鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感三联灭活疫苗免疫产生期试验

采用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗,分别免疫SPF鸡,免疫后7、14、21天采血测定ND及A(IH9)HI抗体,并用NDV、AIV(H9)强毒攻击,观察三联苗ND及A(IH9)部分的免疫产生期;此外,先用H120活疫苗免疫SPF鸡,免疫后3周,用三联苗加强免疫,免疫后7、14、21天采血测定IBHI抗体,观察三联苗IB部分的免疫产生期。结果证明,三联灭活苗的免疫产生期为14天。     

高致病性禽流感推荐免疫方案

1．种鸡、蛋鸡免疫：雏鸡7～14日龄时，用H3N1亚型禽流感灭活疫苗初免，也可使用禽流感新城疫重组二联活疫苗（rL-H3）进行初免。在3～4周后可再进行1次加强免疫。开产前再用H2N1亚型禽流感灭活疫苗进行强化免疫，以后根据免疫抗体检测结果，每隔4～6个月用H、N1亚型禽流感灭活苗免疫1次。     

鸡新城疫-传染性支气管炎二联灭活疫苗免疫效力产生期和免疫持续期试验

本试验对鸡新城疫(ND)、鸡传染性支气管炎(IB)二联灭活疫苗的免疫效力产生期和免疫保护持续期进行试验研究。免疫效力产生期试验选用2周龄SPF鸡首免H120,3周后二免二联灭活疫苗(0.3 mL/只),结果显示,免疫后11 d开始产生免疫力,到21 d产生坚强免疫力。免疫保护持续期试验选用2周龄蛋雏鸡、120日龄蛋鸡,结果显示给2周龄蛋雏鸡首免H120,3周后二免二联灭活疫苗(0.3 mL/只),免疫期可持续到开产前(120日龄左右);给120日龄蛋鸡免疫二联灭活疫苗(0.5 mL/只),免疫期可达到4个月。根据试验结果确定免疫保护持续期为:对于蛋雏鸡,0.3 mL/只,免疫期可以持续到开产前;对于开产前的商品蛋鸡,0.5mL/只,免疫保护4个月,然后再加强免疫1次,持续整个产蛋期。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征三联灭活疫苗最小免疫剂量的研究

采用北京市农林科学院畜牧兽医研究所制备的ND-IB-EDS三联灭活疫苗,分别以0.1,02,0.3,0.5mL/只的剂量免疫3周龄SPF鸡,免后3周测定ND及EDSHI抗体,然后用NDV强毒北京株攻毒;另外,首免用H120活苗免疫SPF鸡,二免分别用0.1～05mL/只三联苗,并测定2次免疫后IBHI抗体.试验结果表明,0.1 mL/只的免疫剂量就可产生较好的免疫效果,因此,确定该疫苗的最小免疫剂量为0.1 mL/只.     

鸡传染性支管炎HI抗体与攻毒保护率相关性试验报告

21日龄SPF鸡以H120活疫苗进行点眼免疫1羽份,21d后再用鸡新支流三联灭活疫苗加强免疫,分别于免疫后28、45、60、75、90、120、150d定期采血监测HI抗体,并以IB强毒气管内注射攻毒,明确HI抗体与攻毒保护率之间的相关性。结果表明,当免疫鸡群HI抗体在7．5Log2以上时,可以抵抗IB强毒攻击。     

2008年我国高致病性禽流感和新城疫等主要动物疫病免疫方案

1 免疫方案 1.1 高致病性禽流感 规模养殖场按免疫程序进行免疫,对散养家禽实施春秋集中免疫,每月对新补栏的家禽要及时补免.①种鸡、蛋鸡免疫:雏鸡7～14日龄时,用H5N1亚型禽流感灭活疫苗初免,也可使用禽流感一新城疫重组二联活疫苗(rL-H5)进行初免.在3～4周后可再进行1次加强免疫.     

鸡新城疫-传染性支气管炎-禽流感(HH9亚型)-传染性法氏囊病四联灭活疫苗的研究

为研制鸡新城疫(ND)-传染性支气管炎(IB)-禽流感(AI,H9亚型)-传染性法氏囊病(IBD)四联灭活疫苗,用易感鸡胚增殖NDV La Sota株、IBV M41株及AIV H9亚型WD株,用DF-1细胞增殖IBDV BJQ902株,收获病毒液,经浓缩、灭活后,制成3批油乳剂灭活疫苗。按照《中国兽药典》对疫苗进行检验。结果显示:3批疫苗的性状检验、装量检验、无菌检验、甲醛、汞类防腐剂残留量测定和安全性检验均合格。效力检验显示:NDV血凝抑制(HI)效价为6.0～6.2 log2;IBV HI效价二免是首免的8.00～13.92倍;AIV(H9)HI效价8.8～9.1 log2;IBDV中和抗体效价15.7～16.1 log2。攻毒后免疫鸡均100%保护(10/10),对照鸡全部发病(5/5)。研究结果表明制备的四联苗安全有效、免疫效力高,为该疫苗的产业化开发提供了依据。     

猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体二联灭活疫苗与猪瘟活疫苗混合免疫效果评价

为评价猪圆环病毒2型、猪肺炎支原体二联灭活疫苗(以下简称圆支二联苗)与猪瘟活疫苗混合免疫效果,本研究利用圆支二联苗作为稀释剂稀释猪瘟(CSFV)活疫苗,稀释后的混合疫苗在室温放置0、1 h、2 h取样测定CSFV含量,结果显示放置2 h CSFV含量未下降,表明圆支二联苗作为稀释剂不影响CSFV含量。用圆支二联苗对仔猪首次免疫,首免后14 d用稀释后的混合疫苗二免,分别在二免后21 d和28 d利用猪圆环病毒2型(PCV2)和猪肺炎支原体(Mhp)攻毒,结果显示圆支二联苗和CSFV活疫苗混合使用的免疫效果与单独使用圆支二联苗的免疫效果相当,针对PCV2的攻毒保护率均为80%,针对Mhp攻毒,混合疫苗免疫的仔猪肺炎病变减少率分别为73.1%和75.0%。此外,分别在混合疫苗和CSFV活疫苗免疫仔猪后不同时间采血,检测血清中CSFV抗体水平,结果显示混合疫苗免疫一次与CSFV活疫苗免疫一次后CSFV抗体水平相当。以上结果表明圆支二联苗可以作为稀释剂稀释CSFV活疫苗,一次性注射免疫,各疫苗免疫效力均不受影响。本研究为临床免疫程序优化及相关疫病的防制提供了实验依据。     

鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活 疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫程序研究

设计不同的免疫程序,用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫黄羽肉鸡,通过对ND、IB、H9抗体滴度监测,探讨ND、IB、H9抗体消长规律及鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)的免疫程序。试验结果表明,用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)免疫黄羽肉鸡后,其诱导产生的ND、IB、H9抗体的消长规律基本同步;仅于10日龄免疫一次三联灭活苗,其抗体水平较低,于20、40日龄二免、三免或10日龄先用鸡新城疫病毒(La Sota株)、禽流感病毒(H9亚型,SS/94株)二联灭活疫苗作基础免疫,20或40日龄再用三联灭活苗作加强免疫,则上述3种抗体均快速上升,且维持时间长。根据试验结果,建议按照正常免疫程序作基础免疫的健康肉鸡,饲养期较短的可于20日龄左右用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)作加强免疫,0.3 mL/只;饲养期较长的则于40日龄左右用鸡新城疫、传染性支气管炎、禽流感(H9亚型)三联灭活疫苗(La Sota株+M41株+SS/94株)作加强免疫,0.5 mL/只。     

鸭免疫重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5+Re-4)后抗体消长规律的研究

重组禽流感病毒H5亚型二价灭活疫苗(H5N1,Re-5株+Re-4株)3批,以推荐的免疫程序和剂量分组免疫母源抗体消失的雏鸭。免疫后定期采血测定抗体效价。结果为:鸭加强免疫(首次免疫后第3周)后,抗体效价迅速升高。在加强免疫后第3周(首次免疫后第6周)达到最高值9.9～11.1log2。HI抗体效价在8周以后开始下降,首免20周以后抗体水平衰减到4log2以下。     

H5亚型禽流感灭活疫苗免疫后鸡血凝抑制抗体动态变化观察

选择国家指定的两个厂家生产的禽流感灭活疫苗(H5亚型,N28株)进行无母源抗体来航鸡的免疫试验.通过鸡免疫后血凝抑制(HI)抗体的动态性检测,对两个疫苗的免疫效果进行了观察.研究结果表明,两个疫苗均具有良好的免疫效果,但也存在一定程度的差异;加强免疫可以明显提高抗体水平,延长免疫保护时间.     

鸡新城疫－传染性支气管炎－传染性法氏囊病三联灭活疫苗对不同日龄雏鸡的免疫效力研究

为评估鸡新城疫（ND）-传染性支气管炎（IB）-传染性法氏囊病（IBD）三联灭活疫苗对不同日龄和不同水平母源抗体雏鸡的免疫效力和持续期,本试验用该疫苗免疫7、14、21日龄SPF雏鸡和有母源抗体的普通雏鸡,免疫后采血测定ND血凝抑制抗体（HI Ab）、IB血凝抑制抗体（HI Ab）及IBD中和抗体（NA）,并用传染性法氏囊病病毒（IBDV）强毒攻击。结果显示,7日龄SPF雏鸡免疫后21 d ND HI抗体、IB HI抗体及IBD中和抗体效价分别为7.9log2、6.9log2和14.1log2,SPF鸡日龄越大,抗体水平越高;28日龄SPF鸡免疫后3个月,0.3 mL免疫剂量组试验鸡ND HI、IB HI及IBD中和抗体效价分别达6.5log2、6.1log2和13.6log2,IBDV攻毒保护率均为100%（10/10）;不同日龄普通雏鸡免疫效果与SPF鸡试验一致,抗体水平随鸡日龄增大而升高,IBD攻毒保护率也都达到100%（10/10）。试验结果证实,鸡新城疫-传染性支气管炎-传染性法氏囊病三联灭活疫苗可使7、14及21日龄SPF雏鸡和普通雏鸡产生良好的免疫力,对雏鸡的免疫期至少为3个月。     

重组禽流感病毒灭活疫苗(H5N1亚型,Re-1株)免疫鸡抗体消长规律及免疫程序的初步研究

研究新型重组H5N1亚型禽流感灭活疫苗对种鸡和肉鸡的免疫原性,并对雏鸡母源抗体和免疫后的抗体进行动态观察,根据试验结果推荐该疫苗对鸡的免疫程序。用HI方法检测种鸡、肉鸡的母源抗体和免疫抗体,根据母源抗体的衰减和免疫抗体的消长规律确定首免和再免日龄。结果表明种鸡的母源抗体约能维持10 d多;0.3 mL/羽首免后10 d HI抗体就可达到6.40 log2,3-5周达到高峰期,至免疫17周后(19周龄)HI抗体水平仍然维持在4.88 log2;19周龄时0.5 mL/羽进行二免,有效抗体能维持约20周;280日龄0.5 mL/羽三免后抗体水平均一,下降缓慢,至种鸡淘汰时(三免后29周)抗体水平仍能维持在5.32 log2。肉鸡母源抗体约能维持7d,10日龄时0.3 mL/羽免疫,有效抗体能维持到上市。新型重组H5N1亚型禽流感灭活疫苗对鸡的免疫原性确实。     

鸡产蛋下降综合症油乳剂灭活苗的免疫及攻毒保护试验

对应用当地分离病毒株研制的鸡产蛋下降综合症系列油乳剂灭活苗进行了免疫试验。结果表明,免疫后,鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ７６）油乳剂灭活苗、鸡新城疫（ＮＤ）－产蛋下降综合症二联油乳剂灭活苗及鸡新城疫－鸡传染性支气管炎（ＩＢ）－产蛋下降综合症三联油乳剂灭活苗免疫组的血清ＥＤＳ７６ＨＩ抗体迅速上升,维持４个月后仍在６．８－８（ｌｏｇ２）以上,并且能够抵抗强毒的攻击。证明所研制的ＥＤＳ７６油苗、ＮＤ－ＥＤＳ７６二联油苗、ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ７６三联油苗对ＥＤＳ７６具有良好的免疫作用,能够抵抗ＥＤＳ７６强毒的攻击并产生高而持久的血清ＨＩ抗体。此外,对ＮＤ－ＥＤＳ７６二联苗、ＮＤ－ＩＢ－ＥＤＳ７６三联苗免疫组的血清ＮＤＨＩ抗体测定结果表明,上述二联苗、三联苗能产生与接种ＮＤ油苗一样良好的ＮＤ免疫效果,在免疫后１３０天时,其血清ＨＩ抗体仍高达９－１１（ｌｏｇ２）以上,与对照组有极显著的差异     

新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合征三联油乳剂苗免疫对比试验

用血凝抑制试验（ＨＩ）监测自制ＮＤＲＩＢＥＤＳ、ＮＤＫＩＢＥＤＳ三联油乳剂灭活苗免疫鸡的抗体水平,并进行相应强毒攻击,同时以ＮＤＥＤＳ二联、ＲＩＢ、ＫＩＢ等自制油苗和进口ＮＤＲＩＢＥＤＳ三联油苗作对照。在此基础上,用自制三联苗免疫产前鸡４批共３８５２只,进行了田间免疫试验。结果表明：１用各种疫苗免疫后,第２０天鸡体ＨＩ抗体达峰值,维持３个月左右,至免疫后３６０天,ＮＤ抗体仍维持在８０ｌｏｇ２以上,ＲＩＢ、ＫＩＢ和ＥＤＳ的ＨＩ抗体均在７０ｌｏｇ２以上。经检验不同疫苗免疫的鸡相应抗体在同时期内均无显著差异（Ｐ＞００５）。２攻毒试验也表明,自制苗和进口苗具有同等的免疫效果,均获良好的免疫保护。３田间免疫试验表明,自制三联苗免疫效果良好。     

重组禽流感灭活苗和禽流感灭活苗对鸡免疫效果的观察

用重组禽流感灭活苗接种10日龄、14日龄和21日龄的SPF鸡,接种后HI抗体效价无显著差异。将H5N1和H5N2疫苗分别接种21日龄SPF鸡,结果表明,H5N1和H5N2均能刺激SPF鸡产生较高的HI抗体;分别接种三黄鸡,接种后21 d,H5N1能刺激三黄鸡产生较高的HI抗体;而H5N2不能刺激三黄鸡产生合格的HI抗体,与SPF鸡免疫组相比差异显著。经过二次接种,HI抗体平均为8.9 log2,与SPF鸡组接种后42 d的各组相比差异不显著,而与一免后21 d的各组HI抗体效价相比差异显著。表明应用禽流感灭活苗对三黄鸡免疫接种,必须进行二免方可达到理想免疫效果,而应用重组禽流感灭活苗对三黄鸡进行免疫接种,一次免疫即可获得较高的HI抗体效价。     

鸡新城疫V_4株油乳剂灭活苗免疫效果观察

鸡新城疫V_4株油乳剂灭活苗接种1月龄SPF来航鸡,进行了正常免疫剂量的安全性试验和接种前后血凝抑制抗体效价的动态监测。结果,此灭活苗是安全的;接种后10d产生免疫力,效价为6.8log2,40d效价达高峰10.3log2;210d其效价仍为6.4log2。同时在免疫接种后40d进行了攻毒试验,5/5保护。     

Isolation,Identification and Immunogenicity Evaluation of H9N2 Subtype Avian Influenza Virus HF Strain

In 2015,an H9N2 subtype avian influenza virus (AIV) strain was isolated from a chicken farm in Hefei,Anhui,and named HF strain.The results of the chicken embryo proliferation characteristics study showed that the half infection rate of chicken embryo (EID₅₀) was 10^9.17/0.1 mL,and the mean time to death for minimum lethal dose(MDT) was 87 h.The analysis result of HA gene showed that its amino acid cleavage site was located in RSSR↓GLF,which accorded with the characteristics of low pathogenic avian influenza.The genetic evolution analysis of HA gene revealed that the isolate belonged to the h9.4.2.5 lineage,which accorded with the current virus strain epidemic characteristics.The HF strain was prepared with 10 H9N2 subtype AIV isolates which isolated from all over the country from 2006 to 2018 to prepare inactivated vaccines,immunize SPF chickens,prepare positive sera,and analyze the virus antigenicity by cross hemagglutination inhibition test.The results showed that the correlation between the HF strain and the virus antigens before 2014 and was between 0.50-0.56,and the virus antigen correlation after 2014 was 0.89-1.00.This showed that the isolate had good antigenic correlation with epidemic strains in recent years.Inactivate HF strain virus solution with 0.2% formaldehydel,and its HA titer did not change before and after inactivation.After the inactivated virus solution was prepared into an oil emulsion inactivated vaccine to immunize SPF chickens,21 days after immunization,the average value of the HI antibody titer reached 9.0log2.It could make immune chicken completely resistant to H9 subtype AIV infection and provide 100% protection from challenge.The above research results showed that the HF strain had good immunogenicity and could be used as a vaccine candidate strain for the prevention of H9N2 subtype AIV.     

H9亚型禽流感病毒HF株的分离鉴定和免疫原性评价

2015年,从安徽合肥某养鸡场分离出一株H9N2亚型禽流感病毒（AIV）,命名为HF株。该毒株鸡胚半数感染量（EID₅₀）为10^9.17/0.1 mL,最小致死量的平均死亡时间（MDT）为87 h。对其HA基因分析发现,其氨基酸裂解位点为RSSR↓GLF,符合低致病性AIV特征;HA基因的遗传进化分析结果表明,该分离株属于h9.4.2.5谱系,符合当前毒株流行趋势。将HF株与2006-2018年分离自全国各地的10株H9N2亚型AIV分离株同时制备灭活疫苗,免疫SPF鸡,制备阳性血清,通过交叉血凝抑制试验分析病毒抗原性,结果显示HF株与2014年之前毒株抗原相关性介于0.50~0.56之间,与2014年及之后毒株抗原相关性介于0.89~1.00之间,表明该分离株与2014年之后的流行毒株具有良好的抗原相关性。用0.2%甲醛灭活HF株病毒液,其HA效价在灭活前后未发生变化;用灭活抗原制备油乳剂灭活疫苗免疫SPF鸡,免疫后21 d HI抗体效价几何平均值达到9.0log2以上,可使免疫鸡完全抵抗H9亚型AIV的感染,提供100%的攻毒保护。研究结果表明,HF株具有良好的免疫原性,可作为疫苗候选株用于H9N2亚型禽流感疫苗的研制。