山羊TNNT3基因可变剪切及其对骨骼肌细胞分化的作用

【目的】快速骨骼肌肌钙蛋白T（fast skeletal troponin T3,TNNT3）作为肌钙蛋白(troponin, Tn)家族成员,调节横纹肌收缩、参与骨骼肌的生长发育并影响家畜肉质性状。通过获得山羊TNNT3基因的可变剪切体,分析山羊TNNT3基因可变剪切的表达模式及其在肌细胞分化中的作用,深入解析TNNT3基因在山羊骨骼肌生长发育过程中的作用机制。【方法】基于NCBI已公布山羊TNNT3基因（NM_001314210.1）和牛TNNT3基因（XM_010821200）mRNA序列,使用软件Primer Premier 6.0设计引物,以简州大耳羊胚胎期和出生后7个阶段骨骼肌为试验材料,克隆测序获得山羊TNNT3基因的CDS区可变剪切体,利用软件ORF Finder、EditSeq、DNAMAN、ClustalW和MEGA_X_10.1.8等对序列进行生物信息学分析;进一步设计实时荧光定量（real-time PCR,RT-qPCR）及半定量引物,研究TNNT3基因剪切体在7个不同组织（背最长肌（longissimus dorsi muscle,LD）、半膜肌（semimembranosus muscle,SM）、心、肝、脾、肺、肾）和7个发育阶段（胚胎期E75、E90、E105和出生后B3、B45、B150、B300）肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中表达模式;此外,对转录本TNNT3_3进行体外编码能力检测确定其具有编码蛋白的能力,并在山羊骨骼肌卫星细胞（skeletal muscle satellite cells,MuSCs）中过表达,观察细胞形态变化以及检测标志基因的表达变化,研究其对山羊MuSCs分化的作用。【结果】①TNNT3（NM_001314210.1）CDS区全序列主要含有18个外显子,其中外显子16/17相互排斥,转录后单一表达。克隆发现山羊TNNT3基因 5个新转录本（TNNT3_1—5）,其外显子数分别是15、15、20、16、14。②生物信息学分析结果显示山羊TNNT3基因核苷酸序列和氨基酸序列与绵羊、牛、猪等哺乳动物具有很高的一致性,而与鱼类和爬行类动物的一致性较低,说明TNNT3基因序列在哺乳动物高度保守。③TNNT3 mRNA在背最长肌、半膜肌、心、肝、脾、肺、肾7个组织中都有表达,其中在骨骼肌中高度富集(P < 0.01),心脏及肺次之,其余组织中较低;TNNT3 mRNA在背最长肌和半膜肌中的表达始终处于一个动态变化中,胚胎期TNNT3在半膜肌的表达量高于背最长肌（P<0.05）;出生后则背最长肌中高于半膜肌（P<0.05）。④山羊TNNT3基因转录本TNNT3_3重复出现保守的外显子9—11（138bp）,体外翻译实验显示其可编码蛋白且蛋白大小与预期基本相符（37 kD）;相较于对照组,在山羊MuSCs中过表达该转录本使肌分化标志基因Myomaker、MyoG和MyH4 mRNA极显著升高(P < 0.01)。【结论】获得了山羊TNNT3基因具有完整CDS区5个新可变剪切体,TNNT3主要在肌肉组织（背最长肌和半膜肌）中高表达,在哺乳动物中高度保守且促进成肌分化。初步表明TNNT3基因在动物肌肉生长发育中具有重要的生物学功能。     

阿旺绵羊种质特性研究

文章对阿旺绵羊的种质特性进行了研究。结果表明:阿旺绵羊初生公羔重3.72 kg,母羔重3.54 kg;断奶(100日龄)公羔重20.75 kg,母羔重20.24 kg;6月龄公羔重31.56 kg,母羔重30.86 kg;1.5岁公羊重55.96 kg,母羊重53.44 kg;成年公羊重73.65 kg,母羊重62.13 kg。哺乳期日增重:公羔170.30 g、母羔167.00 g;断奶至6月龄日增重:公羔135.13 g,母羔132.75 g;6月龄至8月龄日增重:公羔142.83 g,母羔136.50 g。产羔率、成活率分别为91.14%、91.33%。6月龄、1.5岁、成年羯羊胴体重分别为15.04、29.72和35.90 kg,屠宰率分别为50.05%、51.61%、52.03%,胴体GR值在9.8～14.2 mm之间。育成(周岁)公羊剪毛量0.50 kg、育成母羊0.51 kg,被毛净毛率85.68%,毛辫自然长度8～18 cm,羊毛细度支数36～66支,纤维类型属异质毛,是理想的地毯毛。     

南江黄羊LHβ基因序列多态性与产羔数的相关分析

根据GenBank中公布的牛、绵羊、猪等动物LHβ基因序列设计引物,采用PCR扩增并以SphⅠ酶切分析了南江黄羊(246只)LHβ基因部分序列,比较了不同基因型的繁殖性能。检测到2个等位基因A和B构成3种基因型:AA(4.065%),AB(44.309%),BB(51.626%),不同基因型由第401位三碱基突变(G→A或C)引起。在各基因型间,南江黄羊1~5胎的初生窝重和产羔数差异不显著(P>0.05),但从第2胎开始AA型母羊的产羔数和窝重有增加的趋势。     

简州大耳羊产肉性能世代选育进展及肉品质研究

应用简州（阳）大耳羊培育过程中的基础数据,分析研究了其在培育过程中的产肉性能和新品种肉质品质.结果显示：四世代成年公羊、周岁阉羊、成年母羊的宰前活重分别达73.12 kg±0.98kg、45.55 kg±0.93 kg、50.62 kg±0.53 kg,分别比一世代增加了2.63、2.72和2.56 kg.产肉性能指标在培育过程中稳定增长,世代进展明显,二、三、四世代产肉性能均较上一世代有明显提高.肉品质方面,简州（阳）大耳羊6月龄羔羊肉pH值6.59,熟肉率59.87％～61.87％,滴水损失2.01％～2.72％,干物质中必需氨基酸含量43.66％,粗蛋白含量21.08％,粗脂肪含量1.22％,胆固醇含量47.62 mg/100 g;脂肪酸中油酸含量38.53％、亚油酸含量4.42％、棕榈酸含量18.71％.表明简州（阳）大耳羊羔羊肉肉质优良,胆固醇含量低,富含人体所必需的各种氨基酸和脂肪酸,是高档肉类产品.     

羔羊培育的技术措施

羔羊的培育包括先天培育和后天培育。羔羊出生后,体质较弱,适应能力较差,抵抗力低,容易发病死亡。因此,根据羔羊的消化生理特点和生物学特性,抓好初乳期、常乳期羔羊的培育护理工作和疾病防治,减少断奶应激,是减少羔羊发病死亡、提高成活率的关键。     

凉山半细毛羊种质特性的研究

对凉山半细毛羊的产毛、产肉性能、繁殖性能、生长发育、生理生化性状、血液蛋白多态性和染色体核型作了全面的介绍。凉山半细毛羊成年公羊体重 85 2 5± 3 2 5kg、母羊 4 8 11± 4 13kg ;剪毛量分别为 6 5 5± 0 12kg和4 12± 0 32kg ;毛长分别为 18 12± 0 5 1cm和 15 74± 0 2 1cm ;羊毛主体细度 4 8～ 5 0支。 6月龄肥羔胴体重16 83± 0 76kg ,屠宰率为 5 0 79%。母羊初配年龄为 10～ 12月龄 ,平均产羔率为 111 36 %。染色体数目 2n =5 4。在长期的精心选育和当地生态条件的影响下 ,凉山半细毛羊的生理生化性状产生了不同程度的变化 ,以适应凉山地区的生态条件     

南江黄羊群体遗传结构分析

测定了南江黄羊4个品系(类群)14个个体进行的mtDNA控制区全序列,序列分析表明南江黄羊线粒体DNA控制区全序列长度为1,212 bp或1,213 bp,A+T含量明显高于G+C含量.其中54个核苷酸位点存在变异(约占4.5%),核苷酸多样度为1.46%±0.14%,这些差异共定义了10种单倍型,单倍型多样性为0.956±0.038.表明南江黄羊群体的遗传变异较丰富,品系(类群)间都存在不同程度的遗传分化.     

波尔山羊杂交后代肉质特性的研究

随机选择相同放牧条件下的 6只波尔山羊与南江黄羊的杂交一代 (BN) ( 3♂、3♀ )以及同龄的南江黄羊 (NN) ( 3♂、3♀ )于 8月龄进行屠宰 ,提取肉样对肌肉品质进行分析。结果表明 ,BN保持了NN肉质细嫩多汁的优点 ,两者肌肉的失水率、系水力、贮存损失、熟肉率、肌肉剪切值和肌纤维直径等物理性状和肌肉的常规化学成分差异不显著 (P >0 .0 5)。通过风味品尝 ,不能辨别两者区别。BN肌肉蛋白质中的氨基酸种类齐全 ,含量丰富 ,赖氨酸、苯丙氨酸和蛋氨酸等人体必需氨基酸的含量还有所提高     

辽宁绒山羊引入高海拔地区适应性的初步研究

藏山羊是我国高寒地区的一个原始地方品种,分布于西藏自治区和四川的甘孜州、阿坝州等地,以盛产开士米(Cashmere)著称。但其体型较小,产绒量较低,经济效益不高。为了提高其产绒性能,1993年5月甘孜州白玉县从陕西省甘泉县引进辽宁绒山羊36只(其中公羊27只,母羊9只),拟对藏山羊进行杂交改良。白玉县地处青藏高原高海拔地区,辽宁绒山羊在当地的适应性是引种成败的关键。因此,对辽宁绒山羊在高海拔地区的适应性的研究,为该品种开展杂交改良的可行性提供科学的依据,具有一定的实践意义。