固相补体结合反应检测马传贫抗体的试验

根据抗原可以结合特异性抗体和消耗补体的原理,我们应用固相补体结合反应,检测马传贫抗体,取得了一定效果。此法在兽医界还是一种新技术,目前尚未见应用于检测马传贫的报道。我们经过较长时间的试验证明,固相补体结合反应较原微量常规补反,具有操作简便、快速、特异性强、检出率高等优点,易于推广应用,现将试验情况报告如下。     

半微量补反诊断牛肺疫的试验

我们从1991年10月开始在铁路运输育肥牛检疫中,运用半微量补反(总量0.5毫升)诊断牛肺疫。经过8个多月的反复实验,在不改变《牛肺疫补体结合技术操作试行规程》(以下简称规程补反)判定标准的前提下,共检测育肥牛血清1677份;并对180份被检血清与规程补反进行了比较试验。试     

Richardson法贮存补体在牛肺疫补反中的效果观察

补体是一种效价很不稳定的具有酶活性的球蛋白。补反试验中补体的质量直接影响试验结果。为解决在牛肺疫监测、输出、输入检验中所用补体效价可靠,提高补体利用率,以获得准确的检测结果,笔者应用澳大利亚布病补反试验中Richardson(理查森)法贮存补体,并在牛肺疫补反中测定效价,同时用保存补体和新鲜补体对同批牛血清进行牛肺疫补反比较试验取得了满意效果。材料和方法1、牛肺疫补反抗原:成都生药厂产,批号8701—2。2、阳性血清和阴性血清:均系成都生药厂产,批号均为8601。被检血清:系采自珠日河牧场牛血清。     

两种补体结合反应对马来因阳性马骡血清抗体检测的比较

本文对鼻疽固相补体结合反应的条件进行了筛选,建立了术式。通过对417匹马来因点眼阳性马骡血清抗体检测证明,建立的固相补反的敏感性高,其阳性反应占29.5％,疑似反应占23％,阴性反应占47.5％;而常规补体结合反应则分别为14.7％、3.8％、81.5％。对10匹其它传染病血清和20匹马来因点眼呈阴性的健康马血清检测结果,除类鼻疽血清外,均呈阴性反应,证明固相补反具有一定的特异性。     

固相补反检测马乙脑抗体的研究

固相补体结合反应,是某种抗原结合特异性抗体,补体在固体介质中进行的一种反应。我们应用固相补体结合反应检测马流行性乙型脑炎抗体,取得了一定效果。此方法在兽医界还是一种新技术,目前尚未见应用于检测乙型脑炎的报道。我们经过较长时间     

内蒙古铁路兽医检疫站对牛肺疫检疫监测情况

内蒙古自治区铁路兽医卫生检疫总站下设的九个铁路兽医卫生检疫站,具体负责全区经铁路运输畜禽及其产品的检疫任务。现通过我区九个铁路兽医检疫站对经铁路运输的牛只进行牛肺疫补反检验的结果分析一下我区牛肺疫的近况。1980~1990年全区11年共检验牛118135头,检出可疑牛325头,     

SPA代替抗抗体在ELISA中检测猪旋毛虫抗体的可能性

据解放军兽医大学卫检系宋华宾、李爱民两同志实验:他们将ES抗原(5μg/ml)包被反应板,每孔0.1ml、4℃、12h,冲洗3次,每次2min,沥干;每孔加入被检血清0.1ml(1:100稀释),每块板同     

补体效价稳定性试验及其在检疫中的应用

补体结合反应(以下简称补反)在兽医实践中,对于牛肺疫、布氏杆菌病、牛副结核、马传染性贫血等病的诊断有较大的实用价值。在血清学反应中,补反的操作方法是比较复杂的。一些文献和农牧渔业部公布的《动物检疫操作规程》指出:“每次做补反正式试验前都要当日测定补体效价,否则由于使用补体量不准而影响试验结果。”我们     

应用抗原捕捉ELISA快速检测牛病毒性腹泻病毒

在96孔微量板中包被BVDV(Erns)单克隆抗体,加入被检血清,血清中的病毒特异性地与抗体结合,形成抗原抗体复合物.洗涤去除未结合的物质,加入酶标抗体连接物.再洗去未结合的酶连接物,加入底物后显色,加入终止液终止反应.用装有450 nm滤光片的酶标仪进行检测,通过计算S-N值,判定血清中BVDV抗原阴性、阳性.此法具有特异、快速、灵敏的特点.     

云南牛肺疫血清学调查

我们对云南省17个地州市66个县的6770份水黄牛血清、12个农场的1446份奶牛血清及4个种牛站的111头种牛血清采用农业部“牛传染性胸膜肺炎补体结合试验”及哈尔滨兽医研究所“牛肺疫微量凝集试验”方法进行血清学调查。并对部分血清学阳性牛作了病原分离及病理学检查.结果,用补反检查水牛、黄牛6770份,阳性275份,阳性率为4.1%:奶牛1446份,阳性8份,阳性率为0.6%;种牛111份,均为阴性。用微量凝集试验检查牛血清4500份(含补反阳性牛血清),仅检出2份为疑似.对部分补反阳性牛,进行了临床追踪观察,均不具有牛肺疫纤     

云南省红河州猪衣原体病血清学调查

1．1 被检血清对红河州12个县有猪繁殖障碍症状的部分乡、村、种猪场和农户的能繁母猪和种公猪采血分离血清，冷冻保存。1．2检测试剂及方法由兰州兽医研究所提供的衣原体微量IHA试验的抗原、对照阳性血清和阴性血清（批号均为200111），试验在96孔Ⅴ型聚苯乙烯板上进行，检测方法及判定标准按照试剂说明书的要求进行。     

比特犬弓形虫临床感染血清学检测报告

比特犬勇猛好斗,属比赛型犬,近年来很多养犬爱好者饲养比特犬用于比赛娱乐,2005年1~12月我们对到郑州牧专兽医院就诊的比特犬,随机采血用弓形虫IHA试验进行抗体水平检测,并进行了针对性治疗,报告如下。1材料与方法1.1被检样品从到郑州牧专兽医院就诊的比特犬中随机选取。1.2被检血清犬前肢静脉无菌采血,每犬采血3 mL,离心取血清备用。1.3诊断液弓形虫IHA抗原、阴性标准血清、阳性标准血清、稀释液,均购自中国农业科学院兰州兽医研究所。1.3器械5~200μL微量移液器、微量振荡器、电热恒温箱、96孔“V”型微量有机玻璃反应板。1.4方法1.4.…     

应用O-多糖抗原琼扩反应鉴别布氏杆菌自然感染和菌苗接种反应牛

按J.W.Cherwonogrodzky、.K.H.Nielsen法制备布氏杆菌O-多糖抗原,建立琼脂扩散反应。该法可鉴别布氏杆菌自然感染病牛和菌苗接种反应牛。本文报道了应用该法,在生产条件下进行检测表现出的特异性和敏感性。 材料和方法:牛血清样本采自萨拉托夫州11个农场6655份。其中248份来自布病清净场,961份为2个布病疫情场,另5408份来自7个本病情况不清的农场。采血的牛只,除对照组外均在不同时间内接种过布氏杆菌菌苗。 血清样本按以下方法检测:用O-多糖抗原的琼脂扩散试验;使用凝集、补反通用抗原的凝集反应和补体结合反应。琼扩反应操作用0.8％的俄罗斯产琼脂,融于10％氯化钠液中,然后均匀辅浇在9cm×12cm的玻板上,每板18ml。用打孔器打孔、中间1孔,周围6孔。每板可打72个周围孔和12个中心孔。71个周围孔内滴加待检     

液相阻断酶联免疫吸附法检测O型口蹄疫免疫抗体

1 原理 滴定好的固定量病毒抗原与被检血清首先在液相中反应,然后将抗原抗体复合物转移到包被好了的含口蹄疫（FMD）型特异性抗体的酶联免疫吸附（ELISA）板中,没有完全被血清抗体阻断的病毒抗原被ELISA板中的抗体捕获,亦与随后加入的豚鼠抗血清中的抗体结合。     

固相补体结合反应及间接血凝试验对鼻疽马骡诊断的比较研究

以18匹鼻疽马的病理组织学变化为主要依据,结合常规补体结合反应(CFT)的检查结果,确定了间接血凝试验(IHA)的判定标准,即血清凝集1:800或以上呈现“++”为阳性,1:400呈现“++”为疑似,1:200以下凝集为阴性反应。进而为比较固相补体结合反应(SP—CFT)与IHA检测鼻疽的敏感性,以CFT作对照,对内蒙和吉林两省(区)的1244匹马骤血清进行了检测,CFT、SP—CFT和IHA的阳性率依次为10.8％、16.8％和7.3％,阴性率为84.8％、71.2％和85.4％。用这三种血清学反应检查供作对照的20匹健康马血清及14匹其它6种传染病血清,均未出现影响结果判定的类属反应。1244匹马骡血清中鼻疽菌素试验呈阳性反应的血清540匹份,三种血清学反应阳性率依次为15.9％、30.9％和3.2％,阴性率依次为77.4％、44.8％和35.9％。由上可见,在三种血清学反应中,不论对大面积的鼻疽疫区,还是对鼻疽菌素试验阳性(M~+)马群的检疫,SP—CFT均表现了最高的敏感性,至于IHA的检出率,则较SP—CFT低,但可用于鼻疽的早期诊断,以弥补在此期间补体结合性抗体尚未出现,补体结合反应不能检出的缺陷。     

马传贫弱毒疫苗免疫马与自然病马沉淀及补反抗体耐热性差异的探讨

本试验测定了马传贫弱毒疫苗免疫马与传贫病马琼脂扩散沉淀抗体(沉淀抗体)及补体结合反应抗体(补反抗体)活性的耐热曲线。证明免疫马的抗体较传贫病马的耐热性差。64℃水浴15分钟后,免疫马血清沉淀抗体完全丧失反应活性,而传贫病马血清一般多能保持阳性反应。用65℃水浴15分钟处理琼扩阳性反应血清,结果传贫病马血清142份中的128份仍为琼扩阳性,传贫病马注苗后的血清5份均呈琼扩阳性;免疫马血清37份则全部转为阴性反应。65℃水浴15分钟后,免疫马血清补反抗体完全丧失反应活性,而传贫病马血清仍可呈阳性反应。用65℃水浴15分钟处理补反阳性血清,结果传贫病马血清40份、强毒接种马血清2份的补反仍保持阳性;免疫马血清42份则均转为阴性。     

用酶联免疫吸附试验间接法检测猪瘟抗体

酶联免疫吸附试验间接法检测猪瘟抗体系用纯化抗原包被聚苯乙烯微量反应板,洗涤三次;加入待检血清,孵育后洗涤三次;再加入按工作效价稀释的HRP—SPA(辣根过氧化物酶标记的葡萄球菌蛋白A),孵育后洗涤三次;用OPD(邻苯二胺)配制酶的底物溶液。如血清中有猪瘟抗体存在,     

酶标抗体反应诊断旋毛虫病

酶标抗体反应广泛用于医学、工业和农业的许多部门。该反应的原则系统如下:在聚乙烯制的免疫试验反应板的圆孔或小试管中(它们起抗原和抗体的载体作用),先后加入液体抗原、假定存在抗体的被检血清、结合物和底物。结合物乃是酶(辣根过氧化氢酶)标记的抗猪球蛋白抗体,而底物则是0.08%5-氨基水杨酸与0.05%过氧化氢的9:1混合物。构成的抗原抗体结合过程,根据底物被结合物的分解而查明,特征是被染成暗褐色,或通过被检血清的滴度和测定底物的光密度(用光比色计、分光光度计)来确定。     

应用正向间接红细胞凝集试验检测猪瘟免疫抗体

猪瘟免疫抗体的检测长期以来没有一种适合于基层应用的方法。琼脂扩散试验和免疫萤光试验虽能测得抗体，但是抗体效价的高低不能判定；酶联免疫试验能够判定抗体效价的高低，但由于操作程序的繁琐而不能在基层广泛应用。1992年3月——1993年6月我们应用兰州兽医研究所馈赠的“猪瘟正向间接血凝诊断液，在郑州地区9个外贸猪场检测213份猪瘟免疫血清，现将结果报告如下：ha验材料1．l检测血清213份被检血清采自郑州市9个猪场免疫后5个月的猪只。1．2诊断液及对照血清均由兰州兽医研究所提供。猪瘟正向间接血凝诊断液凝集效价为回：8192，批号…     

ELISA检测鸡新城疫病毒特异性IgM抗体的研究

以新城疫病毒单克隆抗体包被板,用10％小牛血清-PBS封闭后,捕获尿囊液中的新城疫病毒作固相抗原.在此板上应用酶标抗鸡IgM单克隆抗体进行间接ELISA试验检侧鸡血清中新城疫病毒的特异性IgM抗体.试验证明该方法特异性强、敏惑性高.兔抗新城疫病毒阳性血清可特异性阻断反应,将新城疫病IgM阳性血清用2-ME处理可使ELISA反应呈阴性,与禽源多杀性巴氏杆菌鸡IgM阳性血清、鸡传染性支气管炎病毒IgM阳性血清无交叉反应.该试验可检测到La Sota免疫后3天鸡血清中的特异性IgM,对鸡新城疫病毒IgM阳性血清的检测效价可达1:320以上,并可检测到临床新城疫病鸡血清中的特异性IgM抗体.