苜蓿皂苷对山羊瘤胃体外培养液纤维降解酶活及纤维降解率的影响

本试验研究了不同水平的苜蓿皂苷对生长山羊瘤胃培养液中纤维降解酶活及纤维降解率的影响。在山羊瘤胃培养液中分别添加0％、1％、2％、3％的苜蓿皂苷，进行体外培养。结果表明：添加量为1％时未对纤维素酶和木聚糖酶活性造成不利影响．但超过1％时则降低其活性．添加苜蓿皂苷未对内切葡聚糖酶活性和纤维二糖苷酶活性产生影响。1％-3％的苜蓿皂苷极显著地提高DM降解率，分别增加了14．0％、28．2％和25．8％。说明添加苜蓿皂苷未对瘤胃降解纤维素及半纤维素的能力产生不利影响．     

宏基因组学揭示AFB1对牦牛瘤胃微生物多样性及CAZy谱影响

采用宏基因组学方法探讨黄曲霉毒素B1(AFB1)对牦牛瘤胃微生物多样性及碳水化合物酶类(CAZy)功能谱的影响。试验设E1、E2两个试验组和对照组C,日粮中添加AFB1量分别为20μg·kg^-1、60μg·kg^-1和0。采集瘤胃液,提取DNA,进行宏基因组分析。结果表明,AFB1降低拟杆菌门及厚壁菌门的丰度,在属水平上较高水平的AFB1对普雷沃氏菌具有抑制作用。牦牛瘤胃中降解植物纤维素主要的CAZy是糖苷水解酶(GH)和糖基转移酶(GT)。AFB1对CAZy中6类酶以及3种纤维小体构成组分均产生影响,且高水平影响更大。研究揭示,AFB1降低瘤胃细菌多样性,影响CAZy功能。研究结果有利于探讨AFB1影响反刍动物瘤胃微生态的机制,为饲料安全使用及牦牛健康养殖和产品安全生产提供参考。     

堆肥土壤中黄曲霉毒素降解菌株的筛选及活性分析

为了筛选能稳定高效降解黄曲霉毒素B1(AFB1)的细菌,本试验以香豆素培养基进行初筛,AFB1标准品进行复筛,从动物粪便堆肥土壤中获得降解率最高的菌株,命名为SG16,并初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。通过研究各发酵组分的降解率,不同p H、温度、金属离子等因素下发酵液的降解活性,以及浓缩发酵液对发霉玉米中AFB1降解的效果。结果显示:各组分中发酵上清液降解率最高为80.62%,菌悬液和胞内液的降解率仅为14.32%和10.67%,温度、p H、金属离子、蛋白酶K均能影响其毒素降解活性,因此SG16产生的降解AFB1活性物质初步鉴定为胞外酶。浓缩发酵液能显著降低霉变玉米中AFB1的含量,这为生物防治饲料或粮食中的黄曲霉污染提供资源。     

能同时降解眍吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌筛选

旨在筛选能够同时降解呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌。先以呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的混合物为唯一碳源,以母猪粪便为材料,进行霉菌毒素降解菌的驯化富集培养,得到能够降解这3种霉菌毒素的混合菌群,逐一对分离到的细菌进行呕吐毒素降解能力检测,得到10株对呕吐毒素降解率达70％以上的菌株。进而检测这10株细菌对玉米赤霉烯酮的降解能力,得到4株对玉米赤霉烯酮降解率达70％以上的菌株。再检测这4株细菌对黄曲霉毒素B1的降解能力,结果有1株细菌（ODS-1）对黄曲霉毒素B1的降解能力达78．9％。革兰氏染色结果表明ODS-1为革兰氏阴性芽孢杆菌。研究获得的ODS-1对呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素均有较好降解效果,为进一步开发具有霉菌毒素降解作用的产酶益生素奠定了基础。     

能同时降解呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌筛选

旨在筛选能够同时降解呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的芽孢杆菌。先以呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素的混合物为唯一碳源,以母猪粪便为材料,进行霉菌毒素降解菌的驯化富集培养,得到能够降解这3 种霉菌毒素的混合菌群,逐一对分离到的细菌进行呕吐毒素降解能力检测,得到10 株对呕吐毒素降解率达70% 以上的菌株。进而检测这10 株细菌对玉米赤霉烯酮的降解能力,得到4 株对玉米赤霉烯酮降解率达70%以上的菌株。再检测这4 株细菌对黄曲霉毒素B1的降解能力,结果有1 株细菌(ODS-1)对黄曲霉毒素B1的降解能力达78.9%。革兰氏染色结果表明ODS-1 为革兰氏阴性芽孢杆菌。研究获得的ODS-1 对呕吐毒素、玉米赤霉烯酮和黄曲霉毒素均有较好降解效果,为进一步开发具有霉菌毒素降解作用的产酶益生素奠定了基础。     

青贮用拮抗黄曲霉并降解黄曲霉毒素菌株的筛选与鉴定

为筛选一株用于青贮的拮抗黄曲霉且能够降解黄曲霉毒素B1(AFB1)的芽孢杆菌菌株,本试验以香豆素为唯一碳源和能源进行菌株的初筛,以抑菌活性、AFB1降解率试验进行菌株的复筛。通过形态、生理生化特性以及16S r DNA序列分析对抑菌、毒素降解活性最好的菌株进行种属鉴定,并研究其对p H和温度的耐受性。结果表明:初筛获得45株能在以香豆素为唯一碳源和能源的培养基上生长的菌株,复筛发现N-1a对黄曲霉具有较强抑菌活性,对AFB1的降解率达到95%,并且对温度和pH具有良好的耐受性,最后鉴定N-1a菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

体外培养中硒对黄曲霉毒素B_1损伤凡纳滨对虾肝胰腺细胞的影响

本试验旨在研究体外培养中硒(Se)对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)肝胰腺细胞抗氧化能力的影响以及对黄曲霉毒素B1(AFB1)毒性的缓解作用。在体外培养肝胰腺细胞的基础上,设定含不同浓度(0、0.15、0.30、0.45、0.60、0.75μg/m L)Se的培养液,研究Se对肝胰腺细胞抗氧化能力的影响;另用浓度为1 600μg/L的AFB1侵染细胞,探究Se对AFB1毒性的缓解作用。结果表明:当Se浓度处于0~0.45μg/m L时,随着Se浓度的增加,丙二醛(MDA)含量呈现降低趋势,但各个浓度之间并没有显著差异(P0.05),过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活力随着Se浓度的增加而增强,Se浓度为0.45μg/m L时GSH-Px活力显著高于其他浓度(除0.30μg/m L)时(P0.05);当Se浓度处于0.45~0.75μg/m L时,随着MDA含量升高的同时CAT、GSH-Px活力下降。当细胞受到浓度为1 600μg/L的AFB1侵染后,随着培养时间的增加,MDA含量表现一直升高的趋势,同时CAT、GSH-Px活力都有一定程度的下降;当细胞受到浓度为1 600μg/L的AFB1和浓度为0.45μg/m L的Se共同作用后,随着培养时间的增加,MDA含量有一定程度的改善,CAT、GSH-Px活力得到一定程度的恢复。由此可见,在体外培养条件下,浓度为0.45μg/m L的Se有利于提高凡纳滨对虾肝胰腺细胞的抗氧化能力,且在一定程度上能缓解AFB1对肝胰腺细胞的毒性作用。     

黄曲霉毒素降解酶对饲喂含AFB_1日粮肉仔鸡生长性能及肝生化指标的影响

试验通过测定AA肉仔鸡生长性能及肝脏相关酶活指标,评价黄曲霉毒素降解酶(ADTZ)对黄曲霉毒素B1(AFB1)的解毒效果。试验选取624只1日龄AA肉仔鸡,公、母各半,随机分为3个处理,每处理8个重复,分别饲喂基础日粮、基础日粮+0.1 mg/kg AFB1、基础日粮+0.1 mg/kg AFB1+0.3%ADTZ。试验全程42 d。结果表明:肉仔鸡长期摄入含0.1 mg/kg AFB1的日粮生长性能显著降低(P<0.05)。AFB1可导致肉仔鸡肝脏相关代谢酶活异常,且严重影响肝脏抗氧化指标。在含有0.1 mg/kg AFB1日粮中添加0.3%ADTZ后上述指标均基本恢复到正常水平,表明ADTZ可改善AFB1对肉仔鸡生长性能及肝脏酶活的影响,基本消除AFB1的毒性。     

贝莱斯芽孢杆菌生物学特性及体外降解霉菌毒素研究

为了筛选一株抗逆性强、抑制致病菌、产酶及维生素等益生物质且可降解霉菌毒素的益生菌，对自主筛选得到的贝莱斯芽孢杆菌（BLS-1）进行最适温度、pH、生长曲线及产酶、抑菌能力、抗逆性研究，并通过发酵罐发酵，对发酵液中多种酶及维生素含量进行了考察；通过体外降解的方式考察BLS-1对多种霉菌毒素的降解能力。结果表明：自主筛选的贝莱斯芽孢杆菌BLS-1在pH 2.5～3.5、胆盐浓度0.1%～0.5%及胃液肠液环境中具备良好的耐酸、耐胆盐、耐胃肠液能力；最适温度37℃、最适pH为6、培养时间24～30 h时芽孢形成率最高，生长进入稳定期并于28 h达到芽孢量顶峰；菌株发酵液代谢产物及菌体对大肠杆菌具有中敏的抑制作用；发酵液中含有多种酶、维生素等益生物质，且对玉米赤霉烯酮（ZEN）、呕吐毒素（DON）、黄曲霉毒素（AFB1）、伏马毒素（FB）、赭曲霉毒素（OT）有降解作用。贝莱斯芽孢杆菌BLS-1生物学特性良好，抗逆性强，可抑制大肠杆菌，同时对玉米赤霉烯酮、呕吐毒素、黄曲霉毒素、伏马毒素具有降解作用。     

硒与中药对黄曲霉毒素B_1中毒肉鸡血液生化指标的影响

给10日龄试验肉鸡口服3周黄曲霉毒素B1(AFB1),观察AFB1对试验肉鸡血液生化指标的影响,并研究中药与硒对AFB1的颉颃效应。结果显示,在给药后各个时期,AFB1均对试验鸡血液生化指标有一定影响(P0.05)。而在试验时期基础日粮中分别添加的中药与硒,都具有颉颃AFB1对肉鸡血液生化指标总蛋白、白蛋白、丙氨酸转移酶、葡萄糖、总胆固醇指标作用的功效(P0.05)。     

共培养消除次黄嘌呤对胚胎发育的抑制作用

将昆明小鼠原核胚分别与不同贴壁程度的山羊原代输卵管上皮细胞（oviductal epithelial cells，OECs）共培养，确定体细胞的贴壁程度对共培养胚胎发育的影响。然后，采用高压液相色谱仪（HPLC）测定培养液中次黄嘌呤（hypoxanthine，HX）浓度，确定不同贴壁程度体细胞降解HX的能力。结果表明：与山羊原代0ECs共培养，能很好地促进小鼠胚胎发育，发育到囊胚的比例约为60％，其中贴满1d组的胚胎发育效果最好。在此基础上，检测培养液中HX浓度，发现贴满1d组培养液中HX浓度显著低于贴满3d和5d组（P〈0．05），表明体细胞降解HX的能力随培养时间的延长而下降。     

FSH和胰岛素对牛卵泡颗粒细胞长期培养的影响

McCoy’s5a为基础培养液添加硒、转铁蛋白、雄烯二酮、谷氨酰胺 ,对牛卵巢上大 (直径 >8mm)、中 (4mm <直径 <8mm)、小 (直径 <4mm)非闭锁卵泡的颗粒细胞进行无血清培养 ,研究添加不同浓度的促卵泡激素和胰岛素对颗粒细胞增生、分化和激素分泌的影响。结果 :FSH可以诱导颗粒细胞增生及雌二醇合成能力 ,颗粒细胞的雌二醇合成能力与生理浓度的FSH呈剂量依赖方式。胰岛素对大、中、小卵泡颗粒细胞增生和雌二醇分泌有促进作用。     

肝脏解毒酶对肉鸡生产性能、血液生化指标和肝脏黄曲霉毒素B_1残留的影响

本试验旨在研究肝脏解毒酶对肉鸡生产性能、血液指标和肝脏黄曲霉毒素B1(AFB1)残留的影响。选取1日龄AA肉仔鸡672只,随机分为7个处理组(A、B、C、D、E、F、G),每个处理8个重复,每个重复12只鸡。A、B、C组饲喂基础日粮+10%正常玉米,D、E、F、G组饲喂基础日粮+10%发霉玉米,B、E组以1 g/3L的比例在饮水中添加肝脏解毒酶,C、F组以1 g/5L的比例在饮水中添加肝脏解毒酶,G组以500 g/t的比例拌料加入肝脏解毒酶。试验期35 d。结果表明:发霉玉米能显著降低肉鸡前期的采食量(P0.05),显著降低35日龄血液中的葡萄糖和白蛋白水平(P0.05),显著增加35日龄肉鸡肝脏中的AFB1含量(P0.05);添加解毒酶对正常玉米组的生产性能、血清生化指标和肝脏中AFB1含量均未产生显著影响(P0.05);添加解毒酶能提高发霉玉米组的生产性能,增加21日龄的血液中血糖、总蛋白和白蛋白含量(0.05P0.10),显著降低肝脏中AFB1含量(P0.05);饮水添加高剂量解毒酶(1 g/3L)的效果要好于饮水低剂量(1 g/5L)添加和拌料添加(500 g/t)。因此,当饲粮受到霉菌毒素污染或有潜在污染威胁时,推荐在肉鸡饮水中以1 g/3L的剂量添加肝脏解毒酶。     

嗜热链球菌等六种微生物对AFB1降解能力的研究

霉菌毒素是霉菌产生的有毒的次级代谢产物,目前饲料中黄曲霉毒素B1(Aflatoxin B1,AFB1)污染呈现分布广、检出率高的趋势,为寻求一种高效、安全、经济和绿色的降解和脱毒方法,研究选择迟缓芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、罗伊氏乳杆菌、乳酸片球菌、嗜热链球菌、米曲霉6种饲料中允许添加的微生物分别与AFB1共培养,采用高效液相色谱-质谱联用法检测AFB1残留量和降解产物。利用筛选出的高效菌株,选择接种量、时间、温度和水分作为试验因素,在单因素试验的基础上,运用二次回归正交旋转组合设计方法进行优化,建立回归模型方程并筛选最佳发酵条件。结果显示,嗜热链球菌对AFB1的降解效果最好,降解率为80.00%,降解率显著(P0.05)高于其他几种菌;降解产物中含有AFM1,没有发现黄曲霉毒醇;最佳发酵条件为:发酵时间120 h、发酵水分65%、发酵温度44℃、接种量7×10~8CFU/g。说明嗜热链球菌可以用于降解饲料中的AFB1,为减少霉变饲料中AFB1的危害提供了理论依据和数据支撑。     

生物霉菌毒素吸附剂—霉必吸对AFB_1的脱毒效果及其对维生素的吸附性检测

为了检测霉必吸对黄曲霉毒素B1(AFB1)的脱毒性能和对饲料中维生素类物质的影响,采用全收粪法检测动物食用霉变饲料后,以霉必吸吸附后排除体外的黄曲霉毒素B1占食入总量的比例,评价脱毒效果;选择维生素C作为检测对象,测定霉必吸对维生素C的吸附性。实验结果表明添加2‰的霉必吸脱霉效果最好,AFB1的排出率可达72.3%,脱酶效果显著;霉必吸对维生素C并没有吸附性能,作为脱霉剂在饲料中添加不会影响饲料中维生素C的含量。     

2种矿土对黄曲霉毒素体外吸附效果评估

黄曲霉毒素(AF)对动物的危害较大,使用毒素吸附剂是目前普遍应用的去毒方法。试验研究p H、毒素质量浓度、吸附剂添加量及营养素对常见矿土类吸附剂蒙脱石和凹凸棒土吸附AF能力的影响。结果表明:毒素质量浓度较高(2~5 mg/L)时,蒙脱石对AF的吸附率高于凹凸棒土;增加毒素吸附剂的添加剂量,可提高AFB1吸附率,减少毒素危害的风险,且该蒙脱石的效果优于凹凸棒土;AFB1质量浓度为2 mg/L时,蒙脱石的吸附率仍可达到90%以上;维生素B1、维生素B2和赖氨酸的添加不影响AFB1的吸附率。     

促卵泡激素和胰岛素对牛卵泡颗粒细胞长期培养的影响

以McCoy’s5a为基础培养液添加硒、转铁蛋白、雄烯二酮、谷氨酰胺，对牛卵巢上大（直径〉8mm）、中（4mm〈直径〈8mm）、小（直径〈4mm）非闭锁卵泡的颗粒细胞进行无血清培养，研究添加不同浓度的促卵泡激素（FSH）和胰岛素对颗粒细胞增生、分化和激素分泌的影响。结果，FSH能诱导颗粒细胞增生及提高其雌二醇合成能力，颗粒细胞雌二醇的合成能力与生理浓度的FSH存在剂量依赖关系。胰岛素对大、中、小卵泡颗粒细胞增生和雌激素分泌有促进作用。     

稻草秸秆碱预处理及酶解糖化研究

探讨稻草秸秆经碱法预处理后酶解条件对酶解产糖的影响,并对酶解液进行高效液相色谱(HPLC)分析.结果表明:121 ℃,3%NaOH并添加1‰吐温-80预处理料,在32 h时综纤维素转化率最高为61%,而30℃处理料转化率仅为48%,对照组转化率为23%.HPLC分析显示,双酶(纤维素和木聚糖酶)酶解,121℃预处理后葡萄糖为459.6 mg/g,木糖为181.9 mg/g,30℃预处理后葡萄糖为327 mg/g,木糖为144.8 mg/g,未处理葡萄糖为229.3 mg/g;单酶(纤维素酶)酶解121℃预处理后葡萄糖为352.9 mg/g,30℃预处理后葡萄糖为191.2 mg/g.     

阿魏香豆素类对毛毕吸虫酶活性的影响

毛毕属吸虫为鸟类血吸虫,家鸭是毛毕属吸虫主要的终宿主之一。为了解阿魏香豆素类对家鸭毛毕吸虫影响机理,本试验采用测定毛毕吸虫同工酶的技术方法,以了解阿魏香豆素类对毛毕吸虫生化酶系的影响。结果显示,该药对苹果酸脱氢酶、6-磷酸甘露糖酶I、酸性磷酸酶有明显抑制作用,对磷酸葡萄糖异构酶的活性影响不明显。     

利用体外法研究盐藻粉对奶牛瘤胃发酵特性的影响

试验采用体外批次培养法研究在体外条件下添加不同剂量盐藻粉对奶牛瘤胃发酵功能的影响。结果表明：（1）与负对照组相比,添加盐藻粉可以降低培养液的pH值。9mg盐藻粉组显著增加培养液中MCP浓度：添加盐藻粉增加培养液中TVFA浓度,其中以添加18mg盐藻粉组效果最佳。（2）添加盐藻粉可以改善培养液中VA的累积状况,添加9mg盐藻粉组培养液VA浓度高于其他各组;可以明显提高培养液中β-胡萝卜素的浓度,并且随添加剂量的增加培养液中β-胡萝卜素浓度也增加。综合整个试验效果来看,添加9mg盐藻粉组对改善奶牛瘤胃发酵特性和提高培养液VA浓度较好。