江苏安徽两省鸭疫里默氏杆菌病的流行病学调查研究

1996年1月至2001年6月，对江苏、安徽两省86个鸭场的发病鸭从日龄、品种、流行季节、流行菌株的血清型以及血清流行病学等方面进行了鸭疫里默氏杆菌病的调查。结果，在57个鸭场的樱桃谷鸭、番鸭及野鸭体内分离到鸭疫里默氏杆菌92株，而从麻鸭的病料中未分离到该菌；分离到病原的鸭最小为12日龄，最大为41日龄，主要集中在12－30日龄；这些地区鸭疫里默氏杆菌病的流行无明显季节性；这些地区鸭场疫里默氏杆菌流行菌株的血清型至少有5个，其中1、2和10是流行株的主型。     

宜良县鸭疫里默氏杆菌分离株的血清型鉴定及药物敏感性试验

对2008～2010年从云南宜良县鸭传染性浆膜炎病鸭中分离的鸭疫里默氏杆菌的血清型和抗药性进行了调查和分析。在89个鸭场中共分离鉴定出鸭疫里默氏杆菌67株。平板凝集试验结果表明血清1型菌株有61株,占分离株总数的91．04％,是宜良县鸭疫里默氏杆菌的优势血清型。以纸片法测定了所分离菌株对18种常用抗菌药物的敏感性,仅头孢噻吩、氟苯尼考和阿莫西林相对敏感,敏感菌株的比例分别为100％、82．90％和62．69％。此外,多重耐药现象严重。     

应用PCR技术检测鸭疫里默氏杆菌的研究

根据已发表的鸭疫里默氏杆菌15型CVL110／89株编码42－kDa主要外膜蛋白的基因序列设计并合成一对引物，建立PCR方法，对7个血清型的鸭疫里默氏杆菌纯培养菌及野外病死鸭病科组织进行检测。结果表明，7个血清型的鸭疫里默氏杆菌纯培养菌DNA都可扩增出809bp的DNA片段，而对照的2株大肠杆菌和1株沙门氏菌纯培养物DNA扩增结果为阴性；在对24只不同鸭场病死鸭肝、脑的检测中，脑的检出率为19／24（高于细菌分离的13／24），肝脏的检出率为11／24（高于细菌分离的8／24）。由此可见，建立的PCR技术可用于鸭疫里默氏杆菌的鉴定和快速诊断（取脑组织）。但此方法是否对其他血清型的鸭疫里默氏杆菌也适用，有待于收集这些血清型的菌株进行验证。     

安徽地区鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定及药物筛选

为了解本地区鸭疫里默氏杆菌的流行血清型及耐药情况,笔者采集了各地疑似鸭疫里默氏杆菌感染的病鸭病料。无菌采集脑、心血、肝等组织接种于血清营养琼脂,进行细菌的分离培养。将疑似菌株进行革兰氏染色镜检。提取细菌DNA进行PCR鉴定和序列测定。通过玻片凝集试验和药敏试验,确定分离菌株的血清型和耐药性。结果共分离到37株鸭疫里默氏杆菌。玻片凝集试验显示,分离的鸭疫里默氏杆菌属于1型、2型、6型、7型、10型、11型及未知血清型,其中1型和2型所占比例最高。药敏试验结果显示,分离到的菌株对头孢类、喹诺酮类和氯霉素类药物敏感性较高。     

鸭疫里默氏杆菌二价灭活疫苗株筛选及免疫原性研究

通过对山东省鸭疫里默氏杆菌病流行病学调查,发现山东省主要流行鸭疫里默氏杆菌的血清型为Ⅰ、Ⅱ型.将临床分离鉴定的两种血清型致病菌株进行毒力测定和抗原性分析,筛选出适合制成鸭疫里默氏杆茵二价灭活苗的种子菌株,并对其免疫原性进行了研究.     

鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定与生物学特性研究

为了解鸭疫里默氏杆菌的流行情况和药物敏感性,本研究对广东省、山东省、江苏省等地区疑似鸭疫里默氏杆菌病的病料进行病原分离和鉴定,并测定分离株对抗菌药物的敏感性。结果显示,共鉴定到46株鸭疫里默氏杆菌,其中血清1型、2型、10型和15型菌株依次为9株、25株、1株和1株,未定血清型菌株10株;RA分离株普遍对林可霉素、多粘菌素和诺氟沙星耐药,表明RA分离株对临床常用药出现了不同程度的耐受;易感鸭的动物回归试验能够复制出典型的原始病例,且可从死亡雏鸭中分离到同源菌株。该研究结果为鸭疫里默氏杆菌病疫苗选用和临床用药提供了科学的参考依据。     

血清4型鸭疫里默氏杆菌在我国的发现及其病原特性研究

本文首次报道了血清4型鸭疫里默氏杆菌在中国的发现。1994年1月至2000年10月，从全国28个省（市、自治区）不同代次（原种、祖代、父母代和商品代）的5－90日龄患有典型鸭疫里默氏杆菌病的病死鸭分离到146株血清4型的鸭疫里默氏杆菌。对其病原学特性进行研究的结果表明，血清4型的鸭疫里默氏杆菌在我国鸭群感染分布的范围极广，分离菌株对雏鸭具有很强的致病性，对小鼠无致病性，各在分离菌株表现出一致的形态特征和非常相似的生理生化特性；各地分离菌株耐药谱很广，但对头孢类药物（如头孢拉啶、头孢克洛等）和利福平却普遍高度敏感。用分离菌株制备的灭活疫苗免疫雏鸭具有良好的免疫原性。     

河北故城地区鸭疫里默氏杆菌的分离鉴定和血清型分析

对河北省故城地区送检的疑似鸭疫里默氏杆菌感染发病的病鸭进行病原菌的分离鉴定,根据培养特性和生化鉴定结果鉴定出13株鸭疫里默氏杆菌,并对分离菌进行了血清型鉴定和药物敏感试验;经玻片凝集试验和琼脂扩散试验得出血清1型5株,血清2型4株,血清6型1株,血清10型1株,还有2株未定型。试验证明血清1、2型是目前故城地区鸭疫里默氏杆菌的主要流行血清型,分离菌株对雏鸭有很强的致病性且耐药谱较广,但对氧氟沙星、盐酸恩诺沙星和氟苯尼考较为敏感。     

鸭疫里默氏杆菌多价灭活苗的研制及应用

从临床鸭传染性浆膜炎发病鸭体内分离病原菌,经染色镜检、生化鉴定和血清型鉴定得到三株血清型分别为Ⅰ、Ⅱ、Ⅳ型的鸭疫里默氏杆菌。将三种不同血清型的致病菌株混合,制成鸭疫里默氏杆菌多价灭活苗。该苗免疫接种健康雏鸭,攻毒试验表明,该苗有较高的保护率。田间应用表明,该苗免疫的鸭群临床发生鸭传染性浆膜炎的病例明显减少。     

鹅源鸭疫里默氏杆菌的分离和鉴定

为研究鹅源鸭疫里默氏杆菌的生化特性、药敏情况、血清型和致病性,从扬州郊区发病鹅场分离到1株细菌,经分离培养、染色镜检、生化特性鉴定、玻片凝集试验,确定为Ⅱ型鸭疫里默氏杆菌。对病料进行病毒分离试验,经过血凝试验和琼脂扩散试验,没有发现鹅新城疫病毒、禽流感病毒和小鹅瘟病毒。动物致病性试验结果表明,鸭疫里默氏杆菌分离菌株可以通过静脉注射、皮下注射和滴鼻3种途径感染鹅,出现100%的死亡率,说明分离株对扬州鹅具有很强的致病性,同时提示在鹅的免疫计划中也应该充分考虑到鸭疫里默氏杆菌的致病和传播。     

血清9型鸭疫里默氏杆菌在华南地区的分离鉴定

本研究于2009年7月～2010年4月针对广东、广西、福建等养鸭密集地区进行鸭疫里默氏杆菌(RA)流行病学调查,并分离到5个RA分离株。经形态特征、生化特性和血清学鉴定表明,5个分离株与血清9型RA相似。对16S rRNA部分基因进行序列测定,并与GenBank中登录的菌株16S rRNA基因序列进行比对及系统进化分析显示:该5株分离株与报道的RA H-1785、H-2199、H-2565和P-2123的16S rRNA序列相似性较高,同源性达99.1%～99.7%,进一步证实这5个分离株为血清9型RA。     

鸭疫里默氏菌基因分型

在鸭疫里默氏菌 (RA)血清分型的基础上 ,以提取的 RA基因组 DNA为模板 ,进行 Rep- PCR扩增。根据扩增产物的琼脂糖凝胶电泳图谱 ,将分属于 8个血清型的 4 0株 RA区分为 12个不同的基因型 ,不同血清型 RA的图谱有明显差异 ,相同血清型 RA的图谱也存在差异。这些结果显示 ,RA基因组中重复的基因外的回文结构可用于区别相同血清型的不同分离株 ;Rep- PCR作为一种实用的分子生物学方法 ,在分子流行病学研究中可对 RA分离株进行基因定型     

成都地区鸭疫里默氏杆菌的分离与鉴定

本试验从成都地区出现典型鸭传染性浆膜炎剖检变化的病例中分离得到17株细菌,经过病料触片染色、细菌分离培养、生化试验、PCR等方法鉴定为鸭疫里默氏杆菌(RA)。并进一步对其血清型进行了鉴定,结果显示:有10个分离菌株与1型RA阳性血清发生阳性反应,其余7株未定型。     

鸭疫里氏杆菌油乳剂三价灭活疫苗的研究

为了更有效地控制鸭疫里氏杆菌病的流行,选择鸭疫里氏杆菌3个不同血清型流行菌株GXRA01、GXRA07和RAGX09制备油乳剂三价灭活疫苗。对疫苗进行免疫接种剂量试验、安全性检验、免疫效力检测以及保存期试验。结果表明,疫苗安全有效,每只雏鸭颈部皮下注射0.5 mL,能抵抗鸭疫里氏杆菌的攻击,免疫保护期为50 d,4℃~8℃疫苗保存期为6个月。研制的鸭疫里氏杆菌油乳剂三价灭活疫苗具有良好的安全性和免疫原性。     

鸭疫里氏杆菌病研究进展

鸭疫里氏杆菌病是一种主要侵害雏鸭、雏火鸡等多种禽类的急性或慢性传染病.2周龄～7周龄雏鸭最易感,主要引起小鸭纤维素性心包炎、肝周炎和气囊炎,发病率为5%～90%,病死率高达90%.鸭疫里氏杆菌为革兰氏阴性、不运动、不形成芽孢、无鞭毛的小杆菌,有21个血清型,且各血清型缺少交叉保护.鸭疫里氏杆菌病已成为危害养鸭业最为严重的细菌性疾病之一,造成了巨大的经济损失.文章对鸭疫里氏杆菌生物学特性、实验室诊断、血清型鉴定和疫苗免疫方面进行了较为系统的综述.     

我国鸭疫里氏杆菌血清型的鉴定

１９９７年１月－１９９８年３月,从北京市２０个商品鸭场自然病死的北京白鸭和河南省与上海市部分鸭场的樱桃谷鸭分离到２７６株鸭疫里氏杆菌,采用凝集试验和琼脂扩散沉淀试验,对其进行了血清型的研究。其中７０株细菌为１型,６４株为２型,其余１４２株怀１,２,型参考菌株的抗血清发生反应。     

鸭疫里默氏杆菌多价灭活苗研制的研究报告

用三个血清型的菌株,分别是JYL-1、JYL-2、JYL-7,用两种佐剂,分别是蜂胶和油乳剂共制备了两种多价菌苗,即JYL-1、JYL-2、JYL-7（1、2、7三个血清型）三个RA血清型混合多价蜂胶苗和油乳剂苗。试验结果表明。蜂胶复合佐剂多价苗具有产生免疫保护速度快,免疫持续时间长的优点,接种后第3天即产生部分免疫保护力,第120天时仍具有完全保护力;油乳剂多价苗产生保护力的速度较慢,接种后第10天时开始表现出部分免疫保护,其完全保护力也可持续到接种后第120天。免疫后13d时,免疫保护率可达90％左右。免疫后16d时保护率为100％。免疫后120d时,两种多价菌苗的免疫保护率均可达到100％,免疫后150～180d时,免疫保护率可达800左右。统计学分析证明,菌苗的安全性良好。用3个免疫剂量的菌苗所做的安全试验表明无明显不良反应,菌苗在4℃保存一年,18～22℃室温保存4个月不影响菌苗的免疫效力。田间试验表明,用菌苗免疫鸭群后,可有效地使鸭群抵抗鸭疫里默氏杆菌的感染。     

鸭疫里氏杆菌-大肠杆菌二联灭活疫苗的研制

从河北某肉鸭场的发病鸭中分离出鸭疫里氏杆菌（Riemerella.anatipestifer，RA）BJ-D-1株，对该菌株采用液体培养、固体培养及鸡坯培养等三种不同方法进行增菌培养，然后与大肠杆菌O1、O2、O78株及河北地方大肠杆菌流行株等的浓缩菌液以一定比例混合，制成油乳剂灭活苗。皮下免疫7日龄雏鸭0.5mL/只。在河北某发病肉鸭场及周围肉鸭场进行田间试验，效果良好。     

Development of loop-mediated isothermal amplification (LAMP) targeting the GroEL gene for rapid detection of Riemerella anatipestifer

Riemerella anatipestifer (RA) infections cause major economic losses in the duck industry. Detection of RA using conventional assays is time-consuming and laborious. In this study, a simple and rapid assay for the detection of RA was established based on the GroEL gene sequence of RA using loop-mediated isothermal amplification (LAMP) with a set of six primers (two outer primers, two inner primers, and two loop primers). This assay was able to detect all the tested RA strains with different serotypes. A minimum of 10 colony-forming units (CFU) of RA was detected, which represents 50-fold higher sensitivity than that of the standard polymerase chain reaction (PCR) method. This assay showed good specificity to RA strains and did not react with any other species of bacteria. The assay is rapidly completed and the amplification is achieved at a minimum of 20 min at 65 C. Furthermore, the assay successfully detected RA in the liver samples of ducklings infected with RA, suggesting that the assay could be used for the clinical diagnosis of RA infection.     

Serotypic and biochemical characterization of Bacteroides nodosus isolates from Oregon.

Ninety-seven Bacteroides nodosus isolates were characterized by the tube agglutination test. Fourteen serotypes were identified including isolates that were serologically similar to Australian serotypes A, B and C. One additional isolate remains untyped and possibly represents another serotype. The isolates were cultured from 20 different flocks. Multiple isolates were obtained from 15 of the flocks and 13 of these had two to seven different B. nodosus serotypes. Eleven B. nodosus isolates representing one Australian and ten Oregon serotypes were nonfermentative in various carbohydrates and did not produce indole. These isolates all exhibited proteolytic activity. The prototype strains of 12 of the 14 serotypes demonstrated virulence as assessed by an elastase production assay.