CVCC菌毒种综合信息化管理系统的建立与应用

正提高保藏机构的保藏、服务能力,对确保病原微生物资源的安全管理、高效共享具有重要意义。在信息化技术日新月异的今天,微生物资源保藏、管理也面临着由传统管理模式向信息化管理模式转型的挑战。中国兽医微生物菌种保藏管理中心(以下简称为CVCC)资源管理工作包括实物资源管理(销售管理、库存管理)和数据资源管理。之前,CVCC数据信息管理依靠菌(毒)种共享数据库,解     

兽医微生物菌(毒、虫)种进出口和使用审批技术审核管理模式的建立及效果评价

为了让申请人进一步明确申请程序和申报资料要求,笔者依据《病原微生物实验室生物安全管理条例》《动物病原微生物菌(毒)种保藏管理办法》和《兽药管理条例》等现有法律法规,建立了兽医微生物菌(毒、虫)种进出口和使用审批的技术审核要点,制定了《兽医微生物菌(毒、虫)种进出口和使用审批申请表》标准填写规范。该规范使得兽医微生物菌(毒、虫)种进出口和使用审批的申报退回率下降了10.6%,提高了兽医微生物菌(毒、虫)种进出口和使用审批以及委托保藏的申报效率。     

1株鹦鹉热衣原体的冻干、鉴定和分子分型研究

从国家兽医微生物菌(毒)种保藏中心领取1支鹦鹉热衣原体CVCC2410进行冻干和鉴定。将衣原体经卵黄囊接种SPF鸡胚进行复壮和传代，收获卵黄囊膜研磨后分装、冻干，并对冻干衣原体进行了无菌检验、真空度测定、染色特性和形态观察、特异性检验、16S rRNA鉴定、分子分型、衣原体含量测定。结果表明冻干衣原体CVCC2410 2203为C型鹦鹉热衣原体，含量为10^5.50ELD₅₀/0.2mL。本研究完善了该株衣原体的信息，为制定鹦鹉热衣原体的入库标准奠定基础。     

猪胸膜肺炎放线杆菌菌影的制备与免疫试验

通过鲎素抗菌肽和超高静水压联合作用,制备出一种胸膜肺炎放线杆菌菌影。利用胸膜肺炎放线杆菌血清5型（CVCC263）制备菌影并检测其灭活率。CVCC263菌影疫苗接种免疫仔猪,二免14d后攻毒,每天测量体温,并观察精神状态,呼吸,食欲等。攻毒第8天对存活猪进行剖杀,测量肺部病变面积,进行病理检测。结果显示,免疫组抗体效价及血清中的IgG、IgM、IgA、IL-2、IL-4含量均较对照组显著增加。免疫组临床症状和肺部病变面积均小于对照组。CVCC263菌影疫苗免疫仔猪抗APP感染的保护效果是明显的,并且APP5型的菌影疫苗可对APP7型感染有交叉保护。     

中华人民共和国农业部公告(第503号)——高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范

为加强动物病原微生物实验室生物安全管理,规范高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装,根据《病原微生物实验室生物安全管理条例》和《高致病性病原微生物实验室生物安全管理审批办法》,我部制定了《高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范》。现予以公告。附件:高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范二○○五年五月二十四日运输高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本的,其包装应当符合以下要求:一内包装(一)必须是不透水、防泄漏的主容器,保证完全密封;(二)必须是结实、不透水和防泄漏的辅助包装;(…     

基于StarLIMS平台的兽医实验室菌毒种管理系统的设计与实现

为提高兽医实验室对菌(毒)种保藏的管理效率和质量水平,本中心建立了一套菌(毒)种保藏管理信息系统。该系统采用B/S架构,以基于.NET封装的StarLIMS V10R2、SQL Server2008R2enterprise为开发平台,结合E-R模型第三范式建立了菌(毒)种信息数据库,应用面向对象的语言程序进行了系统开发。通过该系统的建立,构建了内部菌(毒)种信息管理、外部菌毒种共享平台(MyLIMS)、GIS平台、实验室冷链管理、门诊未知菌毒种管理、科研管理、资源管理、系统维护等功能模块,在平台界面和数据库均设置了访问权限,实现了菌(毒)种从背景信息登记、入库、操作、保存、领取、传代、质量控制、期间核查、销毁等的信息化、流程化管理,收集了本市兽医实验室菌毒种保藏信息,提高了菌(毒)种的内部管理效率,实现了菌(毒)种信息的追溯和数据的挖掘。     

鸡白痢沙门氏菌阳性血清国家标准品制备用菌株的筛选

为了制备鸡白痢沙门氏菌阳性血清标准型国家标准品及鸡白痢沙门氏菌阳性血清变异型国家标准品,对中国兽医微生物菌种保藏管理中心保藏的10株来源背景清晰的鸡白痢沙门氏菌菌株的形态、生化特性、培养特性、血清学特性、抗原性进行了鉴定,并进行了变异检查及沙门氏菌基于inv A基因的PCR检测。结果表明,CVCC79201株及CVCC79207株分别符合鸡白痢沙门氏菌标准型菌株及变异型菌株的特性,CVCC79201株菌制备的抗原与WHO标准实验室提供的AntiS.Pullorum Serum(S)及Anti-S.Pullorum Serum(V)国际标准品的强阳性血清和弱阳性血清均能发生100%凝集,CVCC79207株菌制备的抗原与Anti-S.Pullorum Serum(S)国际标准品的弱阳性血清发生75%凝集,与Anti-S.Pullorum Serum(S)国际标准品的强阳性血清及Anti-S.Pullorum Serum(V)国际标准品的强阳性血清和弱阳性血清均能发生100%凝集。用其制备免疫抗原免疫家兔后获得的阳性血清效价较高于鸡白痢沙门氏菌阳性血清国际标准品。结果证明,CVCC79201株及CVCC79207株可分别用于制备鸡白痢沙门氏菌阳性血清标准型国家标准品及鸡白痢沙门氏菌阳性血清变异型国家标准品。     

农业部公告《高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范》

为加强动物病原微生物实验室生物安全管理,规范高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装,根据<病原微生物实验室生物安全管理条例>和<高致病性病原微生物实验室生物安全管理审批办法>,农业部于2005年5月24日公布了<高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范>.     

兽药行政许可实行综合办公:兽医微生物菌(毒、虫)种认定

项目名称：兽医微生物菌(毒、虫)种认定。项目类型：前审后批。审批内容：1．申请单位基本情况及生物安全防范基本条件；2．申请菌(毒、虫)种目的和用途；3．申请菌(毒、虫)种名称、型别和数量。     

《中华人民共和国动物防疫法》配套法规解读(四)《动物病原微生物菌(毒)种保藏管理办法》探究

为了加强动物病原微生物菌(毒)种保藏管理,保护动物病原微生物生物安全,根据<动物防疫法>、<病原微生物实验室生物安全管理条例>和<兽药管理条例>等法律法规,农业部于2008年11月26日以第16号部长令发布了<动物病原微生物菌(毒)种保藏管理办法>,并于2009年1月1日施行.     

病原微生物实验室生物安全管理条例(续)

(接上期)第十六条实验室在相关实验活动结束后,应当依照国务院卫生主管部门或者兽医主管部门的规定,及时将病原微生物菌(毒)种和样本就地销毁或者送交保藏机构保管。保藏机构接受实验室送交的病原微生物菌(毒)种和样本,应当予以登记,并开具接收证明。第十七条高致病性病原微生物菌(毒)种或者样本在运输、储存中被盗、被抢、丢失、泄漏的,承运单位、护送人、保藏机构应当采取必要的控制措施,并在2小时内分别向承运单位的主管部门、护送人所在单位和保藏机构的主管部门报告,同时向所在地的县级人民政府卫生主管部门或者兽医主管部门报告,发生…     

羊链球菌CVCC55001、CVCC55002株对昆明小鼠的致病性研究

为研究羊链球菌CVCC55001、CVCC55002株对昆明系(KM)小鼠的致病性,使用羊链球菌CVCC55001、CVCC55002株分别对昆明小鼠进行毒力测定,观察临床和剖检症状,对死亡小鼠进行细菌分离培养,并对典型菌落进行形态、生化特性以及PCR鉴定。毒力测定结果显示CVCC55001对于昆明小鼠的最小致死剂量为9 CFU,CVCC55002对于昆明小鼠的最小致死剂量为11 CFU。感染羊链球菌死亡小鼠主要剖检症状为肝脏出血、肠道液化性坏死、脾脏肿大,病理变化为肝细胞出现大量坏死、肠道黏膜层广泛自溶、脾脏组织广泛坏死出血。本研究建立了羊链球菌CVCC55001、CVCC55002株的昆明小鼠攻毒感染模型,确定了最小致死剂量,对羊链球菌感染和致病性研究展开初步探索,为疫苗研究及评价提供了平台支撑。     

大肠杆菌菌体O抗原单因子定型血清的制备

为研制大肠杆菌菌体O抗原单因子定型血清,以大肠杆菌参考菌株CVCC1345(O2)、CVCC1350(O7)、CVCC1414(O74)为菌种制备抗原免疫家兔,获得了定型原血清,并通过比较不同免疫程序及剂量优化了定型原血清的制备工艺。进而按照优化后的定型原血清制备工艺,以大肠杆菌参考菌株CVCC1343(O1)、CVCC1345(O2)、CVCC1350(O7)、CVCC1405(O64)、CVCC1414(O74)、CVCC1439(O100)、CVCC1442(O103)、CVCC1455(O116)、CVCC1466(O128)、CVCC3801(O154)为菌种制备抗原免疫家兔,获得了10种O抗原型定型原血清。将定型原血清分别与180种微量凝集试验抗原逐一反应,明确各原血清与非特异性抗原的交叉凝集价,通过用吸收抗原对原血清进行吸收及稀释的方法消除非特异性凝集,最终制备成大肠杆菌菌体O抗原单因子定型血清。血清质量评价结果表明,新制备的单因子定型血清性状为无色、淡黄色或黄色澄明液体,个别有少量絮状物;无菌生长;特异性良好;凝集效价为1︰2。研究结果显示,制备的大肠杆菌O抗原单因子定型血清具有较好的特异性,可以用于对临床分离大肠杆菌进行O抗原血清型鉴定。     

5种大肠杆菌O抗原定型血清的制备

本研究以大肠杆菌参考菌株CVCC1369(O26)、CVCC3800(O153)、CVCC1489(O157)、CVCC3739(O159)、CVCC3807(O163)为菌种制备免疫抗原并免疫家兔,获得5种大肠杆菌O抗原定型原血清,而后制备多种吸收抗原以消除5种原血清的非特异性凝集素。通过微量凝集试验的方法,确定各血清的凝集价。最终确定了5种大肠杆菌O抗原定型血清的制备方法,为进一步改进大肠杆菌O抗原定型血清的制备工艺提供了思路和依据。     

肠毒性大肠埃希菌肠毒素LTa基因特异性EMA-PCR检测方法的建立

由于传统PCR技术无法区分样品中的死细菌与活细菌,为避免因样品中含有死细菌而造成的假阳性检测结果,本研究根据肠毒性大肠埃希菌(ETEC)不耐热肠毒素LTa基因设计特异性引物,利用叠氮溴乙锭(EMA)处理菌液,沸水浴法制备细菌裂解液,优化PCR条件,建立一种检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法。肠毒性大肠埃希菌CVCC196、CVCC197、CVCC200均能扩增出大小为438bp的特异性条带,而其他对照菌株未扩增出条带。经EMA处理,除了完全死菌组外,含有10mL/L～1 000mL/L活菌的混合悬液均可扩增出目的片段。因此,成功建立了一种快速、有效的检测肠毒性大肠埃希菌活菌肠毒素基因的EMA-PCR方法,该方法较传统PCR大大提高了检测的准确性,灵敏度可达19cfu/mL。     

高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范

运输高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本的，其包装应当符合以下要求：     

高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本运输包装规范

运输高致病性动物病原微生物菌(毒)种或者样本的，其包装应当符合以下要求：     

中国兽药知识产权保护问题分析与对策建议

为更好地保护和利用兽药知识产权,从现代知识产权保护规则和基本概念着手,分析了兽药知识产权保护现状和存在问题,就如何借鉴我国药品专利、行政保护、植物资源保护经验进行了探讨,提出了兽药知识产权保护、兽医微生物菌(毒、虫)种资源保护对策建议和思路,希望能为我国兽药知识产权保护工作提供参考。     

Gal-13成熟肽基因在毕赤酵母中的表达与抑菌活性分析

扩增鸡β-防御素-13(Gal-13)成熟肽基因序列,构建酵母重组表达载体pPICZαA-Gal-13,通过SacⅠ限制性内切酶线性化处理后,电击转化毕赤酵母X-33,并对利用甲醇诱导后的重组菌株表达产物进行表达规律分析和抑菌活性研究。结果表明,扩增到的Gal-13成熟肽基因序列为108bp,共编码36个氨基酸;筛选到的重组菌株均为Mut+表型,其诱导表达上清经Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳后,发现其在约5 900的位置出现目的条带,抑菌试验发现其对沙门菌(CVCC534)和金黄色葡萄球菌(ATCC25923)具有抑菌活性。     

《动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法》探究

为了加强动物病原微生物菌（毒）种保藏管理，保护动物病原微生物生物安全，根据《动物防疫法》、《病原微生物实验室生物安全管理条例》和《兽药管理条例》等法律法规，农业部于2008年11月26日以第16号部长令发布了《动物病原微生物菌（毒）种保藏管理办法》，并于2009年1月1日施行。这对于动物病原微生物菌（毒）种保藏安全具有重要意义。