菌株ompF恢复表达;此中药与大肠杆菌质粒拷贝、恢复外膜通道蛋白的正常表达有密切关系,为今后耐药抑制剂的研制奠定理论基础.     

四川省猪、鸡源大肠杆菌对抗生素耐药性研究

对四川省2009-2014年共2 954株猪、鸡源大肠杆菌进行13种抗生素耐药性测定,同时对耐头孢噻呋大肠杆菌及O157菌株耐药基因进行检测。结果表明:大肠杆菌对抗生素耐药谱广,多重耐药严重。大肠杆菌对抗生素耐药率呈逐年波动下降趋势,猪源大肠杆菌对抗生素耐药率总体耐药率为40.40%~92.32%,抗生素耐药率依次为:TET(92.32%)>SIZ(91.96%)>AMP(91.25%)>SXT(87.56%)>DO(77.67%)>FFC(73.97%)>SH(69.91%)>EN(66.00%)>AMC(61.10%)>OFX(59.39%)>CN(57.82%)>PME(42.53%)>CEF(40.40%)。鸡源大肠杆菌对抗生素的总体耐药率为9.17%-89.41%,抗生素耐药率依次为:SIZ(89.41%)>AMP(85.01%)>SXT(83.40%)>TET(83.01%)>EN(72.03%)>OFX(63.37%)>AMC(62.14%)>DO(58.90%)>FFC(55.10%)>SH(50.52%)>CEF(46.9%)>CN(33.91%)>PME(9.17%)。2009年-2014年猪源大肠杆菌耐药率总体高于鸡源大肠杆菌。研究表明,监测大肠杆菌的抗生素耐药性对动物的养殖、疾病的预防及耐药性的控制有着重要意义。