日粮添加不同水平芦丁对热应激小鼠睾丸组织的影响

本试验旨在探讨日粮添加不同水平芦丁对缓解热应激小鼠睾丸组织损伤的影响。将30只5周龄体重相近（20～22 g）的ICR系雄性小鼠随机分为5组,各组小鼠分别饲喂基础日粮添加0（CON组）、0（HS组）、250（HS+R250）、500（HS+R500）和1 000（HS+R1000） mg·kg^-1芦丁的日粮,饲养10 d后,除对照组（CON）外,所有小鼠在每天10：00至14：00之间置于42℃恒温箱中连续处理8 d后屠宰取样分析。结果显示：1）与CON组相比,HS组小鼠睾丸指数无显著变化（P>0.05）,而日粮添加250 mg·kg^-1芦丁显著提高热应激小鼠睾丸指数（P<0.05）;小鼠睾丸组织切片结果显示,与CON组相比,HS组小鼠生精小管直径和横截面积显著降低（P<0.05）,生精细胞脱落比率显著增加（P<0.05）;与HS组相比,HS+R250组小鼠生精小管横截面积显著增加（P<0.05）,生精细胞脱落比率显著降低（P<0.05）,HS+R500组生精细胞脱落比率也显著降低（P<0.05）,HS+R1000组小鼠生精小管直径显著增加（P<0.05）;小鼠睾丸指数、生精小管直径及生精小管脱落比率在芦丁处理组与CON组之间无显著差异（P>0.05）,但HS+R250组小鼠睾丸生精小管横截面积显著高于CON组（P<0.05）。2）与CON组相比,HS组小鼠睾丸组织丙二醛（MDA）含量显著升高（P<0.05）,总抗氧化能力（T-AOC）与还原型谷胱甘肽（GSH）含量以及血红素酶-1（HO-1） mRNA的表达量均显著降低（P<0.05）;日粮添加250 mg·kg^-1芦丁显著降低热应激小鼠睾丸组织中MDA含量（P<0.05）,提高T-AOC与GSH含量（P<0.05）,并增强核因子E2相关因子2（Nrf2）、HO-1和谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px） mRNA的表达量（P<0.05）,而添加500和1 000 mg·kg^-1芦丁也显著提高了GSH含量（P<0.05）;与CON组相比,除HS+R250组Nrf2 mRNA表达量显著高于CON组（P<0.05）外,芦丁组热应激小鼠睾丸组织抗氧化相应基因与酶活指标均无显著性变化（P>0.05）。3）热应激小鼠睾丸中核因子-κB （NF-κB）、TOLL样受体4（TLR-4）和Bax的mRNA表达量显著增加（P<0.05）,而Bcl-2表达量显著降低（P<0.05）;日粮添加250 mg·kg^-1芦丁显著降低NF-κB、TLR-4、髓样分化因子88（MyD88）、白细胞介素-Iβ（IL-1β）和Bax mRNA表达量（P<0.05）,增强Bcl-2的表达水平（P<0.05）;添加500 mg·kg^-1芦丁显著降低NF-κB和TLR-4表达量（P<0.05）,而1 000 mg·kg^-1芦丁能够显著增加Bcl-2的表达（P<0.05）;小鼠睾丸组织中免疫和增值凋亡相关基因的表达量在添加芦丁组及CON组之间无显著性差异（P>0.05）。结果提示,日粮添加适宜剂量芦丁具有改善热应激小鼠睾丸组织形态及功能的效果,其机制可能与芦丁通过Nrf2信号通路缓解氧化应激,通过TLR-4/NF-κB信号通路抑制炎症反应及调控Bax/Bcl-2 mRNA的表达密切相关。本试验条件下日粮添加250 mg·kg^-1芦丁的效果较好。     

DHA对高脂饲粮诱导肝脏脂肪积累的预防作用

[目的] 探索二十二碳六烯酸（DHA）对高脂饲粮诱导肝脏脂肪积累的预防机制。[方法] 将32只雄性SPF级C57BL/6小鼠均分为4组,对照组（Con）饲喂普通饲粮,模型组（Model）饲喂高脂饲粮,DHA组分别在高脂饲粮中添加0.2 g DHA（DHAL）和1.0 g DHA（DHAH）,饲喂周期为20周。饲喂期间每天称量体重及食物重量,计算摄食量;饲喂结束,采集肝脏和血液,ELISA法检测肝脏脂联素和血清甘油三酯（TG）的含量,实时荧光定量PCR检测新生脂肪合成关键酶（SREBP-1c、FAS）、脂肪酸氧化关键基因（PPARα、PPARγ、CPT-1A和ACOX）、线粒体基因（PGC-1α）、褐色脂肪化基因（Prdm16、UCP1）的表达,Western blotting法检测肝脏磷酸化ACC、AMPK和AKT蛋白的表达。[结果] 与Con组相比,Model组终体重、体脂重量和TG含量均显著增加（P<0.05）,肝脏脂联素浓度显著降低（P<0.05）。与Model组相比,DHAL和DHAH组终体重、体脂重量和TG含量均显著降低（P<0.05）,肝脏脂联素水平显著增加（P<0.05）。实时荧光定量PCR结果表明,与Con组相比,Model组SREBP-1c和FAS mRNA表达量均显著增加（P<0.05）,PPARα、CPT-1A、ACOX、PGC-1α和UCP1 mRNA表达均显著降低（P<0.05）;与Model组相比,DHAL和DHAH组SREBP-1c和FAS mRNA表达量均显著降低（P<0.05）,且DHAH组表达量均显著低于DHAL组（P<0.05）,DHAL和DHAH组PPARα、CPT-1A、ACOX、PGC-1α、Prdm16和UCP1 mRNA表达量均显著增加（P<0.05）,DHAH组CPT-1A和ACOX mRNA表达量显著低于DHAL组（P<0.05）,PPARγ的mRNA表达量在4组中没有显著差异（P>0.05）。Western blotting结果表明,Model组p-ACC显著高于Con和DHAH组,但显著低于DHAL组;Model组p-AMPK/AMPK和pAKT/AKT比值均显著低于Con组（P<0.05）,DHAH组p-AMPK/AMPK和pAKT/AKT比值均显著高于Model和DHAL组（P<0.05）。[结论] DHA可降低高脂饲粮导致的C57BL/6小鼠终体重、体脂和TG含量的升高,增加肝脏脂联素的水平,促进脂肪酸氧化和白色脂肪细胞褐色化,从而预防肝脏的脂肪积累。     

不同蛋白源日粮添加乳酸链球菌素对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响

本试验旨在探究不同蛋白源日粮条件下添加乳酸链球菌素（nisin）对育肥湖羊瘤胃发酵及微生物菌群结构的影响。试验采用2×2因子设计,两因子分别为蛋白源[豆粕（SBM）、干玉米酒精糟及其可溶物（DDGS）]和nisin （添加水平为0或30.5 mg·kg^-1 DM）,两两组合,配制4种等氮等能日粮。选取32只体重（23±2） kg的断奶湖羊公羔,按照随机区组设计,根据体重分为2个区组（低体重组,16只;高体重组,16只）,每个区组的湖羊随机分配到4个组并分别饲喂对应日粮,单栏饲喂。试验预饲期1周,正式期9周,试验期结束时每组从高、低体重区组中各随机选取3只湖羊（共24只）进行屠宰,采集瘤胃内容物,提取微生物基因组DNA,利用Illumina MiSeq测序和Real-time qPCR方法分析瘤胃微生物菌群结构。研究结果表明,除Ruminococcaceae NK4A214 group和Unclassified Bacteroidetes相对丰度外,日粮蛋白源与nisin对其他所有测定指标（瘤胃发酵参数、瘤胃菌群数量、瘤胃细菌多样性及相对丰度等）均不存在交互作用（P>0.05）。日粮添加nisin对所有测定指标均无显著影响（P>0.05）。与饲喂豆粕湖羊相比,饲喂DDGS湖羊瘤胃乙酸、氨态氮浓度及总支链脂肪酸（BCVFA）浓度显著降低（P<0.05）。qPCR结果显示,饲喂不同蛋白源日粮湖羊瘤胃总菌、真菌及甲烷菌数量均无显著差异（P≥0.053）,但相对于饲喂豆粕湖羊而言,饲喂DDGS湖羊瘤胃内原虫和嗜氨梭菌（C.aminophilum）数量显著降低（P<0.05）。Illumina-MiSeq测序结果表明,饲喂DDGS湖羊瘤胃内细菌Chao1指数和ACE指数显著升高（P<0.05）。不同日粮处理组在门水平上的优势菌门均为Bacteroidetes及Firmicutes;在属水平各处理组的主要优势菌属为Prevotella 1、Christensenellaceae R-7 group和Ruminococcaceae NK4A214 group。饲喂不同蛋白源湖羊瘤胃细菌在门水平上并未产生显著影响（P≥0.14）;在属水平上,饲喂DDGS湖羊瘤胃Pseudobutyrivibrio和Roseburia丰度均显著高于饲喂豆粕湖羊（P<0.05）,而Butyrivibrio 2以及Ruminococcaceae UCG-005的相对丰度显著低于饲喂豆粕湖羊（P<0.05）。综上所述,使用DDGS作为日粮蛋白源改变了湖羊瘤胃发酵参数及微生物菌群结构,原虫和C.aminophilum数量的降低可能是导致瘤胃氨态氮浓度显著降低的主要原因;日粮添加30.5 mg·kg^-1 DM的nisin对育肥期湖羊瘤胃发酵参数及微生物菌群结构均无显著影响。     

补充牛磺酸对高脂饮食C57BL/6J小鼠糖脂代谢的影响

【目的】通过建立高脂动物模型,探究牛磺酸对肥胖小鼠糖脂代谢的影响。【方法】将20只5周龄SPF级C57BL/6J雄性小鼠随机分为4组：空白组、模型组、3%牛磺酸组和5%牛磺酸组,每组5只,试验期为15周。空白组小鼠饲喂对照饲粮,模型组饲喂高脂饲粮,其余两组在模型组饲粮的基础上分别添加3%、5%的牛磺酸。试验结束前2周分别进行口服葡萄糖耐受实验（OGTT）和胰岛素耐受实验（ITT）。试验结束后乙醚麻醉眼球取血,采用颈椎脱臼法处死小鼠,采集肝脏、肾脏、脾脏、附睾脂肪组织并称重,计算脏器/脂肪系数。测定血清中各项生化指标及瘦素（LEP）、脂联素（ADPN）含量,以及肝脏中甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）的含量,采用油红O染色和苏木精-伊红（HE）染色分别观察肝脏脂滴分布和脂肪组织形态变化。【结果】①与空白组相比,模型组小鼠体重极显著增加（P<0.01）,血糖（GLU）及血脂指标出现异常,葡萄糖耐受和胰岛素耐受的曲线下面积极显著升高（P<0.01）,符合肥胖模型的特征。②与模型组相比,添加牛磺酸后小鼠总增重、肝脏系数和脂肪系数均极显著降低（P<0.01）;血清中丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）活性及低密度脂蛋白（LDL）含量极显著升高（P<0.01）,GLU含量显著下降（P<0.05）;肝脏中TG和TC含量极显著下降（P<0.01）,ADPN含量极显著升高（P<0.01）;葡萄糖耐受和胰岛素耐受的曲线下面积均极显著降低（P<0.01）;肝脏中的脂滴数量减少,脂肪细胞的细胞截面积极显著减小（P<0.01）,细胞数量极显著增多（P<0.01）,脂肪细胞分布较均匀。【结论】牛磺酸可通过调节高脂饮食诱导的肥胖小鼠糖脂代谢水平,改善其肝脏及脂肪的组织病理形态,可能对肝脏具有保护作用。     

低蛋白日粮补充天冬氨酸对断奶至育肥阶段猪生长性能及肉品质性状的影响

旨在研究低蛋白日粮补充天冬氨酸对断奶至育肥阶段猪生长性能、血液生化指标和游离氨基酸、养分表观消化率以及肉品质性状的影响。选取20头45日龄,体重相近（（10.93±0.79） kg）的健康三元杂交（杜×长×大）断奶仔猪,随机分成两组,每组10个重复,每个重复1头猪,仔猪单栏饲养,试验期84 d。对照组饲喂玉米-豆粕型低蛋白基础日粮,试验组饲喂在基础日粮中添加0.5%天冬氨酸的试验饲粮。结果表明：1）添加天冬氨酸可显著提高猪断奶阶段平均日增重（P<0.05）并极显著降低料重比（P<0.01）,但在育肥和生长阶段对生长性能无显著影响（P>0.05）;2）添加天冬氨酸可显著提高断奶阶段血清白蛋白水平和碱性磷酸酶活性（P<0.05）,但对生长和育肥阶段血液生化指标均无显著影响（P>0.05）;3）添加天冬氨酸可显著降低断奶阶段血清中Pro、Met、Thr、Asp、His、Tyr含量（P<0.05）和提高Lys水平（P<0.01）,生长阶段血清中Asp、Lys含量和育肥阶段Asp、Thr含量显著降低（P<0.05）,对其他氨基酸含量无显著影响（P>0.05）;4）天冬氨酸处理可使育肥猪总能、粗蛋白、粗脂肪、粗灰分、粗纤维表观消化率极显著升高（P<0.01）;5）天冬氨酸处理可有效提高熟肉率（P<0.01）和背最长肌中MyHC1的mRNA表达水平（P<0.05）。综上可知,低蛋白日粮全程添加0.5%天冬氨酸可有效提高猪断奶阶段的生长性能,有利于促进其后期肌纤维的发育和改善其肉品质性状。     

复合益生菌发酵饲料对雪峰乌骨鸡日粮表观消化率及肉品质的影响

本试验旨在研究复合益生菌发酵饲料对雪峰乌骨鸡日粮表观消化率及肉品质的影响。本试验采用单因素试验设计，选用健康、体重相近的17周龄母鸡600只，随机分为5组，每组6个重复，每个重复20只。其中对照组饲喂基础日粮，试验组分别以25%、50%、75%、100%复合益生菌发酵饲料替代基础日粮饲喂，试验期35 d。试验结果表明：①25%、50%发酵料替代组显著提高乌骨鸡对饲料中粗蛋白质（CP）、粗脂肪（EE）表观消化率（P<0.05），75%替代组与对照组差异不显著（P>0.05）。②与对照组相比，75%和100%替代组乌骨鸡屠体率显著增加（P<0.05），25%替代组乌骨鸡胸肌率显著增加（P<0.05），但各试验组腹脂率无显著变化（P>0.05）。③各试验组显著降低胸肌pH_{24 h}及蒸煮损失（P<0.05），显著提高胸肌亮度（L^*）和红度（a^*）（P<0.05），100%替代组滴水损失显著下降（P<0.05）。④50%、75%及100%发酵饲料替代组肌肉DM和CP含量显著升高（P<0.05）；50%、100%发酵饲料替代组显著提高肌肉中蛋氨酸（Met）、苯丙氨酸（Phe）、丝氨酸（Ser）、精氨酸（Arg）含量（P<0.05）。结果提示，在本试验条件下，所用复合益生菌发酵饲料能提高日粮养分表观消化率、改善肉品质，但添加比例与效果相关性不明显，以100%替代组效果最佳。     

高脂日粮对小鼠不同部位脂肪沉积及血液生化指标的影响

为了研究高脂日粮对小鼠脂肪沉积及血液生化指标的影响,选取3周龄C57BL/6J小鼠12只,随机分为高脂日粮组和低脂日粮组(对照组),每组6只。饲喂11 w后,测体重、采食量并采集血样和不同部位脂肪组织及肝脏。采用冰冻切片HE染色方法检测脂肪细胞的充脂情况。结果显示,高脂日粮组与对照组相比,体重极显著增加(P0.01),腹股沟脂肪和附睾脂肪重量显著增加(P0.05),脂肪细胞明显增大,脂解基因和产热基因表达显著降低(P0.05),血液中T-chol和HDL-c含量显著升高(P0.05),ALT与AST水平显著降低(P0.05),但AST/ALT比值偏高。以上结果表明,高脂日粮引起的肥胖是由于脂肪细胞肥大、产热基因和脂解基因表达降低以及不同部位脂肪沉积增多造成的,并且易引起肝脏炎症。     

日粮中添加双氢青蒿素对宫内发育迟缓断奶仔猪胰岛素水平和肝发育的影响

旨在研究宫内发育迟缓（IUGR）对断奶仔猪胰岛素水平和肝发育的影响,以及日粮添加80 mg·kg^-1双氢青蒿素（DHA）对其修复作用。本试验选取10头正常出生重（NBW）仔猪和20头IUGR仔猪,分为NBW组、IUGR组和IUGR-DHA组,每组10头仔猪。NBW组和IUGR组饲喂基础日粮,IUGR-DHA组饲喂基础日粮+80 mg·kg^-1 DHA。所有仔猪21日龄断奶后饲喂相应日粮至49日龄,试验期为29天。结果显示,与NBW组相比,IUGR组显著降低了血清空腹葡萄糖（FBG）和胰岛素生长因子1（IGF-1）含量以及肝重量（P<0.05）,显著提高了空腹胰岛素（FINS）含量和胰岛素抵抗（HOMA-IR）指数以及肝脏指数（P<0.05）。同时,IUGR组断奶仔猪肝组织形态结构受损,出现明显的空泡化,细胞器结构受损,线粒体和内质网明显肿胀,细胞核严重变形。与IUGR组相比,IUGR-DHA组显著升高了肝重量和IGF-1含量（P<0.05）,显著降低了血清FINS含量和HOMA-IR指数,且肝组织形态结构得到明显改善。与NBW组相比,IUGR断奶仔猪显著下调了肝中IGF1、胰岛素受体底物1（IRS1）、磷脂酰肌醇-3激酶（PI3K）和蛋白激酶B（AKT2）的mRNA相对表达量（P<0.05）。与IUGR组相比,IUGR-DHA组显著上调了断奶仔猪肝中IRS1和AKT2的mRNA相对表达量（P<0.05）。结果表明：DHA对IUGR导致的断奶仔猪胰岛素抵抗以及肝发育受损具有一定的修复作用。本研究为畜牧生产中对IUGR的早期治疗以及DHA的推广应用提供了一定的理论依据。     

日粮中添加苜蓿草粉对肉鹅生长性能及肉质性状的影响

试验旨在研究日粮中添加不同比例的苜蓿草粉对四季鹅生长性能、体尺、屠宰性能、器官指数和肉质性状的影响。选取健康、体重相近的15日龄四季鹅256只（公母各半）,随机分成4组,对照组饲喂玉米-豆粕型基础日粮,3个试验组分别添加10%、20%和30%苜蓿草粉。每组4个重复,每个重复16只鹅。饲养至70日龄时,测量其各项体尺指标,每个重复选取4只鹅屠宰取样,测定屠宰性能、器官指数及肉质性质。结果表明：与对照组相比,日粮中添加不同比例的苜蓿草粉对四季鹅的平均日采食量、平均日增重、料重比、体斜长、龙骨长、胫围、半潜水长、胸宽、胫长、屠宰率、半净膛率、胸肌率等均无显著影响（P>0.05）,添加20%和30%苜蓿草粉显著提高了鹅的胸深（P<0.05）,添加30%苜蓿草粉显著降低了鹅的全净膛率（P<0.05）,添加10%苜蓿草粉显著提高了腿肌率（P<0.05）。此外,与对照组相比,苜蓿草粉组腹脂率均显著降低（P<0.05）,肝脏指数、空肠指数、回肠指数以及盲肠指数均显著提高（P<0.05）,但胸肌、腿肌的滴水损失同时也提高了（P<0.05）;10%、30%苜蓿草粉组十二指肠指数均显著提高P<0.05）。综上所述,在日粮中添加苜蓿草粉可改善四季鹅的屠宰性能（增加胸深、提高腿肌率、降低腹脂率）,提高器官指数（肝脏指数、十二指肠指数、空肠指数、回肠指数以及盲肠指数）,但会提高胸肌和腿肌的滴水损失;且添加过多的苜蓿草粉（30%）还会显著降低全净膛率。综合考虑,四季鹅日粮中以添加10%苜蓿草粉为宜。     

日粮粗蛋白质水平对伊犁鹅产蛋规律、繁殖激素分泌及相关基因mRNA表达的影响

为探讨日粮粗蛋白质水平对伊犁鹅的产蛋规律、繁殖激素分泌及生殖轴相关基因mRNA表达量的影响,本研究随机选取200只3岁伊犁鹅（年龄、饲养管理水平一致及体重相近）,随机分为4个组,每组10个重复。对照组及公鹅饲喂鹅场自配料（粗蛋白质水平11.20%）,试验组母鹅分别饲喂粗蛋白质水平为13.86%、15.20%和16.48%的日粮,其余营养指标基本一致。预试期1周,正试期9周。结果表明：①试验期内伊犁鹅的产蛋率呈波动变化,对照组伊犁鹅的产蛋率在第1~2周逐渐上升,第4~5周出现小幅度增长,其余阶段表现为下滑趋势;各试验组伊犁鹅的产蛋率在第1~2、4~5周出现较大幅度增长,且在第5周时达到产蛋高峰,此后逐渐下滑。15.20%粗蛋白质组伊犁鹅就巢率显著低于11.20%、13.86%粗蛋白质组。②与对照组相比,13.86%粗蛋白质组血清促性腺激素释放激素（GnRH）浓度极显著升高（P<0.01）,且血清雌二醇（E₂）、促黄体素（LH）浓度均显著升高（P<0.05）;15.20%、16.48%粗蛋白质组血清GnRH、E₂及LH浓度均极显著升高（P<0.01）,且血清促卵泡素（FSH）浓度显著升高（P<0.05）。各试验组血清催乳素（PRL）浓度均显著降低（P<0.05）。③与对照组相比,15.20%粗蛋白质组下丘脑GnRH、LHR基因表达量显著上调（P<0.05）,PRL、PRLR基因表达量显著下调（P<0.05）;垂体中LH基因表达量显著上调（P<0.05）;卵巢中LH与ESR2基因表达量显著或极显著上调（P<0.05,P<0.01）。综上所述,基于日粮粗蛋白质水平对伊犁鹅的产蛋率、就巢率、血清生殖激素浓度及生殖轴相关基因mRNA相对表达量影响的综合评估,建议产蛋期伊犁鹅日粮粗蛋白质水平为15.20%。     

WIP1基因对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响及其在小鼠不同生长阶段的表达

【目的】探究野生型p53诱导磷酸酶1(WIP1)基因与脂肪细胞增殖和分化的关系,以期为猪优质性状育种提供新基因素材。【方法】利用脂质体转染方法将合成的WIP1基因的3对siRNAs (WIP1-790、WIP1-893和WIP1-1845)和阴性对照NC-siRNA分别转染3T3-L1前脂肪细胞,通过实时荧光定量PCR检测WIP1基因的表达水平,比较不同siRNA的干扰效率。然后利用筛选到的干扰效率最高的siRNA敲减WIP1基因在3T3-L1前脂肪细胞中的表达,通过CCK-8检测siRNA敲减细胞和NC-siRNA细胞不同生长时期(0、12、24、48、72、96和120 h)的增殖情况,并通过实时荧光定量PCR检测上述2种细胞24和48 h的细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)和Cyclin D1的表达水平。对干扰效率最高的siRNA和NC-siRNA组3T3-L1前脂肪细胞进行成脂诱导分化,通过油红O染色和甘油三酯定量法评估成脂分化效率,利用实时荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)的表达水平,Western blotting法检测PPARγ蛋白的表达水平;通过实时荧光定量PCR检测WIP1基因在21日龄、8周龄和6月龄小鼠腹股沟皮下脂肪组织和性腺脂肪组织的时空表达情况。【结果】基因干扰试验结果显示,3对siRNAs对WIP1基因的表达均具有极显著的干扰作用(P＜0.01),其中WIP1-790的干扰效率最高,达到了70%以上。CCK-8检测结果显示,与NC-siRNA组相比,WIP1-790干扰组细胞的增殖速率在各生长时期均极显著降低(P＜0.01),且细胞周期基因Cyclin B1和Cyclin D1的表达量在24和48 h均极显著下调(P＜0.01)。成脂诱导分化结果显示,与NC-siRNA组相比,WIP1-790干扰组细胞在成脂分化第8天油红O染色阳性细胞明显减少,脂滴含量极显著降低(P＜0.01),甘油三酯含量显著降低(P＜0.05);PPARγ、C/EBPα、FABP4、SCD1等标记基因mRNA表达水平均极显著降低(P＜0.01),PPARγ蛋白表达水平极显著降低(P＜0.01)。WIP1基因在8周龄和6月龄小鼠的腹股沟皮下脂肪组织中的表达量分别显著或极显著高于21日龄小鼠(P＜0.05;P＜0.01),且在6月龄小鼠的性腺脂肪组织中,WIP1基因的表达量极显著高于21日龄和8周龄的小鼠(P＜0.01)。【结论】WIP1基因通过调控Cyclin B1、Cyclin D1和PPARγ等细胞周期和成脂分化相关基因的表达影响3T3-L1细胞的增殖和分化,且参与小鼠脂肪沉积过程,结果可为深入解析WIP1基因调控脂肪发生的分子机制提供参考。     

两个呼伦贝尔羊品系不同部位脂肪细胞形态及脂肪代谢相关基因表达差异分析

试验旨在探讨呼伦贝尔羊巴尔虎品系（半椭圆状尾）和短尾品系（小桃状尾）脂肪沉积差异的分子机制。随机选择处于相同饲养管理条件下5月龄呼伦贝尔母羊21只（其中巴尔虎品系11只、短尾品系10只）,测量其体尺、尾型和胴体重指标。组织切片观察8个部位脂肪细胞的形态,测定脂肪组织甘油三酯（TG）含量,并进一步用实时荧光定量PCR检测脂肪代谢相关基因在不同脂肪组织中的表达差异。结果显示,同月龄两品系羊胴体重、体尺及尾型指标差异显著或极显著（P<0.05;P<0.01）。虽然两品系羊同一部位的脂肪细胞形态基本一致,但巴尔虎品系尾部脂肪细胞面积和体积均大于短尾品系（P<0.01）,并且皮下、网膜和尾部脂肪组织中的TG含量在两品系羊间差异显著或极显著（P<0.05;P<0.01）。ATGL、PPARγ、C/EBPα和SREBP 4个脂代谢相关基因在巴尔虎品系个体中的mRNA水平均显著或极显著高于短尾品系（P<0.05;P<0.01）;巴尔虎品系中ATGL和SREBP基因的表达与TG含量分别呈显著负相关和正相关（r=-0.965、0.972）。综上所述,两个呼伦贝尔羊品系在生长和脂肪代谢等方面存在较大差异。本研究结果可为进一步深入解析绵羊脂尾形成的分子机制提供理论依据。     

甜菜碱对瘦素缺陷小鼠肌肉组织中脂质沉积的影响初探

为探究甜菜碱对瘦素缺陷（ob/ob）小鼠肌肉组织中脂质沉积的影响和潜在机制，本研究将12只同批次6周龄雄性、健康、体重差异不超过1 g的ob/ob小鼠随机均分为两组，分别作为试验组和对照组。其中对照组小鼠饮用纯净水，试验组小鼠饮用的纯净水中含1%甜菜碱。1个月后脱颈处死，采集肌肉样本，利用油红O染色、甘油三酯含量测定检测ob/ob小鼠肌肉组织中脂质沉积情况；利用气象色谱-质谱联用系统分析肌肉组织中脂肪酸组成及含量；利用qRT-PCR方法检测肌肉组织中基因表达的变化。结果显示：与对照组相比，1）补饲甜菜碱后ob/ob小鼠的体重增加量、肌肉组织中脂质沉积、禁饲血糖水平显著降低（P<0.05）；2）补饲甜菜碱后，ob/ob小鼠肌肉中脂肪甘油三酯脂肪酶（adipose triacylglyceride lipase，ATGL）、激素敏感性甘油三酯脂肪酶（hormone-sensitive lipase，HSL）以及葡萄糖转运蛋白4（glucose transpoter 4，GLUT4）基因的表达量极显著升高（P<0.01）；3）补饲甜菜碱后，ob/ob小鼠肌肉中饱和脂肪酸（saturated fatty acids，SFA）和多不饱和脂肪酸（polyunsaturated fatty acids，PUFA）含量显著升高（P<0.05）；4）补饲甜菜碱后，ob/ob小鼠肌肉中脂肪酸合成基因：脂肪酸合成酶（fatty acid synthetase，FAS）表达量显著降低（P<0.05），乙酰辅酶A合成酶（acetyl-CoA synthetase，ACS）表达量无显著性变化（P>0.05）；脂肪酸氧化基因：过氧化物酶体增殖物激活受体α（peroxisome proliferator activated receptor alpha，PPARα）、酰基辅酶A氧化酶（acyl-CoA oxidase2，ACOX2）、长链酰基辅酶A脱氢酶（long chain acyl-CoA dehydrogenase，ACADL）、脂肪酸转位酶（fatty acid transposase， CD36）表达量极显著升高（P<0.01）。结果表明，ob/ob小鼠补饲甜菜碱后，肌肉组织脂肪酸合成基因表达降低、脂肪酸氧化基因表达升高，同时肌肉组织脂肪酸含量发生改变，最终导致肌肉组织脂质减少。     

地菍粗多糖对高脂饮食诱导肥胖小鼠脂代谢的影响

[目的] 研究地菍粗多糖对高脂饮食诱导肥胖小鼠脂代谢的影响。[方法] 将小鼠随机分为6组：空白组、模型组、阳性组（0.025 mg/g奥利司他）及高、中、低剂量地菍粗多糖（1.2、0.6和0.3 mg/g）处理组,每组12只。空白组小鼠喂食普通维持饲料,其余各组小鼠喂食高脂饲料,空白组、模型组给予生理盐水,阳性组给予0.025 mg/g奥利司他,高、中、低剂量地菍粗多糖组分别给予1.2、0.6和0.3 mg/g地菍粗多糖,每天灌胃1次,连续给药30 d。给药结束,称量小鼠体重、附睾及肾脏周围脂肪和肝脏组织的重量;HE染色法观察脂肪和肝脏病理变化;生化法检测血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL-C）、高密度脂蛋白（HDL-C）含量及肝脏TC、TG含量;实时荧光定量PCR法测定肝脏中乙酰辅酶A羧化酶1（ACC1）基因相对表达量。[结果] 与模型组相比,高、中剂量地菍粗多糖组小鼠体重、Lee's指数、摄食量、肝脏及附睾和肾脏周围脂肪的重量均显著降低（P<0.05）,低剂量地菍粗多糖组小鼠体重、脂肪重量均无显著变化（P>0.05）,阳性组小鼠摄食量、肝脏重量均无显著变化（P>0.05）;阳性组、高剂量地菍粗多糖组小鼠的脂肪指数均显著降低（P<0.05）;阳性组、高剂量地菍粗多糖组小鼠血清TC、TG、LDL-C及肝脏TC、TG含量均显著降低（P<0.05）,血清HDL-C含量差异不显著（P>0.05）;中剂量地菍粗多糖组小鼠血清TC、TG及肝脏TC含量均显著降低（P<0.05）。阳性组及高、中、低剂量地菍粗多糖组小鼠脂肪细胞均不同程度变小,肝细胞内脂滴小空泡明显减少,且ACC1基因的相对表达量均显著下调（P<0.05）,分别降低了20%、42%、15%和11%。[结论] 地菍粗多糖可通过调节高脂饮食诱导肥胖小鼠的脂代谢水平,从而干预肥胖的发生。     

Glut4突变调控脂肪重分布及肌纤维重塑的机制研究

旨在探讨Glut4基因突变后骨骼肌能量代谢及肌纤维转化的分子机制。本研究利用CRISPR/Cas9技术构建Glut4^Q177L突变鼠。选取22周龄健康的野生雄鼠和Glut4^Q177L突变雄鼠,即试验分为两组,每组3只,3个重复,进行表型评价和糖耐量、胰岛素耐量试验;荧光定量检测两组小鼠腓肠肌葡萄糖转运蛋白、脂代谢、肌纤维类型相关调控基因的表达差异;Western blot测定腓肠肌AMPK及其磷酸化蛋白含量。结果表明,突变鼠皮下脂肪和附睾脂重量显著低于对照组（P<0.05）;突变鼠糖耐量曲线下面积极显著增加（P<0.01）,表明其糖耐量受损;突变鼠血清中甘油三酯的含量显著下降（P<0.05）。相较于野生型小鼠,Glut4^Q177L突变鼠腓肠肌中Glut4、Glut1和Glut12等多个葡萄糖转运蛋白表达量显著升高（P<0.05）;葡萄糖摄取受限导致调控能量代谢关键基因AMPK在mRNA、蛋白和磷酸化修饰水平均显著升高（P<0.05）,同时促进与脂肪酸摄取与合成代谢相关的CD36和ATGL等基因表达上调（P<0.05）;慢速氧化型肌纤维（I型）和快速氧化型肌纤维（IIa型）相关基因表达极显著升高（P<0.01）,而快速酵解型纤维（IIb型）相关基因表达显著降低（P<0.05）。本研究结果显示,Glut4葡萄糖结合关键位点突变降低了骨骼肌和脂肪葡萄糖摄取能力,通过上调其它转运蛋白增加葡萄糖摄取;激活AMPK信号通路及分泌肌细胞因子调控脂肪分解以满足能量需求;促进线粒体丰富的氧化型肌纤维生成以提高能量利用效率。Glut4突变不仅可以为骨骼肌胰岛素抵抗提供有效的动物模型,还可以为家畜生物育种提供基因编辑参考位点。     

营养限饲与补偿对蒙古羔羊体重、血清生化指标及胸脂脂肪因子基因表达的影响

试验旨在研究早期营养限饲与后期快速补偿对蒙古羔羊体重、血清生化指标及胸脂脂肪因子基因表达的影响。选用30只4月龄健康蒙古公羔羊,随机分为对照组(20.26 kg±3.63 kg)与限制组(21.29 kg±3.00 kg)。对照组羔羊自由采食,限制组羔羊维持水平饲养,限制期60 d,限制饲养结束后立刻进入60 d补偿期,补偿期两组饲喂相同日粮。于试验第30、60、90和120天从各组试验羊颈静脉采血,用试剂盒检测血清中甘油三酯(TG)、非酯化脂肪酸(NEFA)、总胆固醇(TC)浓度;并在限制和补偿末期屠宰羔羊,采集胸部脂肪组织,实时荧光定量PCR检测脂联素(Adiponectin)、内脂素(Visfatin)、过氧化物酶增殖物激活受体γ (PPAR-γ)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)基因表达量。结果表明:①限制期,限制组羔羊体重保持维持水平而对照组羔羊体重呈升高趋势;补偿期,限制组羔羊平均日增重显著高于对照组(P< 0.05)。②限制期,限制组羔羊血清中TG浓度在第30和60天时显著低于对照组(P< 0.05),而NEFA在第30天时显著高于对照组(P< 0.05);补偿期,限制组TC浓度在第90天时显著低于对照组(P< 0.05),而TG与NEFA两组间均无显著差异(P >0.05)。③限制期,限制组羔羊胸脂PPAR-γ和ACC基因表达量显著低于对照组(P< 0.05),补偿期两组间无显著差异(P >0.05)。限制期和补偿期两组羔羊胸脂Adiponectin和Visfatin基因表达均无显著变化(P >0.05)。由此可知,营养限制时胸脂脂肪合成与脂肪细胞分化能力减弱,脂肪组织水解动员参与机体能量代谢,补偿时总胆固醇参与机体恢复生长。补偿期限制组羔羊快速增重,但ACC与PPAR-γ基因显著低于对照组。早期的生长限制与后期的补偿生长对羔羊胸脂Adiponectin与Visfatin无显著影响。     

笼养密度对雪山鸡生产性能及盲肠微生物的影响

旨在探索笼养密度对雪山鸡生产性能、肉品质、福利指标及盲肠微生物的影响。本研究选用6周龄体重相近的健康雪山鸡母鸡180只,按单因素试验要求,设置高、中、低3组饲养密度进行后期笼养试验,每笼分别饲养4只、3只及2只,以此作为1个重复,每组20个重复,饲养至上市15周龄,屠宰,测定生产性能、屠宰性能及肉品质,并进行羽毛和步态评分、检测盲肠微生物菌群组成。结果表明：1）从11周龄到上市15周龄,低、中密度组雪山鸡体重显著高于高密度组（P<0.05）,15周龄腹脂重和腹脂率,低密度组显著高于中密度组（P<0.05）,且中密度组显著高于高密度组（P<0.05）,其余屠宰性能指标差异均不显著（P>0.05）。2）中、低密度组鸡只羽毛质量显著好于高密度组（P<0.05）,此外,高、中、低密度组的雪山鸡步态评分差异不显著（P>0.05）。3）雪山鸡盲肠内容物均以Firmicutes（厚壁菌门）、Proteobacteria（变形菌门）、Bacteroidetes（拟杆菌门）的菌群为主。3种饲养密度菌群差异不显著（P>0.05）,但中密度饲养模式下肉鸡盲肠内容物中特有OTUs较少,相对于高密度盲肠微生物区系而言,中、低密度盲肠微生物群落更趋于相近,有些差异菌群可能与体重及腹脂沉积相关,如Blautia菌属等。综合看来,对于雪山鸡而言,考虑采用中密度饲养模式能够获得较好的生产性能。     

罗汉果皂苷对肥胖小鼠脂代谢的改善作用研究

【目的】 探讨罗汉果皂苷改善高脂喂养诱发肥胖的小鼠脂代谢异常的作用,并探讨其作用机制。【方法】 选取健康雄性昆明小鼠60只,以高脂饲料喂养4周后,随机分为6组：空白组、模型组、辛伐他汀组,以及罗汉果皂苷高（200 mg/（kg·d））、中（100 mg/（kg·d））、低（50 mg/（kg·d））剂量组,连续灌胃给药4周,同时维持高脂喂养。给药完成后,称量各组小鼠体重及脂肪组织重量,计算脂肪系数;检测小鼠血清和肝脏组织甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）及低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）的含量,以及血清载脂蛋白A1（ApoA1）和载脂蛋白B （ApoB）含量,并测定肝脏中脂蛋白脂肪酶（LPL）和肝酯酶（HL）的活性。【结果】 与空白组相比,模型组小鼠体重、脂肪重量及脂肪系数均极显著升高（P<0.01）。与模型组相比,罗汉果皂苷高、中剂量组小鼠的脂肪重量及脂肪系数均显著降低（P<0.05）;高剂量罗汉果皂苷显著或极显著降低了小鼠血清及肝脏TC、LDL-C含量（P<0.05;P<0.01）,极显著升高了血清HDL-C含量（P<0.01）;高、中剂量罗汉果皂苷极显著降低了血清ApoB含量（P<0.01）,极显著或显著升高了小鼠肝脏LPL和HL的活性（P<0.01;P<0.05）。【结论】 罗汉果皂苷能预防高脂饲料诱导的肥胖小鼠血脂、肝脂和体脂的增加,其可能的作用机制是通过影响ApoB的合成及HL、LPL的活性。研究结果为将罗汉果皂苷开发为新的减肥降脂产品提供了依据。     

Effect of Nutrient Restriction and Compensation on Weight,Serum Indexes and Gene Expression of Chest Fat Adipokines in Mongolian Lamb

To study the effect of nutrient restriction and compensation on weight,serum indexes and gene expression of chest fat adipokine in Mongolian lamb,thirty male lambs were randomly divided into control group (20.26 kg± 3.63 kg) and feed restricted group (21.29 kg±3.00 kg).The experiment lasted for 120 days,including 60 days for feed restriction and 60 days for compensatory feed.At the end of each stage,five lambs from each group were slaughtered and chest fat was collected.Serum concentration of triglycerides,non-esterified fatty acids (NEFA),total cholesterol were measured.Quantitative Real-time PCR were used to determine Adiponectin,Visfatin,PPAR-γ and ACC genes expression.The results showed that:①The lamb body weight of restricted group kept maintain level and that of control group showed a increase tendency.During the compensatory period,the average daily gain (ADG) of restricted group was significantly higher than control group (P< 0.05).②During the restriction period,serum triglycerides concentration of lambs in restricted group was significantly decreased at day 30 and 60 (P< 0.05),and NEFA concentration was significantly increased at day 30 (P< 0.05).After 60 days of nutritional compensation,all serum parameters we tested were not significantly different between restrict group and control group (P >0.05).③During the restriction period,PPAR-γ and ACC gene expression in restricted group were significantly lower than that of control group (P< 0.05),while no significant differences were found during the compensation period (P>0.05).Adiponectin and Visfatin genes expression in chest fat was not significantly changed throughout the experiment (P >0.05).We could know that nutritional restriction reduced fatty acid synthesis and adipocyte differentiation ability,adipose tissue was mobilized energy metabolism,and total cholesterol was recoveried growth on the compensation.However,the ACC and PPAR-γ genes in restricted group were significantly decreased with the body weight increased rapidly during the compensatory stage.Adiponectin and Visfatin were not significantly different between restricted and compensatory stages.