中药体外抗柔嫩艾美球虫的研究

根据中兽医学理论和鸡球虫病的特点选用中药组方，进行体外抗球虫试验。结果：所用中药组方具有明显抑制未孢子化卵囊的孢子化过程，且对巳孢子化卵囊具有杀灭作用。     

白头翁不同提取物及复方抗鸡柔嫩艾美耳球虫研究

以存活率、相对增重率、盲肠病变记分、卵囊值和抗球虫指数为判定指标,考察白头翁不同提取物及复方对鸡柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊致病性的影响(体外试验)和抗鸡柔嫩艾美耳球虫感染效果(体内试验)。体内、体外试验结果均表明,白头翁不同提取物及复方均能提高相对增重率,降低盲肠病变计分和卵囊值。抗球虫指数(ACI)检测表明,白头翁不同提取物及复方对球虫孢子化卵囊有微弱的抑杀效果,对鸡柔嫩艾美耳球虫感染预防效果较差,不宜作为鸡柔嫩艾美耳球虫病的预防和治疗药物。     

复方海南霉素的药效试验

从某鸡场发生球虫病鸡的粪便中分离出柔嫩艾美耳球虫卵囊，经鸡体繁殖、复壮，待球虫孢子化后，配成100000个／mL的球虫卵囊液，各取一mL分别感染随机分为9组的16日龄健康岭南黄鸡苗，通过饲喂配有不同剂量抗球虫药。结果表明，复方海南霉素能提高抗球虫效果。     

茶多酚抗柔嫩艾美尔球虫的效果及作用机制

根据鸡球虫病的特点,研究不同浓度水平的茶多酚(tea polyphenol)对未孢子化以及完全孢子化Emeria tenella球虫卵囊的作用效果;并通过在基础日粮中添加0.02%、0.04%和0.06%不同浓度水平茶多酚的肉鸡饲养试验,初步研究茶多酚抗E.tenella球虫的作用机制。结果表明,茶多酚具有明显抑制未孢子化E.tenella球虫卵囊成熟的作用,且茶多酚浓度越高,抑制效果越好;茶多酚对孢子化卵囊具有一定杀灭作用,并可提高肉鸡免疫器官指数,增强其免疫功能和抗炎作用,其中以添加0.04%茶多酚的试验效果较好。     

柔嫩艾美球虫pEtK2抗原基因的克隆表达及其表达产物的抗原性分析

应用RT—PCR技术从纯化的柔嫩艾美球虫孢子化卵囊子孢子中克隆了pEtK2抗原基因，并进行了原核表达和抗原性分析，同时用MTT法检测了重组蛋白对球虫耐过鸡淋巴细胞的刺激效果。结果显示，克隆的pEtK2基因全长1464bp，具有一个完整的开放阅读框，编码487个氨基酸，具有多个T细胞表位。重组蛋白诱导5h后表达量最多，分子质量约55ku，占菌体总蛋白的32％。纯化的重组蛋白能够刺激球虫耐过鸡T淋巴细胞增殖，可作为球虫基因工程疫苗或DNA疫苗的候选基因。     

复方球虫散对人工感染鸡球虫病治疗效果的临床试验

为科学、客观地评价复方球虫散对实验性鸡球虫病的防治效果,采用人工接种柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的方法复制鸡球虫病,使用纯中药组方复方球虫散进行鸡球虫病的临床疗效试验,观察并计算复方球虫散对试验鸡的死亡率、相对增重率、病变值和卵囊值的影响,并求出复方球虫散的抗球虫指数(ACI).试验结果表明:复方球虫散按1.0%拌料混饲,对鸡球虫病有较好的治疗效果.     

柔嫩艾美耳球虫西宁分离株的药物敏感性试验

比较地克珠利、磺胺氯吡嗪钠、磺胺喹噁啉、氨丙啉、复方磺胺对甲氧嘧啶等5种常用抗球虫药对人工感染2.4×105个柔嫩艾美耳球虫孢子化卵囊的鸡的作用效果.结果表明,地克珠利抗球虫指数(ACI)为165.7,抗球虫效果良好;氨丙啉抗球虫指数(ACI)为126.7,抗球虫效果中等;磺胺喹噁啉、磺胺氯吡嗪钠、复方磺胺对甲氧嘧啶抗球虫指数(ACI)分别为115.7、75、55.8,无抗球虫效果.     

净球散对鸡球虫病的疗效试验

以１５日龄肉仔鸡为试验动物，研究了纯中药制剂净球散对鸡柔嫩艾美耳球虫病的疗效以及对卵囊孢子化影响。结果表明：在饲养中添加１％的净球散具有良好的抗球虫效果，抗球虫指数（ＡＣＩ）达到１８７。用５０％、１００％的净球散煎剂浸泡７ｄ后，再用２．５％的重铬酸钾培养３ｄ，鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊孢子化率分别为６５．４２％、６６．２３％，抑制作用明显，说明净球散是一种较理想的抗球虫中药制剂。     

外源性一氧化氮对鸡柔嫩艾美尔球虫的作用

用酸化亚硝酸钠作为一氧化氮(NO)供体处理新收取的柔嫩艾美尔球虫未孢子化和已孢子化卵囊,来探讨外源性NO对球虫卵囊的抑杀作用。另外通过内服亚硝基谷胱甘肽(GSNO)试验来观察外源性NO对球虫病的防治作用。结果表明,酸化亚硝酸钠溶液(pH=1)对球虫卵囊的孢子生殖具有明显的抑制作用,20mmol/L酸化亚硝酸钠溶液对卵囊孢子生殖的抑制率可达100%;但不经酸化的亚硝酸钠溶液和相同pH的盐酸溶液对卵囊的孢子生殖没有明显影响。经20mmol/L以上浓度酸化亚硝酸钠处理的孢子化卵囊也失去了对雏鸡的致病力,但直接内服GSNO溶液则没有明显的抗球虫作用。这提示外源性NO对鸡柔嫩艾美尔球虫未孢子化和孢子化卵囊均有抑杀作用,但直接内服没有明显的抗球虫病作用。     

柔嫩艾美尔球虫和巨形艾美尔球虫混合感染致病性研究

材料和方法１．试验动物ＡＡ肉鸡，购自江苏省家禽研究所，出壳后运回实验室饲养在杀灭卵囊的笼具中至１５日龄，经数次粪检未见卵囊后供试验。２．球虫卵囊为本教研室分离鉴定的纯种柔嫩艾美尔球虫和巨形艾美尔球虫孢子化卵囊，４℃保存。３．试验分组挑选体况相近的１５日龄ＡＡ肉鸡５０羽，分成５组。第１组为不感染对照组；第２组为单种球虫感染组，每羽经口接种柔嫩艾美尔球虫孢子化卵囊１万个；第３、４和５组为混合感染组，每羽分别同时感染柔嫩艾美尔球虫和巨形艾美尔球虫孢子化卵囊：０．５＋５万、１＋１０万和２＋２０万个。４．…     

安氏隐孢子虫肌动蛋白部分编码基因的表达及免疫保护性

以筛选安氏隐孢子虫T7噬菌体展示文库获得的肌动蛋白（CA42）部分编码基因的序列设计特异性引物,扩增目的基因CA42,构建重组表达载体pET-28a-CA42,通过大肠杆菌BL21的诱导表达,产物经SDS-PAGE和Western-blotting鉴定。然后纯化重组蛋白,免疫BALB／c进行体液和细胞免疫水平的检测,并观察重组蛋白对微小隐孢子虫的交叉保护性效果。结果显示,成功构建重组原核表达质粒pET-28a-CA42,Western-blotting显示重组蛋白约为19ku,能被安氏隐孢子虫免疫小鼠的多克隆抗体识别。重组蛋白免疫BALB／c小鼠的抗体水平差异显著（P〈0．05）,CD4^＋T淋巴细胞数差异均显著,CD4^4／CD8^＋T淋巴细胞数的值与佐剂对照组和空白对照组相比差异均显著（P〈0．05）。各组小鼠经接种微小隐孢子虫卵囊后,试验组与各对照组相比卵囊减少率为32．2％,差异均显著（P〈0．05）。结果表明,成功表达了重组安氏隐孢子虫肌动蛋白,纯化的重组蛋白具有一定的免疫原性和交叉保护性。     

复方中药制剂的抗炎及毒性作用检测

采用小鼠耳廓肿胀法和小鼠肉芽组织增生法研究治疗奶牛隐性乳房炎的复方中药制剂的抗炎效果;采用改进Karber法,以半数致死量(LD₅₀)作为评价急性毒性的指标,研究复方中药制剂的急性毒性作用。结果表明,复方中药制剂的低、中、高剂量组对小鼠耳廓的肿胀度(分别为10.41、9.26、8.82 mg)与对照组(生理盐水)的肿胀度(12.52 mg)相比差异显著(P<0.05);复方中药制剂组小鼠的棉球致肉芽肿增重分别为11.21、10.71、8.83 mg,与对照组增重(12.63 mg)相比差异显著(P<0.05)。在急性毒性试验中无小白鼠死亡,LD₅₀>60000 mg/kg体重。研究表明复方中药制剂能有效对抗急性和慢性炎症,抗炎效果显著,且该药安全可靠,可作为临床用药。     

中药对隐性乳房炎奶牛细胞免疫功能的影响

选用黄芪、白芪、当归、川芎、蒲公英、王不留行、益母草等中药组方，对患隐性乳房炎泌乳黑白花奶牛进行阶段性添加试验。测定淋巴细胞转化指数、中性粒细胞吞噬力、红细胞C3b花环、免疫复合物花环及花环促进率和抑制率，并检测隐性乳房炎转阴情况。结果表明，隐性乳房炎患牛细胞免疫功能降低。用药后细胞免疫功能明显提高，隐性乳房炎显著好转，有效率达83%。     

复方中药制剂“增乳健牛散”对奶牛隐性乳房炎主要病原菌的药敏试验

根据中兽医学理论和中药特性,组成复方中药制剂"增乳健牛散"4个不同的方剂,制备水煎液对奶牛乳房炎的主要病原菌进行抑菌试验。结果表明,4个不同的方剂水煎液都有抑菌效果;对金黄色葡萄球菌和无乳链球菌方剂3为极敏,其他3个不同的方剂为高敏;方剂3抑菌作用最强。     

Chemically and genetically immunocompromised mice are not more susceptible than immunocompetent mice to infection with Cryptosporidium muris

The prevailing paradigm is that immunosuppressed individuals are more susceptible to infection and are at higher risk of infection from Cryptosporidium oocysts if present in drinking water. To test this hypothesis, three immune conditions were examined: genetically immunocompromised T cell deficient CD-1 nude mice, B and T cell deficient Fox Chase CB-17/IcrClB SCID mice, and chemically immunosuppressed C57Bl/6 mice. Chemical immunosuppression was induced with a single subcutaneous injection of methylprednisolone acetate (MPA) at 600 mg/kg. The MPA immunosuppressed C57Bl/6 mice were characterized by a sustained decrease in circulating CD3, CD4 and CD8 T-lymphocytes of greater than 80% and a similar decrease in B-lymphocytes. A sharp rise in circulating mature segmented neutrophils followed MPA injection, dropping sharply after 10-14 days, mirroring the decrease in lymphocytes. The cessation of oocyst production after MPA was not accompanied by a radical rise in circulating CD3 or CD4 T-lymphocytes, but rather a rise in CD8 T-lymphocytes. The ID50 for the MPA immunosuppressed C57Bl/6 mice was 122 oocysts, whereas the ID50 for the C57Bl/6 immunocompetent group was 44. The genetically immunocompromised mice showed similar differences. The ID50 for CD-1 nude mice was 166 oocysts compared to 64 in CD-1 immunocompetent mice. For Fox Chase CB-17/IcrClB SCID and the immunocompetent CB-17 mice, the ID50's were 83 and 60 oocysts, respectively. These results suggest that the lack of an immune response does not increase the ability of C. muris to establish a productive infection and produce oocysts.     

3种藏药复方抗ORFV作用研究

将岩青、轮叶棘豆等3种藏药材按一定比例配成复方,采用乙醇提取法进行提取,将浓缩药液用细胞维持液配制成1g／L的药液,并根据对兔肾细睁（PRK）安全浓度的测定结果,稀释成不同梯度浓度,分别与脓疱皮炎病毒（ORFV）加入到已培养24h的单层PRK中,通过M1TI’法测定OD值,分析其对ORFV病毒增殖的影响。经回归分析,复方药液在7．81—62·5mg／mL浓度范围内,药物浓度与活细胞存在线性关系,对病毒增势有显著的抑制作用（P〈0·05）。表明藏药材复方药液具有抗脓疱皮炎病毒感染的作用。     

中药复方对山羊的影响:Ⅳ·瘤胃内环境参数

试验旨在研究中药复方对山羊瘤胃内环境参数的影响。选择6头健康的体重相近的安装有永久性瘤胃瘘管的周岁大足黑山羊羯羊,按3×3重复拉丁方试验设计。对照组饲喂基础日粮,2个处理组分别在基础日粮上给每头羊日喂15 g复方Ⅰ和复方Ⅱ(由藿香、苍术、黄柏和生石膏等中药按不同比例组成)。结果表明:2种复方对山羊瘤胃pH及氨氮浓度均无显著影响(P>0.05);复方Ⅰ能极显著提高山羊瘤胃内丁酸浓度及丁酸占总挥发性脂肪酸的比例(P<0.01),显著提高山羊瘤胃内乙酸和总挥发性脂肪酸等浓度(P<0.05),而复方Ⅱ仅能显著提高山羊瘤胃内丁酸浓度(P<0.05)。结果提示,2种复方均能改善山羊瘤胃内环境状况,且复方Ⅰ作用效果优于复方Ⅱ。     

中药复方对动物机体免疫功能影响的研究进展

中药复方现代化研究取得了一定的成效。研究证明,中药复方可以通过免疫调节作用增强机体免疫力,进而预防与治疗多种疾病。就中药复方对免疫器官、细胞免疫、体液免疫等方面的影响作一综述,并提出将传统中医药理论及经验与现代医药学理论相结合,应用现代科学技术研究、挖掘中医药学的科学内涵,已成为当前非常重要而紧迫的课题。     

纯中药制剂"球宁"对鸡柔嫩艾美尔球虫病的疗效试验

用纯中药制剂球宁(由青蒿、仙鹤草、硫磺等组成)防治鸡球虫病。结果表明纯中药制剂球宁对鸡球虫病有良好的防治作用，以1％添加剂量组最好，ACl为199．6．并能提高增重率。