黄曲霉毒素B1、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素的累加细胞毒性研究

由于饲料中多种霉菌毒素并存的几率比较高，本研究以仔猪肠上皮细胞（IPEC-J2）为模型，研究黄曲霉毒素B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEA）和呕吐毒素（DON）的叠加细胞毒性。细胞毒性试验选用AFB1、ZEA和DON三种毒素作为响应面Box-Behnke设计的三个因素，以AFB1：10、20、30 μg/L，ZEA：150、300、450 μg/L，DON：500、1000、1500 μg/L作为Box-Behnke设计的三个编码水平。利用响应面设计构建得到17组复合霉菌毒素组合，以其对IPEC-J2细胞活力的影响作为参考指标，得到对细胞损伤程度最高和最低的霉菌毒素添加比例。结果表明：经方程预测后，得到细胞活力最低（霉菌毒素毒性最高）的AFB1、ZEA和DON组合为30、150 μg/L和1500 μg/L，经测定细胞活力为32.32%|得到细胞活力最高（霉菌毒素毒性最低）的AFB1、ZEA和DON组合为10、150 μg/L和600 μg/L，经测定细胞活力为53.01%。该结果为多种霉菌毒素叠加毒性的研究提供了依据。 [关键词] IPEC-J2细胞|黄曲霉毒素B1|玉米赤霉烯酮|呕吐毒素|细胞毒性     

同步降解黄曲霉毒素和玉米赤霉烯酮的复合益生菌研制

为得到同步降解黄曲霉毒素B_1(AFB_1)和玉米赤霉烯酮(ZEA)效果最佳的复合益生菌组合,选用对霉菌毒素降解效果较好的枯草芽孢杆菌、干酪乳杆菌以及产朊假丝酵母,在1.0×10~5、1.0×10~6、1.0×10~7cfu/mL三个水平上进行响应面回归设计。试验结果表明:枯草芽孢杆菌、干酪乳杆菌以及产朊假丝酵母活菌数分别为1×10~7、1×10~6、1×10~7cfu/mL时,对AFB1+ZEA降解率最好,AFB1降解率为38.67%(P 0.05),ZEA降解率为26.29%(P 0.05)。     

贝莱斯芽孢杆菌生物学特性及体外降解霉菌毒素研究

为了筛选一株抗逆性强、抑制致病菌、产酶及维生素等益生物质且可降解霉菌毒素的益生菌，对自主筛选得到的贝莱斯芽孢杆菌（BLS-1）进行最适温度、pH、生长曲线及产酶、抑菌能力、抗逆性研究，并通过发酵罐发酵，对发酵液中多种酶及维生素含量进行了考察；通过体外降解的方式考察BLS-1对多种霉菌毒素的降解能力。结果表明：自主筛选的贝莱斯芽孢杆菌BLS-1在pH 2.5～3.5、胆盐浓度0.1%～0.5%及胃液肠液环境中具备良好的耐酸、耐胆盐、耐胃肠液能力；最适温度37℃、最适pH为6、培养时间24～30 h时芽孢形成率最高，生长进入稳定期并于28 h达到芽孢量顶峰；菌株发酵液代谢产物及菌体对大肠杆菌具有中敏的抑制作用；发酵液中含有多种酶、维生素等益生物质，且对玉米赤霉烯酮（ZEN）、呕吐毒素（DON）、黄曲霉毒素（AFB1）、伏马毒素（FB）、赭曲霉毒素（OT）有降解作用。贝莱斯芽孢杆菌BLS-1生物学特性良好，抗逆性强，可抑制大肠杆菌，同时对玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、黄曲霉毒素、伏马毒素具有降解作用。     

不同方法检测霉菌毒素的比较研究

本研究通过比较三种不同方法对霉菌毒素检测结果的差异,旨在为检测霉菌毒素提供科学依据。本实验采用酶联免疫(ELISA)试剂盒、超高效液相色谱(UHPLC)和液相质谱质谱联用(HPLC-MS/MS)三种检测方法,对仔猪配合饲料中黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEA)、呕吐毒素(DON)含量进行检测。ELISA法检测AFB1、ZEA和DON时,超标率与UHPLC法和HPLC-MS/MS法接近;但ELISA法检测AFB1结果为限量值为80%以上时,采用UHPLC法的检测结果显著高于HPLC-MS/MS法(P0.05),其他所有样品的AFB1、ZEA和DON两种仪器检测方法差异不显著(P0.05)。ELISA可作为霉菌毒素检测的快速初筛法;对ELISA结果进行确认时,低含量AFB1样品更宜采用HPLC-MS/MS法,其余样品采用UHPLC法检测更经济;对DON和ZEA的ELISA结果确认时,也可采用UHPLC法。     

一株毕赤酵母菌MC-1降解呕吐毒素、生物学特性及初步应用

呕吐毒素（DON）是危害动物健康的霉菌毒素之一，本研究旨在分离出能够降解DON的益生菌，以期应用于动物饲料中降解DON。本研究从普洱茶叶中分离出一株益生菌，经16S rDNA基因序列比对确定该菌株为毕赤酵母菌MC-1菌株；其在含有DON(1 mg/L)发酵液中DON降解率为59.21%。此外研究了毕赤酵母菌MC-1生物学特性，活性成分定位和应用试验。结果表明：毕赤酵母菌MC-1具有耐盐、耐酸、耐胆盐及在模拟消化液中存活的特性；其发酵上清液（DON 1 mg/L） DON降解率为54.76%，该菌株与（DON 1 mg/kg）豆粕共同发酵48 h后DON降解率为46.79%。综上，毕赤酵母菌MC-1能够用于动物发酵饲料中降解DON。     

能同时降解呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌筛选

旨在筛选能够同时降解呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌。先以呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的混合物为唯一碳源,以母猪粪便为材料,进行霉菌毒素降解菌的驯化富集培养,得到能够降解这3 种霉菌毒素的混合菌群,逐一对分离到的细菌进行呕吐毒素降解能力检测,得到10 株对呕吐毒素降解率达70% 以上的菌株。进而检测这10 株细菌对玉米赤霉烯酮的降解能力,得到4 株对玉米赤霉烯酮降解率达70%以上的菌株。再检测这4 株细菌对黄曲霉毒素B1的降解能力,结果有1 株细菌(ODS-1)对黄曲霉毒素B1的降解能力达78.9%。革兰氏染色结果表明ODS-1 为革兰氏阴性芽孢杆菌。研究获得的ODS-1 对呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素均有较好降解效果,为进一步开发具有霉菌毒素降解作用的产酶益生素奠定了基础。     

能同时降解眍吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌筛选

旨在筛选能够同时降解呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌。先以呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的混合物为唯一碳源,以母猪粪便为材料,进行霉菌毒素降解菌的驯化富集培养,得到能够降解这3种霉菌毒素的混合菌群,逐一对分离到的细菌进行呕吐毒素降解能力检测,得到10株对呕吐毒素降解率达70％以上的菌株。进而检测这10株细菌对玉米赤霉烯酮的降解能力,得到4株对玉米赤霉烯酮降解率达70％以上的菌株。再检测这4株细菌对黄曲霉毒素B1的降解能力,结果有1株细菌（ODS-1）对黄曲霉毒素B1的降解能力达78．9％。革兰氏染色结果表明ODS-1为革兰氏阴性芽孢杆菌。研究获得的ODS-1对呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素均有较好降解效果,为进一步开发具有霉菌毒素降解作用的产酶益生素奠定了基础。     

2020年底各地新玉米霉菌毒素风险分析

为了解呕吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（ZEN）和黄曲霉毒素B1（AFB1）在2020年底新玉米中的污染情况,指导饲料生产企业和养殖场（户）开展霉菌毒素防控,降低霉菌毒素对饲料质量安全及养殖动物的影响,避免经济受损的风险。2020年12月在市场上采集新玉米样本225份,采用胶体金免疫层析法或上转发光免疫分析法对其霉菌毒素污染情况进行检测,依据安佑集团相关企业标准标和GB 13078-2017《饲料卫生标准》进行判定分析。结果表明：新玉米中霉菌毒素检出率为96.0%,其中DON、ZEN和AFB1的检出率分别为85.8%、87.1%和86.7%|DON、ZEN和AFB1在新玉米中的污染状况差别较大,按《饲料卫生标准》判定的超标率分别为0.0%、0.4%和11.6%|最大检测值分别为2500、534 μg/kg和＞100 μg/kg。就产地而言,山西、内蒙古、东北、安徽、山东、河南、云南、陕西等地霉菌毒素污染较重。综上,与2019年及2020年玉米霉菌毒素污染调查数据相比,2020年底新玉米污染程度较重。 [关键词] 玉米|霉菌毒素|胶体金免疫层析法|上转发光免疫分析法|污染规律     

降解多种真菌毒素的芽孢杆菌的筛选鉴定及其发酵饲料应用

粮食作物在生长及其收获储存过程中,极易被有害真菌感染导致存在黄曲霉毒素（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、呕吐毒素（DON）这3种真菌毒素污染,严重危害人和动物的健康。研究旨在筛选一种可以同时降解饲料原料中这3种真菌毒素的菌株,首次使用亚甲基蓝褪色作为降解真菌毒素筛选方法,再以过氧化物酶复筛最终获得一株蜡样芽孢杆菌BL-17,该菌株对AFB1、ZEN、DON 3种毒素同时存在的降解率分别达74.38%、98.31%和39.66%。后续将BL-17与两株乳酸菌混合对饲料原料进行发酵,在有氧条件下大幅度降解了饲料中这3种有毒物质,对AFB1、ZEN和DON的降解率分别高达86.72%、100%和43.19%。菌株BL-17不仅提高了发酵饲料的安全性,同时也可增加对非常规饲料原料的利用,具有很好的应用前景。     

霉菌毒素与畜禽免疫抑制

1常见的霉菌和霉菌毒素 霉菌通常污染饲料或饲料原料,在其中生长并产生二级代谢产物——霉菌毒素。产毒霉菌主要有3个属,曲霉菌、青霉菌和镰刀菌,而霉菌毒素目前已发现超过350种。常见的霉菌毒素有黄曲霉毒素（AF）、玉米赤霉烯酮（ZEA）、T-2毒素、呕吐毒素（DON）、赭曲霉毒素（OT）、烟曲霉毒素（FUM）等。其中对猪危害最大的是黄曲霉毒素、玉米赤霉烯酮和呕吐毒素。家禽饲料中,自然状况下发生率最高且致害作用最严重的是黄曲霉毒素和单端孢霉烯族毒素。     

青海省部分地区猪饲料中霉菌毒素污染情况调查分析

为了解青海省部分地区猪饲料中霉菌毒素的污染情况,应用ELISA方法对2012年采集的青海省部分地区205份猪饲料样品进行了赭曲霉毒素A （OTA）、黄曲霉毒素B1（AFB1）、呕吐毒素（DON）、玉米赤霉烯酮（ZON）的检测与分析.结果表明.156份商品化饲料中,OTA、AFB1、DON、ZON阳性率分别为7.05％、16.03％、83.33％和69.87％,49份自制饲料中,OTA、AFB1、DON、ZON阳性率分别为6.12％、28.57％、85.71％和73.4％;156份商品化饲料中,总单污率为11.54％,总混污率为79.49％,在49份自制饲料中,总单污率为8.16％,总混污率为91.84％;试验显示,青海省部分地区饲料中存在霉菌毒素的污染,且混合污染现象严重,同时自制饲料的污染程度较商品化饲料高.     

霉菌毒素在发酵全混合日粮中的动态变化研究

试验为研究发酵全混合日粮霉变过程中霉菌毒素的变化规律，采取人工辅助的方法促使饲料霉变，测定其中玉米赤霉烯酮（ZEN）、T-2毒素（T-2）、黄曲霉毒素（AFT）、呕吐毒素（DON）和伏马菌素（FB）含量，分析5种毒素之间的互作效应。结果显示，ZEN、T-2、AFT、DON和FB之间的关系以负相关为主；FB1与T-2之间具有相互促进繁殖的作用；FB1与AFB1、DON与AFB1之间具有相互抑制繁殖的作用。研究表明，试验结果有助于有效预防和清除饲料中的霉菌毒素，为维护动物健康、提高经济效益提供技术参考。     

泌阳县肉牛饲料原料霉菌毒素污染状况调查分析

[目的]为了解掌握我省肉牛饲料中霉菌毒素污染情况,有针对性的指导养殖场户及饲料加工企业开展霉菌毒素防控,避免霉菌毒素污染对饲料品质和肉牛健康的危害,降低经济损失。[方法]本研究对来自河南省泌阳县8个养殖场户的22份肉牛饲料原料进行分析,采用ELISA方法测定了饲料原料中黄曲霉毒素B1（AFB1）、玉米赤霉烯酮（ZEN）、赭曲霉毒素A（OTA)、呕吐毒素（DON）及T-2毒素（T-2）的含量。[结果]结果表明,在所检测的22份饲料原料中都存在不同程度的霉菌毒素污染情况,其中,72.73%的饲料原料受到2种及以上霉菌毒素污染。AFB1是污染最为严重的毒素,检出率高达90.91%,超标率达59.1%,尤其是在麦秸、花生秧和玉米中的污染表现得更为突出。其次是T-2毒素,检出率为77.27%,在麦秸和青贮玉米中污染严重。DON、ZEN及OTA毒素检出率为36.36%、27.27%及27.27%,其中,DON毒素的最大检测值为5830.3 μg/kg。[结论]以上结果表明,泌阳县肉牛饲料原料中霉菌毒素污染现象普遍存在,霉菌毒素共存现象也较为严重。     

降解霉变玉米中黄曲霉毒素B1的复合益生菌研制

为了降解霉变玉米中黄曲霉毒素B1(AFB1),该研究选用具有降解AFB1功能的产朊假丝酵母、枯草芽孢杆菌、干酪乳杆菌、丁酸梭菌,利用响应面回归设计获得最佳的降解AFB1的益生菌组合。结果表明,当产朊假丝酵母、枯草芽孢杆菌、干酪乳杆菌、丁酸梭菌的活菌数为1×10~6、1×10~6、1×10~4、1×10~6CFU/g时,在37℃发酵霉变玉米4 d后,使AFB1的降解率达到59.18%(P0.05),该研究对提高霉变饲料的饲用价值具有重要意义。     

食品和饲料中霉菌毒素污染及生物降解方法

从动物消化道、土壤和其他来源分离的发酵食品或饲料中常见的微生物证实了微生物是适用于霉菌毒素降解的主要生物。但迄今为止取得的成果可能只是可实际应用技术的第一步，因为大多数研究是在实验室条件下进行的。在许多情况下，培养物和微生物混合通常不是食品或饲料中微生物区系的一部分，因此不具备应用性。动物消化道中存在的霉菌毒素降解微生物的活性可能会增加，它们可能被用于体内降解霉菌毒素或作为益生菌。因此，本文综述了食品和饲料中霉菌毒素污染及生物降解方法，从经济角度出发，为开发和控制霉菌毒素污染提供理论依据。 [关键词]饲料|食品|霉菌毒素|降解|生物法     

酵母细胞壁提取物对霉菌毒素体外吸附试验

为了寻求到一种吸附范围广、吸附力强及饲料容积小的霉菌毒素吸附剂,试验以酵母细胞壁为材料,用碱法、酸法、酶碱法和酸碱法提取酵母细胞壁多糖,对不同处理方法得到的酵母多糖产品进行多糖含量测定,分别为87.00%、76.07%、56.81%和56.81%。同时研究了酵母细胞壁提取物与4种处理所得产品对玉米赤霉烯酮(ZEA)和黄曲霉毒素(AFB1)的体外吸附作用,试验结果表明,酵母细胞壁和改性蒙脱石配合对AFB1的吸附效果最好,显著高于酸法和碱法酵母细胞壁提取物(P<0.05),吸附率可以达到70.21%;对ZEA吸附效果显著高于酸碱法,吸附率可以达到96.62%,体外试验表明对吸附霉菌毒素具有明显效果。     

2株枯草芽孢杆菌协同降解黄曲霉毒素B_1的效果

旨在研究2株枯草芽孢杆菌协同降解黄曲霉毒B1(AFB1)的作用。将2株枯草芽孢杆菌进行生理生化特性鉴定和16SrRNA序列测定后,以AFB1降解率为依据,分别进行优化培养并观察协同降解作用。结果表明:菌株K-3优化条件为装液量50mL/250mL、温度37℃、4%接种量、初始pH7.0、发酵周期48h,150r/min振荡培养,对AFB1降解率为88.07%(P<0.05);菌株K-TM装液量为50mL/250mL、温度37℃、6%接种量、初始pH7.0、发酵周期60h,150r/min振荡培养,对AFB1降解率为84.81%(P<0.05);K-3、K-TM按体积1∶2组合,对AFB1协同降解率达到88.43%。本研究为益生菌在降解黄曲霉毒素中的应用奠定理论基础及试验依据。     

黄曲霉毒素B1降解菌的筛选及其降解酶分泌机理的初步研究

本研究旨在筛选能降解黄曲霉毒素BI（AFB1）的细菌并对其降解酶的分泌机理进行初步研究。先以香豆素为唯一碳源,以母猪粪便为材料,进行3次富集培养,得到能够降解香豆素的细菌,逐一对分离到的细菌进行AFB,降解能力检测,得到1株对AFB．降解率达95．6％的菌株。检测基础无机盐培养基中添加不同浓度葡萄糖对AFB,降解情况的影响以及AFB,预处理对培养液离心后上清的AFB．降解能力的影响。结果表明,培养液中添加葡萄糖对AFB,降解酶分泌有一定抑制作用,并且随葡萄糖浓度的升高,抑制作用增强;AFB,预处理对AFB,降解酶的分泌没有诱导作用。     

2016年中国饲料和原料中霉菌毒素污染调查报告

本研究采用免疫亲和柱-高效液相色谱法测定了国内各省(市区)域的玉米、 玉米副产物、 小麦及麸皮、 粕类和全价饲料等1304个饲料及饲料原料样品中黄曲霉毒素(AFB1)、 玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)的含量,以了解中国饲料和原料中霉菌毒素污染情况.结果表明:玉米、 玉米副产物、 小麦及麸皮、 粕类和全价料中AFB1检出率分别为92.14%、91.48%、66.23%、97.53%和83.06%,超标率分别为31.94%、25.00%、7.79%、81.48%和11.29%;ZEN的检出率分别为79.93%、95.45%、76.62%、72.84%和88.98%,超标率分别达到4.35%、58.52%、10.39%、18.52%和7.26%;DON的检出率分别为96.49%、96.59%、100.00%、74.07%和90.32%,超标率分别达到51.17%、82.39%、83.12%、3.70%和42.20%.其中玉米副产物和小麦及麸皮是霉菌毒素污染最为严重的饲料原料,是霉菌毒素风险控制的主要关注对象.     

比较几种吸附剂对3种霉菌毒素体外吸附脱毒效果的研究

霉菌毒素吸附剂是一种能有效去除饲料中霉菌毒素的物质.本文研究了13种不同市售吸附剂对黄曲霉毒素B1(AFB1)、玉米赤霉烯酮(ZEN)和呕吐毒素(DON)体外吸附的效果,发现不同处理时间,吸附率有所不同.某些硅铝酸盐吸附剂对黄曲霉毒素B1有非常好的吸附效果,吸附率达到95％以上;某些吸附剂对玉米赤霉烯酮也有较好的吸附脱毒能力,但与处理时间关系密切;某些吸附剂对呕吐毒素的吸附率比较低,且处理时间变长,脱毒效果更差.