鱼粉品质检测与鉴别方法(下)

５鱼粉中掺入鞣革粉的检测鞣革粉中铬经灰化后部分可变成６价铬，６价铬在强酸溶液中能与二苯基卡巴腙发生反应，生成紫红色水溶性铬—二苯硫代卡巴腙的紫红色水溶性化合物。该反应极为灵敏，微量铬即可检出。称取待检样品１～３g入瓷坩锅中，炭化后人茂福炉于５５０～６００℃温度灰化３０min。如有黑点再继续灰化３０min，取出冷却后，用少许蒸馏水将灰分湿润，加入１０ml２mol／LH２SO４溶液使呈酸性，再加二苯基卡巴腙溶液（称取二苯基卡巴腙０．２５g，加９０％乙醇至１００ml使溶解，摇匀，置棕色瓶内保存。此试剂应为无色的液体，…     

原子吸收光谱法测饲料中的钙

1原理　　样品经干法灰化、分解有机质后，加酸使灰分中的钙离子全部溶解，直接吸入空气—乙炔火焰原子化。在光路中测定钙原子对特征波长谱线的吸收，用镧作释放剂，以消除磷酸等的干扰。2试剂与仪器　　试剂要求使用去离子水，优级纯或高级纯试剂；仪器有原子吸收分光光度计，日立公司Z－8200塞曼扣背景。2％盐酸：量取2ml盐酸，加水稀释至100ml；10g/l镧溶液：称取5.86g氧化镧(La2O3)，用5ml去离子水湿润后慢慢仔细地添加25ml浓盐酸，使氧化镧溶解后用去离子水稀释至100ml；50g/l镧溶液：称取29.32g氧化镧(La2O3)，用25ml去离子水湿润…     

土壤营养物质测定的方法

1水解性氮（碱解扩散法） 滴定前首先要检查滴定管的下端是否充有气泡。若有，首先要把气泡排出。滴定时，标准酸要逐滴加入，在接近终点时，用玻璃棒从滴定管尖端沾取少量标准酸滴入扩散皿内。特制胶水一定不能沾污到内室，否则测定结果将会偏高。扩散皿在抹有特制胶水后必须盖严，以防漏气。试剂配制：1.8摩尔/升氢氧化钠溶液。称取化学纯氢氧化钠72克，用蒸馏水溶解后冷却定容到1000毫升。1.2摩尔/升氢氧化钠溶液。称取化学纯氢氧化钠48克，用蒸馏水溶解定容到1000毫升。2%硼酸溶液。称取20克硼酸，用热蒸馏水（约60℃）溶解，冷却后稀释至1000毫升，用稀盐酸或稀氢氧化钠调节pH值至4.5。0.01摩尔/升盐酸标准溶液。先配制1.0摩尔/升盐酸溶液，然后稀释100倍，用标准碱标定。定氮混合指示剂与土壤全氮的测定配法相同。特制胶水。阿拉伯胶（称取10克粉状阿拉伯胶，溶于15毫升蒸馏水中）10份、甘油10份，饱和碳酸钾5份混合即成。     

林可霉素在饲料中残留的微生物学检测方法

建立了林可霉素在配合饲料中残留的微生物学检测方法。样品用二氯甲烷提取经浓缩、溶剂转换．制成试样溶液，再用藤黄微球菌作为检定茼进行含量测定。结果显示。林可霉素在0．15-2．4μg／ml的浓度范围内具有良好线性关系（r=0．9991）。配合饲料中3种添加浓度1．00μg／g、400μg／g、8．00μg／g的平均回收率为80．2％（n=9）。RSD分别为5．7％、4．2％、2．2％（n=3）。     

底物浓度、DNS量对木聚糖酶活性测定结果的影响

１材料与方法１．１样品供试酶样由河南师范大学生命科学学院“小麦抗营养因子研究课题组”提供。１．２仪器恒温水浴锅、７２３型分光光度计、磁力搅拌器、精密pH计、电子分析天平（d＝０．１mg）１．３试剂１．３．１柠檬酸缓冲液（０．０５mol／l，pH值５．３）称取１０．５g柠檬酸（C６H８O７·H２O）溶解于约８００ml蒸馏水中，用１mol／l的NaOH将pH值调至５．３，再用蒸馏水定容至１０００ml。１．３．２木糖母液（１０μmol／ml）１．５０００g木糖溶解于柠檬酸缓冲液中，定容至１０００ml，室温下保存。１．３．３底物准确称取…     

高效液相色谱法检测鸡蛋中三聚氰胺残留量的探讨

本试验采用反反向色谱柱Hilic柱作为色谱分析柱,10mmoi醋酸铵水溶液：乙腈（v／v,5／95）溶液为流动相：鸡蛋样品经混合均匀后,用三氯乙酸溶液提取,经阳离子交换固相萃取柱净化、富集后,在紫外检测器230nm处用高效液相色谱仪测定,保留时间在10-11min;标准曲线在0．1—50μg/ml浓度内呈线性相关（R^2=0．9999）;在空白鸡蛋样品中添加0．5mg／kg（检测限）、1mg／kg（定量限）、2．Smg／kg、5mg／kg的三聚氰胺,回收率为70％-100％,相对标准偏差（RSD）小于10％．该方法简单快速、灵敏度高、重现性好,非常适合鸡蛋中三聚氰胺药物残留的确证和定量测定。     

牛羊猪肉组织中伊维菌素残留量检测HPLC法的改进

对牛、羊、猪肉组织中伊维菌素残留的检测方法进行了改进，样品用乙腈提取，用正己烷脱脂并于50℃减压蒸干。残留物用乙酸乙酯溶解，过C18SPE柱，用乙酸乙酯-甲醇（1：1）溶液洗脱；收集流出液和洗脱液，合并蒸干后于（50±3）℃减压干燥20min；残留物用N-甲基咪唑溶解并与三氟乙酸酐-乙腈（1：2）溶液于（67±2）℃衍生1h。用配荧光检测器的高效液相色谱仪检测。本方法平均回收率为（102．0±6．6）％，批内RSD〈10％，伊维菌素浓度在5～400ng／mL时，呈线性关系，r=0．9997。检测限为2μg／kg。     

大豆凝集素的分离纯化和血凝活性研究

大豆种子经过浸提、离心、硫酸铵逐级沉淀和D-半乳糖-Epoxy-Sepharosc-4B亲和层析，获得单一的大豆凝集素（Soybean agglutinin SBA）样品。纯化的大豆凝集素经pH8．9的聚丙烯酰胺凝胶电泳（胶浓度7．5％），可以显示一条清晰的着色带。在血凝活性鉴定中，采用2％兔细胞悬液，测定凝集红细胞的能力和检测它们与糖结合后对红细胞的凝集作用的影响。结果表明，使兔红细胞50%凝集的蛋白质最低浓度为4μg／mL左右。浓度为0．1mg／ml凝集素溶液分别与D-半乳糖、D-氨基半乳糖、异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）、a-乳糖、几丁质溶液结合后，使兔红细胞50％凝集的糖配体溶液浓度分别为1mg／ml、2．5mg／ml、10mg／ml、30mg／ml，而几丁质几乎对SBA没有影响。     

配合饲料、混合饲料及骨粉中钙含量的测定

1试验部分 1.1主要试剂与仪器 1.1.1钙标准溶液 　　称 105℃～ 110℃干燥至恒重的基准 CaCO32.497 2g，于烧杯中，加入 20ml水，滴加 1∶ 1HCl至完全溶解，再加 10mlHCl，煮沸除去 CO2，冷却后移入 1L容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。即溶液为 1mgCa2＋ /ml。 1.1.2 1mol/l三乙醇胺－盐酸（ 1mol/lTEA－ HCl）总离子强度缓冲液 　　取（ A、 R）浓三乙醇胺 36ml，加入 4mol/l(A、 R)HCl 50ml，稀释至 250ml。 　　PVC膜钙离子选择电极（江苏电分析仪器厂） ;232型饱和甘汞电极（上海电光仪器厂）； PHS－ 2型酸度计（上海第二…     

应用原子吸收光谱测定蜂蜜中铁的研究

本实验利用火焰原子吸收法测定蜂蜜中的铁。测量波长２４８．３ｎｍ，狭缝０．２ｎｍ，灯电流５．０ｍＡ，空气流量１０．０Ｌ／ｍｉｎ，乙炔流量２．００Ｌ／ｍｉｎ。样品经消解或灰化（５５０℃）等处理后导入火焰测定吸光度，与标准系列比较定量。测得蜂蜜样品中铁含量为４０．３μｇ／ｍｌ，ＲＳＤ％＝１．２９，回收率＝１００．４％。     

50%粉状氯化胆碱含量的快速测定方法

１实验部分１．１试剂和溶液冰乙酸：优级纯（纯度≥９９．６％）；乙酸汞试液：５０g／l，取５g乙酸汞研细，加１００ml温热的冰乙酸溶解。本试液应置于棕色瓶内，密闭保存；结晶紫指示液２g／l∶取２g结晶紫加１００ml冰乙酸；高氯酸标准溶液：C（HClO４）＝０．１mol／l。１．２试验方法C（V－V０）×１３９．６３m×１０００×１００式中：C———高氯酸标准溶液浓度（mol／l）；V———滴定试样时消耗的高氯酸标准溶液的体积（ml）；V０———滴定空白时消耗的高氯酸溶液的体积（ml）；m———试样的质量（g）；１３９．６３———…     

犬应用吡喹酮缓释剂后血药浓度的检测

应用反相高效液相色谱法测定犬用吡喹酮缓释剂后的血药浓度。犬应用包埋缓释剂后1～7个月血药浓度为0．48～1．45μg／ml；犬应用注射缓释剂后1～6个月血药浓度为0．051～0．2μg／ml；犬口服常用驱（杀）虫剂量后1～8小时的血药浓度为0．66～1．60μg／ml。显然前者与口服浓度相当，而后者则远远低于口服浓度；前者预防效果减虫率达98．46～100％，后者仅达55．65～65．11％；从而以确凿的数据证实犬用包埋型缓释剂的有效预防期至少在7个月以上。     

液相色谱-质谱法分析禽蛋中的苏丹红

建立了禽蛋中苏丹红的液相色谱-质谱联用（LC—MS）检测方法。液相色谱柱为Waters SunfireTM C18150mm×2．1mm，3．5μm，柱温30℃，流动相A为乙腈，B为0．2％甲酸和乙腈的混合溶液，梯度洗脱，流速0．25mL／min；质谱选择电喷雾离子源（ESI^＋）。此条件下苏丹红Ⅰ和苏丹红Ⅱ的线性范围是0．1—500μg／L，检测限0．1μg／kg；苏丹红Ⅲ和苏丹红Ⅳ的线性范围是0．5—500μg／L，检测限0．5μg／kg。四种苏丹红的回收率为60％-80％。     

超高效液相色谱-串联质谱法测定原料乳和奶粉中三聚氰胺的含量

该试验建立了使用超高效液相色谱-串联四极杆质谱测定原料乳和奶粉中三聚氰胺含量的检测方法。用三氯乙酸溶液和乙酸铅提取．提取液经MCX固相萃取柱净化后用UPLC-MS-MS进行检测。色谱条件：CAPCELLPAKCRl：4柱（2．0mm×100mmi．d．,5μm）,流动相：乙腈-0．01mol／L乙酸铵溶液,梯度洗脱流速0．3ml／min。采用正离子模式的电喷雾质谱检测．以一级质谱得到的准分子离子m／z 126．8作为母离子,进行碰撞诱导解离（CID）二级质谱（MS2）分析,选择母离子和MS2的碎片离子m／z84．9、67．8定性确证,提取m／z84．9离子质量色谱峰面积定量。基质标准线性范围为0．01～1．00μg/ml,检出限10μg／kg（S／N=10）,原料乳回收率为82．4%～97．8％．奶粉回收率为80．7％～95．7％。     

赤羽病病毒核衣壳蛋白抗体间接ELISA检测方法的建立

以纯化的重组赤羽病病毒核衣壳蛋白作为诊断抗原，建立了检测牛血清特异性核衣壳蛋白抗体的间接ELISA方法，初步组装成便于现地使用的试剂盒。经对试验条件进行优化，确定最佳抗原包被量为每孔1μg（100μL），样品稀释度为1：100，兔抗牛IgG辣根过氧化物酶标记抗体稀释度为1：8000。经特异性试验和重复性试验证明该方法特异性高、重复性好。应用初步研制的间接ELISA试剂盒和微量中和试验法分别对云南省的89份、内蒙古的100份牛血清样本进行了检测，以中和试验为参照，经统计学处理，得出检测临界值分别为0．411和0．303，2种方法的符合率分别为72．7％（56／77）和91．4％（85／93）。试剂盒在37℃保存3d，对敏感性无明显影响。     

扩张囊胚玻璃化超低温冷冻保存及移植技术的研究

本试验探讨了对鼠扩张囊胚玻璃化冷冻保存后，提高发育率的最佳条件。玻璃化溶液是用ＰＢＳ液稀释成的３０％聚蔗糖＋０．５Ｍ蔗糖混合法，再将乙二醇（ＥＧ）调制成２０、３０及４０％（ｖ／ｖ）的溶液，即ＥＦＳ２０、３０及４０。玻璃化冷冻保存是１０、２０及２５℃温度下，将扩张囊胚直接移入ＥＰＳ溶液后投入液氮中一步法令冻保存，其中２５℃下保存后的发育率最高（８７％）。继之将扩张囊胚用１０％ＥＧ溶液经５分钟处理后，再移入ＥＦＳ４０中二步法冷冻保存，发育率高达９４％。利用二步法冷冻保存的扩张囊胚移植后，妊娠受体的产仔率为６６％（１６８／２５５），同时照组产仔率６１％（８０／１３２）相比无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。     

油剂普鲁卡因青霉素注射液细菌内毒素检查方法的研究

对油剂普鲁卡因青霉素注射液细菌内毒素检查方法进行了研究,在样品中加入适量的无菌、无内毒素的０．１ｍｏｌ／Ｌ氢氧化钠％吐温－８０溶液;并用０．１ｍｏｌ／Ｌ盐酸调节样品液的ＰＨ值,解决了样品的溶解方法,。用稀释法排除样品对细菌内毒素检查的干扰。实验结果表明,选用鲎试剂灵敏度为０．５ＥＵ／ｍｌ将样品稀释 １２５００ｕ／ｍｌ的溶液后可消除其干扰作用,因此,用细菌内毒素检查法作为该药品的热原物质检查是可行持     

几种盐的检查法

1标准砷溶液的制备 称取三氧化二砷0.132克,置1 000毫升量瓶中,加20%氢氧化钠溶液5毫升溶解后,用适量的稀硫酸中和,再加稀硫酸10毫升,用水稀释至刻度,摇匀,作为贮备液。临用前,精密量取贮备液10毫升,置1 000毫升量瓶中,加稀硫酸10毫升,用水稀释至刻度,摇匀,     

气相色谱-离子阱串联质谱法同时测定猪肌肉中硝基咪唑类药物残留量

旨在建立测定猪肌肉中地美硝唑、洛硝唑、噻克硝唑、甲硝唑和奥硝唑等硝基咪唑类药物残留的气相色谱一离子阱串联质谱测定法。样品用二氯甲烷提取,盐酸反萃取。盐酸萃取液用磷酸氢二钾碱化,再用二氯甲烷反萃取,萃取液于40℃水浴中旋转真空蒸干。残余物用3mL乙酸乙酯溶解,于40℃水浴氮气吹干,加入N,O-双（三甲基硅烷基）乙酰胺和异辛烷各50pL,50℃衍生60min,进样分析,GC—MS／MS检测,外标法定量。结果表明,5种药物标准液浓度在0．005～1．6μg／mL时,与响应值呈良好线性关系,相关系数均大于0．998。洛硝唑的检测限可达0．2μg／kg,噻克硝唑为O．5μg／kg,地美硝唑、甲硝唑和奥硝唑为1．0μg／kg。空白肌肉组织样品中添加药物浓度在0．2～4．0μg／kg时,5种药物的回收率为74％～82％,日间变异系数均小于13％。表明所建立方法灵敏、准确,可用于检测猪肌肉中硝基咪唑类药物残留。     

头孢喹肟对大肠杆菌防突变浓度的测定

采用标准琼脂二倍稀释法测定了头孢喹肟对大肠杆菌的最低抑菌浓度;用肉汤法富集了大肠杆菌;用琼脂稀释法测定了头孢喹肟对大肠杆菌的暂定防突变浓度（MPCPr）及防突变浓度（MPC）。结果显示,头孢喹肟对大肠杆菌标准株（ATCC25922）的MIC和MIC99分别为0．125μg／mL和0．1μg／mLMPCPr和MPC分别为0．5μg／mL和0．256μg／mL,MPC／MIC99比值为2．56。头孢喹肟对50株大肠杆菌临床分离株的MIC90和MPC90分别为0．2μg／mL和0．8μg／mL,MPC90／MIC90比值为4。说明头孢喹肟限制大肠杆菌耐药突变的能力很强,ATCC25922的选择指数（SI）仅为2．56,临床分离株的SI为4。