伪狂犬病毒作为疫苗载体的研究进展

随着生物技术的快速发展,对伪狂犬病病毒的研究也不断深入,特别是伪狂犬病病毒作为疫苗病毒载体成为人们研究的一个热点。利用基因工程技术使伪狂犬病病毒中的毒力基因失活,从而致使病毒毒力减弱,但其病毒粒子仍然保持着良好的抗原性,并能有效地刺激机体产生免疫反应,将重组的病毒粒子同插入的外源基因一起在动物体内表达,既安全又能起到预防多种病原的作用。笔者就伪狂犬病病毒的主要研究进展及其在寄生虫上的应用前景进行了综述。     

伪狂犬病病毒潜伏感染的研究

论述了近折来在伪犬病病毒潜伏感染方面研究的主要进展，其中包括三个部分，即伪狂犬病病毒感染的分子机理，伪狂犬病病毒潜优感染的诊及伪狂犬病病毒基因工程缺失疫苗的潜伏感染。     

伪狂犬病病毒分子生物学研究新进展

近年来，随着分子生物学研究的深入，对伪狂犬病病毒的研究取得很显著的进展。本文对伪狂犬病病毒的特性，基因结构特点，病毒糖蛋白种类和作用以及伪狂犬病病的毒力因子，基因工程疫苗研究现状进行了较详细综述，对同道者研究伪狂犬病病毒有重要的指导作用。     

伪狂犬病病毒分子生物学研究新进展

近年来，随着分子生物学研究的深入，对伪狂犬病病毒的研究取得很显著的进展。本文对伪狂犬病病毒的特性、基因结构特点。病毒糖蛋白种类和作用以及伪狂犬病病的毒力因子、基因工程疫苗研究现状进行了详细综述，对同道者研究伪狂犬病病毒有重要的指导作用。     

伪狂犬病病毒核酸检测能力验证样品制备及其应用

能力验证样品的制备是实验室病原核酸检测能力验证的难点和核心内容,本研究以伪狂犬病病毒南阳株细胞培养物为材料,通过高温处理的方式灭活病毒,研制了伪狂犬病病毒核酸检测的能力验证样品,经均匀性和稳定性检验证实样品达到中国合格评定国家认可委员会对能力验证样品的要求。利用能力验证样品,设计和实施了"BIQTC-2013-01《猪伪狂犬病病毒核酸检测》能力验证计划",共有7家实验室参试,验证满意率达100%。伪狂犬病病毒核酸检测能力验证样品的研制和在能力验证计划中的应用,为评估我国各级实验室伪狂犬病病毒核酸检测的能力提供了较有价值的借鉴和参考。     

猪伪狂犬病病毒鲁A株的分离鉴定

从山东省某些猪场疑似猪伪狂犬病发病仔猪的脑及内脏中分离到多株病毒，对其中一代表毒株进行了全面鉴定。该分离毒株在兔肾原代细胞(RK)上和鸡胚成纤维细胞(CEF)上连传5代．均出现典型细胞病变．再接种于RK-13细胞、BHK-21细胞、Vero细胞、PK15细胞和143TK细胞，均出现典型细胞病变；在RK-13细胞上的TCID50为10^-0.52/0．1mL；在电镜下可见到典型的伪狂犬病病毒粒子；对氯仿、乙醚敏感，56℃30min灭活；能被伪狂犬病病毒标准阳性血清中和；病毒接种于家兔和小鼠，均出现典型伪狂犬病症状与病变；提取所分离病毒的DNA作为模板。应用特异性引物，以PCR方法可扩增出伪狂犬病病毒gD基因中272～534nt之间262bp长的特异性片段。上述结果证明，所分离病毒为猪伪狂犬病病毒，并将其命名为猪伪狂犬病病毒鲁A株。     

重组伪狂犬病病毒疫苗的研究进展

随着分子生物学技术的发展,人们对伪狂犬病病毒的分子学特征研究也逐步深入,根据基因工程原理对伪狂犬病病毒的基因组进行改造,从而构建了多种含有不同外源基因的重组伪狂犬病病毒疫苗.这种疫苗不仅可以为猪的伪狂犬病提供保护,同时还可以产生针对外源保护性抗原的特异性免疫反应,具有广阔的应用前景.笔者在本文中系统地对近些年所报告的多种重组伪狂犬病病毒疫苗的安全性和免疫原性就行了综述,以期为伪狂犬病病毒新的基因工程疫苗的研制提供一定的参考.     

猪伪狂犬病病毒LA株的分离鉴定

从辽宁省某猪场大批死亡的新生仔猪脑及内脏中分离到多株病毒，通过初步验证后选择其中一代表毒株进行了鉴定。该病毒株在PK-15细胞上连续传12代均出现典型的细胞病变，用适应PK-15细胞的病毒接种Veto细胞、猪肾传代细胞IBRS-2及SPF鸡胚成纤维细胞均出现典型的细胞病变。在电镜下可见到典型的伪狂犬病病毒粒子。该病毒对氯仿、乙醚敏感，在pH5．0-9．0下稳定，56℃30分钟即可灭活该病毒。该病毒能被伪狂犬病病毒标准阳性．血清中和。取处理后的病料上清液和传代病毒接种家兔均出现典型的伪狂犬病症状。用所分离病毒提取的DNA及培养病毒液经简单的预处理后作为模板，应用特异性引物进行PCR能扩增出伪狂犬病病毒1240bp的gD基因的特异性片段。结果表明，所分离病毒为伪狂犬病病毒，并将该毒株命名为猪伪狂犬病病毒IA株。     

伪狂犬病病毒YN株与闽A株、苏联林交叉对流免疫电泳试验

应用豚鼠制备伪狂犬病病毒高免血清,运用醋酸透析法制备伪狂犬病病毒沉淀抗原,通过交叉对流免疫电泳试验,证明伪狂犬病病毒YN株与闽A株、苏联株之间有共同抗原。本试验建立的对流免疫电泳方法,可供我国开展伪狂犬病的诊断研究参考。     

伪狂犬病病毒变异株gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

为制备伪狂犬病病毒变异株gE蛋白的单克隆抗体,PCR扩增伪狂犬病病毒gE蛋白主要抗原表位区的基因片段,并将其克隆至原核表达载体p Cold-TF。经1 mmol/L IPTG低温诱导,表达了约90 k Da的gE融合蛋白。融合蛋白用镍离子金属亲和层析柱纯化后,免疫6周龄BALB/c雌性小鼠,经细胞融合和筛选,获得了2株稳定分泌抗gE蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞(5B2和6E6)。间接免疫荧光试验(indirect immunofl uorescence assay,IFA)显示2株单克隆抗体均能与PRV变异株(JS-2012)反应,但与gE缺失的疫苗毒Bartha-K61株无反应。Western blot结果显示5B2和6E6与gE蛋白不反应,提示2株单克隆抗体针对的可能是gE蛋白的构象表位。本研究获得的gE蛋白单克隆抗体为伪狂犬病病毒变异株的鉴定与功能研究以及野毒株和疫苗株的鉴别诊断提供了良好的工具。     

伪狂犬病病毒的分子生物学研究进展

伪狂犬病病毒的分子生物学研究进展黄银君，周育彪（中国农业科学院兰州兽医研究所，兰州７３００４６）伪狂犬病病毒（ＰＲＶ）是伪狂犬病（又叫Ａｕ－ｊｅｓｚｋｙ′ｓ病）的病原，为ａ疱疹病毒，分类名叫猪疱疹病毒—１型。伪狂犬病最早是在牛上发现的，现在则成为猪的...     

我国猪伪狂犬病的最新流行动态与防控措施

1伪狂犬病最新流行动态伪狂犬病病毒(PRV)是一个不可忽视的致病因子,造成伪狂犬病(PR)在全国大范围的传播流行,伪狂犬病病毒起到了推波助澜的作用,而且使猪病的感染流行复杂化。近年来一些猪场猪伪狂犬病免疫失败,猪伪狂犬病与其他疫病的混合感染不断涌现,使猪伪狂犬病的防控形势面临新的挑战。伪狂犬病并没有消失,而     

种猪场猪伪狂犬病防治经济学评价分析

猪伪狂犬病（PR）是由病毒引起的，猪繁殖障碍性疾病，曾经在世界范围内流行，给养猪业造成巨大损失。20世纪90年代以来，欧美畜牧业发达国家采用疫病监测和净化措施，先后消灭或控制了猪伪狂犬病。为摸索在我国现有条件下，借鉴和应用发达国家防治猪伪狂犬病的技术措施经济学合理性和可行性，我们对我省3家采用种猪群猪伪狂犬病疫苗免疫接种和检疫净化技术措施收到了较为理想防治效果的种猪场，进行了疫病防治成本和效益经济学分析。     

伪狂犬病特点及其净化关键点

从2019年开始，全国健康后备母猪供应缺少，静默生产减少了疫苗免疫的频率，导致新组群猪场甚至核心群处于伪狂犬病阳性状态，文章根据伪狂犬病病毒特性谈谈伪狂犬病的特点，为伪狂犬病控制及净化提供理论基础。     

猪伪狂犬病病毒潜伏感染检测方法研究进展

猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的 ,是以仔猪的发病死亡和怀孕母猪繁殖障碍为特征的猪病 ,是危害养猪业的重要疫病之一。该病在世界上分布广泛 ,并有不断蔓延扩大的趋势。任何年龄的猪在耐过伪狂犬病病毒急性感染后均能形成潜伏感染 ,并可在体内终生潜伏 ,且不表现临床症状 ,在一定条件下 ,潜伏状态的病毒能被激活 ,引起复发性感染并向外散毒。这种伪狂犬病病毒潜伏 -激活循环机制决定了伪狂犬病病毒在猪群中的永远存在。猪一旦感染必须视为伪狂犬病病毒散播的潜在来源。因而对潜伏感染猪的剔除对于根除伪狂犬病病毒感染具有重要意义。国内外对潜伏感染的检测方法主要有鉴别血清学诊断、潜伏病毒的激活与检测、组织块培养技术、核酸探针技术以及PCR技术。本文主要综述了这几种方法的研究情况 ,并比较了其优缺点     

伪狂犬病病毒广西B、W株gE基因的扩增、克隆及序列分析

在已鉴定了的伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）11种糖蛋白中，gE是其中十分重要的一种非必需糖蛋白，是伪狂犬病病毒重要的毒力基因，它在介导感染细胞的融合，病毒在细胞间的扩散，病毒粒子的释放等方面均起着十分重要的作用，尤其是在影响伪狂犬病病毒神经嗜性和毒力方面的作用。利用PRV gE基因缺失疫苗，结合血清学方法可以区分疫苗接种猪和野毒感染猪。     

猪伪狂犬病的血清学诊断

在国内,猪伪狂犬病危害猪群是严重的,仔猪有高发病率,成年猪隐性经过,症状较轻微,为潜在的隐性传染源。用血清学方法检测猪血清中伪狂犬病病毒抗体,在有效诊断此症方面有着极为重要的现实意义。文章应用间接ELISA方法检测猪伪狂犬病病毒抗体,调查了解猪伪狂犬病的流行病学特点,就科学防治此病做技术指导。     

猪伪狂犬病病毒在几种细胞中增殖情况的比较

猪伪狂犬病（Pseudorabies，PR）是由伪狂犬病病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的以发热和脑脊髓炎为主要特征的急性、发热性传染病。该病主要以成年妊娠母猪流产、死产、木乃伊胎、新生仔猪急性死亡及3周龄以内的仔猪表现神经症状为主要特征。一般幼龄仔猪发病率和死亡率可高达100％。因此对猪伪狂犬病的预防和控制，目前最根本的措施是疫苗接种，而疫苗效果好坏主要取决于抗原浓度。为了制备出浓度高的抗原，我们对猪伪狂犬病病毒在5种细胞中的增殖情况进行了试验，现报道如下：     

我国种猪场进行伪狂犬病的净化势在必行

猪伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起猪的一种病毒性疾病，是我国规模化猪场的主要疫病。猪伪狂犬病的危害主要表现在母猪的繁殖障碍、仔猪的高死亡率和呼吸道疾病，是目前我国规模化猪场繁殖障碍和呼吸道疾病的主要病因之一。     

伪狂犬病防制策略及我国应采取的对策

伪狂犬病病毒（PRV）是α疱疹病毒属的一个成员，为伪狂犬病的病原，猪是伪狂犬病病毒的自然宿主，该病原一旦感染猪，则产生潜伏感染，其致死率随猪年龄的增加而降低。由于伪狂犬病的暴发引起畜牧业的巨大经济损失，许多国家都进行免疫接种预防该病，而该病在不同的国家地区危害不同，所造成的经济损失也不一样，另外各国的经济发展不平衡，因此对该病所采取的防制策略亦有所不同，文章综述了美国，日本，欧共体及其成员国之间对伪狂犬病采取的防制策略及取得的进展，并根据我国伪狂犬病的流行现状，提出了应采取的控制策略。