犬瘟热的诊断与防治

为了证实犬瘟热病诊断最快速的方法，对20例犬瘟热病犬经临床观察、犬瘟热病毒抗原快速检测试纸检测、试剂盒诊断等方法进行比较诊断研究。临床表现为呼吸型、胃肠型和神经型，犬瘟热病毒抗原快速检测试纸诊断阳性率高，犬瘟热试纸盒诊断阳性率较低。这就证实了应用犬瘟热病毒抗原快速检测试纸是一种快速、简便、准确的诊断方法。并且经治疗试验，探索出治疗各型犬瘟热的系统疗法。     

犬瘟热荧光抗体技术的应用研究

用硫酸铵盐析法和蔗糖梯度离心法，从犬瘟热病毒人工感染犬的肝，脾中浓度提纯犬瘟热病毒，以其免疫家兔，制备兔抗犬瘟热病毒免疫血清，再经硫酸铵沉淀与ＱＡＥ－葡聚糖凝胶Ａ５０层析提取ＩｇＧ，于４℃低速搅拌标记异硫氰酸荧光素，制成兔抗犬瘟热病毒抗原荧光抗体。用上述荧光抗体检测２１只犬瘟热病毒人工感染犬和３５只自然感染犬的１１６份白细胞，抗原阳性１０９份，而健康犬，传染性肝炎犬，犬细小病毒肠炎犬的３７份血液白     

狐源犬瘟热病毒F蛋白B细胞抗原表位基因的克隆表达

为了研究犬瘟热病毒的抗原表位区段,试验以犬瘟热病毒基因组序列为材料,根据预测的F蛋白N端含有抗原指数较高的区域,选择可能含有潜在的B淋巴细胞优势抗原表位的片段,将其连接到原核表达载体pGEX-6p-1上进行B淋巴细胞抗原表位基因的克隆表达。结果表明:该区段能够在原核载体上高效表达。     

犬瘟热病毒间接免疫酶组化检测方法的建立

为对犬瘟热病毒(CDV)进行组织定位检查,本实验利用犬瘟热抗CDV单克隆抗体(MAb),采用间接免疫酶组化法对6只人工感染的比格犬肠组织的病毒抗原进行定位检测。结果表明,利用犬瘟热抗CDV MAb建立的间接免疫酶组化方法具有较高的特异性和灵敏性,可原位检测病犬肠组织中CDV抗原的分布,其抗原的阳性表达主要在小肠绒毛和李氏隐窝的上皮细胞胞浆内,表明CDV主要侵害小肠的粘膜上皮组织。     

犬瘟热病毒N蛋白的B细胞抗原表位预测

将1段犬瘟热病毒N蛋白氨基酸序列（GenBank编号为：AEV77096．1）与GenBank登录的其他氨基酸序列进行比对,分析其同源性;通过DNAStar生物信息学分析软件中的Protean模块及The PredictProteinserver在线蛋白分析工具预测犬瘟热病毒N蛋白的理化性质、二级结构、亲水性、表面可及性、柔韧性、抗原指数、跨膜螺旋、蛋白相互作用位点、蛋白功能位点等特性,并预测其B细胞优势抗原表位。结果显示,犬瘟热病毒N蛋白具有规则的二级结构、亲水性、柔韧性片段多,多处于表面可及性大,抗原指数高,蛋白质相互作用位点区域。潜在的B细胞优势抗原表位为12～18、61～66、243～246、410～415、421～429、434～447、452～456、480～487氨基酸序列。结果表明,本试验预测了犬瘟热病毒N蛋白的B细胞优势抗原表位,为进一步设计犬瘟热病毒的诊断抗原多肽、免疫用抗原多肽和研发血清学检测试剂盒奠定了理论基础。     

急性犬瘟热感染组织脏器的研究

临床中犬瘟热多分为急性和亚急性,3月龄犬多发本病,急性病例和亚急性病例的临床症状和病毒复制的脏器与慢性病例有很大区别。临床上急性病例的病变主要集中在肺脏和淋巴组织,组织病理学可观察到淋巴结炎和多核巨细胞性肺炎。根据免疫组织化学染色结果发现,在犬瘟热急性病例的淋巴结皮质中犬瘟热抗原呈强阳性,且密度很高。而病犬虽然表现出严重的肺炎症状,但在犬的肺脏中犬瘟热病毒抗原阳性反应弱,仅在支气管上皮和少量的巨噬细胞胞浆中观察到。犬瘟热病毒首先在犬的淋巴组织中进行复制、增殖,破坏被膜下淋巴窦和淋巴小节中的T淋巴细胞和B淋巴细胞,影响淋巴组织输出到外周血液循环中的淋巴细胞数量。本研究结果表明,犬瘟热虽然临床上以肺脏病变最严重,但在急性和亚急性病例,犬瘟热病毒主要在淋巴组织的T淋巴细胞、B淋巴细胞和巨噬细胞中增殖,故应以淋巴组织作为犬瘟热病毒的主要分离脏器。     

犬瘟热病毒水貂分离株F1基因的克隆表达

本研究旨在利用基因工程的方法,制备犬瘟热(canine distemper,CD)疾病诊断用抗原。提取犬瘟热病毒基因组,RT-PCR扩增犬瘟热病毒(canine distemper virus,CDV)F1基因序列,克隆并测序。将F1基因定向克隆到原核表达载体pET28a多克隆位点,阳性重组质粒转化到大肠杆菌BL21(DE3)中,IPTG诱导表达。SDS-PAGE和Western blotting鉴定表达产物,并用Ni柱亲和层析纯化目的蛋白。结果显示表达的F1重组蛋白能与犬瘟热标准阳性血清发生反应,具有良好的反应原性,可以作为犬瘟热疾病的诊断用抗原。     

犬瘟热病琼脂扩散诊断方法的建立

本文主要阐述了用鸡胚成纤维细胞培养的犬瘟热弱毒疫苗免疫绵羊制备琼扩抗体，用犬瘟热病貉肝脏制备琼扩抗原，建立了琼脂扩散诊断方法。用于犬瘟热死亡动物的肝、脾脏器病毒抗原检出，并初步检测送检病科１０份，与电镜检查结果比较，阳性符合率８５．７％，阴性符合率７５％，总体符合率为９０％。方法特异性强，敏感性高，操作易行，便于推广应用。     

徐州地区犬瘟热流行病学调查与分析

为了调查当前徐州地区犬瘟热的流行情况,试验采用犬瘟热抗原快速检测试纸法,对2014年间徐州地区3家宠物医院确诊的205例犬瘟热阳性病例进行了分析。结果表明:在徐州地区犬瘟热病例占全年门诊病例总数6.6%,主要发生于2—5月份,2~5月龄幼犬多发,特别是2~3月龄幼犬占49.3%,建议将犬瘟热的首免时间调整至6周龄,每年1月份加强免疫。     

犬瘟热的发病调查与分析

对2011年3月1日至2011年6月10日在某动物医院就诊的357例病犬进行调查与分析。通过犬瘟热ELASA试剂盒进行抗原检测和临床病历卡的统计和分析，研究发病率与犬的年龄、免疫状况、品种、季节性、环境及饲养不当等因素的关系。抗原检测表明：犬瘟热病毒病例占就诊比例的12％。临床检查表明：犬瘟热病犬以结膜炎、呼吸道炎、消化道功能障碍及神经症状为特征。通过对该地区春季犬瘟热病毒病的发病率的调查和分析，分别详细的研究年龄因素、免疫状况、品种因素、季节性对该病的影响和导致这些影响的原因。     

犬瘟热病毒N蛋白的B细胞抗原表位预测

将1段犬瘟热病毒N蛋白氨基酸序列(GenBank编号为:AEV77096.1)与Gen Bank登录的其他氨基酸序列进行比对,分析其同源性;通过DNAStar生物信息学分析软件中的Protean模块及The PredictProtein server在线蛋白分析工具预测犬瘟热病毒N蛋白的理化性质、二级结构、亲水性、表面可及性、柔韧性、抗原指数、跨膜螺旋、蛋白相互作用位点、蛋白功能位点等特性,并预测其B细胞优势抗原表位。结果显示,犬瘟热病毒N蛋白具有规则的二级结构、亲水性、柔韧性片段多,多处于表面可及性大,抗原指数高,蛋白质相互作用位点区域。潜在的B细胞优势抗原表位为12¹8、6118、61⁶6、24366、243²46、410246、410⁴15、421415、421⁴29、434429、434⁴47、452447、452⁴56、480456、480⁴87氨基酸序列。结果表明,本试验预测了犬瘟热病毒N蛋白的B细胞优势抗原表位,为进一步设计犬瘟热病毒的诊断抗原多肽、免疫用抗原多肽和研发血清学检测试剂盒奠定了理论基础。     

犬瘟热琼脂扩散试验方法的建立及初步应用

采用犬瘟热鸡胚成纤维细胞弱毒疫苗免疫绵羊制备琼脂扩散抗体，应用犬瘟热病貉肝脏（电镜检查“＋＋”以上）制备琼脂扩散抗原，建立了琼脂扩散试验方法，用于犬瘟热病死动物肝、脾脏器中病毒抗原成分的检出。检测送检病料１０份，与电镜检查结果比较，阳性符合率为８５．７％（６／７），阴性符合率为７５％（３／４），总体符合率为９０％（９／１０）。本方法特异、敏感，操作简便，易于推广应用。     

狐貉源犬瘟热病毒F蛋白基因的二级结构及其B细胞抗原表位预测

以犬瘟热病毒基因组序列为材料,采用Garnier-Robson、Chou-Farsman和Karplus-Schultz方法预测了其结构蛋白的二级结构,用Kyte-Doolittle方法对结构蛋白的亲水性进行了分析,用Emini方法预测了结构蛋白的表面可及性,以Jameson-Wolf方法预测了蛋白的抗原指数,综合评价了犬瘟热病毒F蛋白的B细胞抗原表位。结果表明:F蛋白N端含有抗原指数较高的区域,提示可能含有潜在的B细胞优势抗原表位。     

ELISA方法检测犬瘟热抗体初探

本实验以细胞培养犬瘟热病毒作为包被抗原,建立了检测犬瘟热病毒血清抗体的间接ELISA方法。该检测方法抗原最佳包被浓度为5μg/mL,血清最佳稀释度为1∶100。阻断实验、敏感性实验等结果表明该方法特异性强、重复性较好,可用于犬瘟热血清抗体的定量和定性检测。     

呼和浩特某宠物门诊犬瘟热的调查研究

对呼和浩特市某宠物门诊2009年7—8月接诊的516例犬病病例进行了分析研究,死亡病例共38例,其中抗原检测犬瘟热病毒阳性病例30例,占78.9%。说明犬瘟热目前仍然是导致犬死亡的主要传染病。研究发现,结膜炎、呼吸道炎、消化功能障碍及神经症状是犬瘟热的主要临床特征。     

犬瘟热临床表现类型调查及其治疗方法

近些年，犬瘟热在本市有蔓延趋势。犬瘟热典型症状为体温升高；进食后呕吐；眼内大量浆液或是脓性液体；伴咳嗽；眼结膜发红、发胀；排便较稀，且肉眼混有血丝；个别犬腹部下面皮肤有脓疱出现，严重的甚至出现抽搐现象。诊治此病，需以流行病学调查为基础，配合犬瘟热病毒抗原检测试纸方法进行确诊。发现确为此类疾病，应立刻注射单克隆抗体，临床治疗效果显著。同时，治疗过程中应根据不同的病情以及发病特征分别治疗。结合相关数据调查，汇总相关临床症状，就有关诊断以及治疗方法进行阐述，以供参考和借鉴。     

犬瘟热临床表现类型调查及其治疗方法

近些年，犬瘟热在本市有蔓延趋势。犬瘟热典型症状为体温升高；进食后呕吐；眼内大量浆液或是脓性液体；伴咳嗽；眼结膜发红、发胀；排便较稀，且肉眼混有血丝；个别犬腹部下面皮肤有脓疱出现，严重的甚至出现抽搐现象。诊治此病，需以流行病学调查为基础，配合犬瘟热病毒抗原检测试纸方法进行确诊。发现确为此类疾病，应立刻注射单克隆抗体，临床治疗效果显著。同时，治疗过程中应根据不同的病情以及发病特征分别治疗。结合相关数据调查，汇总相关临床症状，就有关诊断以及治疗方法进行阐述，以供参考和借鉴。     

犬瘟热预防与控制措施

犬瘟热（Canine distemper）是一种主要危害幼犬的严重犬类疾病。其病原体是犬瘟热病毒。病犬以呈现双相热型、鼻炎、严重的消化道障碍和呼吸道炎症等为特征。 1 病源与传播途径及对象 犬瘟热病毒是副粘病毒科、麻疹病毒属的成员，与该属的麻疹病毒和牛瘟病毒有着密切的抗原关系。本病最重要的传染源是鼻、眼分泌物和尿液。主要传播途径是健康犬与病犬直接接触或通过污染的空气或食物而经呼吸道或消化道感染。同室犬一但有犬瘟发现，     

间接ELISA检测犬瘟热血清抗体方法的建立

以重组表达的犬瘟热病毒融合蛋白(fusion protein,F)作为包被抗原,建立了检测犬瘟热病毒血清抗体的间接ELISA方法。所建立的间接ELISA抗原包被浓度为125ng/孔,血清最佳稀释度为1∶160。经阻断试验、重复性试验等表明该方法特异性强、重复性较好,可用于犬瘟热血清抗体的定量和定性检测。     

犬病快速检测试纸条

犬病快速检测试纸条是采用胶体金标记免疫层析技术制成的，是一种快速检测犬体内特定抗原（抗体）的试纸。目前可检测犬传染病数十种，此试纸条具有快速、简便、实用等优点，现已被广泛应用在犬病的临床诊断中，同时它也作为犬饲养者家中自测犬病的首选工具。本文以犬瘟热病毒抗原检测试纸条举例说明。