犬ANP32蛋白多态性及其对A型流感病毒RNA聚合酶活性的影响

【目的】探索犬酸性核磷蛋白32（canis acidic （leucine-rich） nuclear phosphoprotein 32 ku,caANP32）对不同物种A型流感病毒（Influenza A virus,IAV） RNA 聚合酶活性的影响。【方法】利用实时荧光定量PCR方法分析caANP32家族基因（caANP32A、caANP32B及caANP32E）的组织分布并对其进行扩增和克隆,评估caANP32家族蛋白对不同物种A型流感病毒RNA聚合酶活性的支持作用。【结果】caANP32家族基因在不同组织中分布相似,其中caANP32B基因组织丰度显著或极显著高于caANP32A和caANP32E基因（P＜0.05;P＜0.01）,在心脏、盲肠和大脑中caANP32E基因组织丰度极显著或显著高于caANP32A基因（P＜0.01;P＜0.05）,在肝脏、肺脏等组织中caANP32E与caANP32A基因丰度均无显著差异（P>0.05）。在犬心脏组织和MDCK细胞中发现,caANP32A基因仅存在1个转录本,caANP32B基因存在3个不同剪接变体：caANP32B_X1、caANP32B_X2和caANP32B_X3;caANP32E 基因具有2个不同剪接变体：caANP32E_X1和caANP32E_X2。通过分析ANP32家族蛋白对不同物种A型流感病毒RNA聚合酶活性的影响发现,caANP32A和caANP32B均能支持犬流感病毒（H3N2_GD11）和马流感病毒（H3N8_JL89）RNA聚合酶活性,而对禽流感病毒（H9N2_ZJ12）RNA聚合酶活性支持较低。caANP32B_X2剪接变体对哺乳动物流感病毒RNA聚合酶活性的支持能力显著高于caANP32B_X1和caANP32B_X3（P＜0.05）;而caANP32E不支持A型流感病毒RNA聚合酶活性。【结论】本研究初步解析了caANP32家族蛋白的组织分布及序列多态性,阐明了其对不同物种A型流感病毒RNA聚合酶活性的支持作用,为解析MDCK细胞作为流感病毒分离和疫苗生产细胞系的分子机制提供了新的借鉴。     

外源性RFRP-3和MLT对雄鼠初情期生长及繁殖性能的影响

【目的】探究外源性RF-酰胺相关肽3（RF-amide related peptide 3，RFRP-3）和褪黑素（melatonin，MLT）对雄性昆明小鼠初情期生长、繁殖性能的影响及两者之间的关系。【方法】以初情期雄性昆明小鼠为研究对象，单独给予雄鼠生理盐水、外源性RFRP-3或MLT以及混合给予RFRP-3、MLT，检测其对雄鼠平均增重、平均采食量、料重比、睾丸发育情况，血清生长激素（growth hormone，GH）、黄体生成素（luteinizing hormone，LH）水平，以及生长、生殖相关基因表达的影响。【结果】外源性RFRP-3能抑制雄鼠GH基因表达，并抑制体重增长，提高料重比；而外源性MLT促进雄鼠GH基因表达，使体重增长较快，料重比降低；RFRP-3和MLT共同处理下，GH基因表达增加，体重增长速度与单独给予MLT组接近。RFRP-3可抑制褪黑素受体1A（melatonin receptor 1A，Mtnr1A）、LH基因表达及睾酮分泌，小鼠睾丸各级生精细胞和间质细胞数量减少；MLT可促进Mtnr1A、LH基因表达及睾酮分泌，睾丸间质细胞密度极显著增加（P＜0.01）；MLT和RFRP-3共同处理下，小鼠睾丸各级生精细胞和间质细胞数量减少，睾酮分泌显著减少（P＜0.05）。【结论】外源性RFRP-3能一定程度抑制雄性小鼠初情期的生长及繁殖性能，外源性MLT可促进初情期雄性小鼠的生长及繁殖性能。     

饲喂蒸汽压片玉米对新疆褐牛增重、瘤胃发酵及微生物多样性的影响

【目的】通过研究饲喂蒸汽压片玉米对新疆褐牛增重、瘤胃发酵及微生物的影响,旨在探索提高肉牛增重性能和饲养效益的饲喂方法。【方法】将16头年龄(18月龄)和体重相近(436.87 kg±17.29 kg)的健康新疆褐牛公牛随机分为2组,每组8头牛。试验组精料使用蒸汽压片玉米,对照组使用普通破碎玉米,预试期15 d,正试期180 d。记录试验牛初始体重、终末体重并计算平均日增重。于试验第180天采集新疆褐牛饲喂前(0 h)和饲后1、3、5、7、9 h瘤胃液测定瘤胃发酵指标;取0 h瘤胃液利用16S rRNA分析瘤胃微生物菌群组成。【结果】与对照组相比,试验组褐牛平均日增重显著提高(P＜0.05);瘤胃液pH在1 h显著降低(P＜0.05),在3 h极显著降低(P＜0.01);瘤胃液乙酸和乙酸＋丙酸＋丁酸含量在3 h均显著提高(P＜0.05),丙酸含量极显著提高(P＜0.01);在各采样时间点,瘤胃液氨态氮和微生物蛋白含量均极显著升高(P＜0.01)。两组褐牛瘤胃液Chao1指数和Shannon指数差异均不显著(P＞0.05),在门水平上,试验组拟杆菌门相对丰度显著提高(P＜0.05),螺旋菌门相对丰度极显著提高(P＜0.01),而厚壁菌门、脱硫杆菌门、疣微菌门相对丰度均显著降低(P＜0.05),放线菌门相对丰度极显著降低(P＜0.01);在属水平上,试验组理研菌科RC9、普雷氏菌属UCG-003、毛螺旋菌科XPB1014和毛螺旋菌科NK3A2相对丰度均显著提高(P＜0.05),而克里斯滕森菌科R-7相对丰度显著降低(P＜0.05)。【结论】饲粮中使用蒸汽压片玉米能显著提高新疆褐牛公牛平均日增重,改变瘤胃发酵速度,提高发酵效率,显著增加与碳水化合物和挥发性脂肪酸代谢相关的微生物丰度,降低了纤维降解相关和可致病的微生物丰度。     

灌服黄芪多糖对奶牛产奶量、免疫性能及抗氧化性能的影响

【目的】研究黄芪多糖(APS)对奶牛产奶量、免疫功能及抗氧化性能的影响。【方法】选取体况良好,体重、产奶量、泌乳天数、胎次接近的中国荷斯坦奶牛44头,随机分为对照组(CK)及APS20、APS55和APS90组,每组11头。所有试验牛均饲喂基础饲粮。对照组灌服温水200 mL,试验组分别灌服20、55、和90 g/d的APS溶液200 mL,预试期10 d,正试期60 d。正试期内,每10 d统计1次产奶量;于正试期的第0、30、60天采集乳样,测定乳中体细胞数(SCC);于正试期第0、30、60天晨饲前,采集奶牛尾根静脉血样,测定血清中相关免疫指标、抗氧化指标。【结果】在试验全期,各组产奶量均差异不显著(P＞0.05)。在体细胞数方面,与CK组相比,第30和60天时,APS55组体细胞评分(SCS)均显著降低(P＜0.05),APS20和APS90组SCS在各时间点均差异不显著(P＞0.05),且APS90组极显著高于APS55组(P＜0.01)。在免疫指标方面,与CK组相比,第30天时,APS20组血清中白细胞介素2(IL-2)含量显著增加(P＜0.05),APS55与APS90组血清中IL-2含量极显著增加(P＜0.01);第60天时,APS20、APS55和APS90组血清中IL-2含量均极显著增加(P＜0.01),且APS55与APS90组IL-2含量极显著高于APS20组(P＜0.01);第60天时,APS55组血清中IL-6含量显著增加(P＜0.05)。在抗氧化指标方面,与CK组相比,第30、60天时,APS20、APS55和APS90组血清中过氧化氢酶(CAT)活性均极显著增加(P＜0.01);第60天时,ASP90组血清中丙二醛(MDA)浓度显著降低(P＜0.05),APS20、APS55和APS90组血清中谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性均显著增加(P＜0.05),APS55和APS90组血清中总抗氧化能力(T-AOC)极显著增加(P＜0.01),且显著高于APS20组(P＜0.05)。【结论】55 g/d APS可以提高奶牛免疫功能、抗氧化能力,并且降低乳中体细胞数,结果为APS在奶牛生产应用提供参考。     

高效纤维素降解菌筛选鉴定及在羊粪堆肥中的初步应用

为解决堆肥生产中羊粪及辅料中纤维素含量较高导致的发酵不彻底、成品含较多纤维素杂质等问题,试验从不同畜粪和三种应用较广的商品微生物堆肥菌剂(RW菌剂、BDM菌剂、JBB菌剂)样品中筛选纤维素高效降解菌,通过刚果红透明圈试验、滤纸条降解试验和纤维素酶活力测定试验综合筛选目的菌株,对筛选到的菌株进行生理生化鉴定及分子鉴定,并以此菌株制作强化菌剂,与商品菌剂堆肥发酵进行对比试验,再对堆肥过程的温度及成品的理化性质进行检测以判定是否达到国家标准。结果表明:筛选到1株来自马粪的纤维素降解能力较强的细菌(M2),其纤维素酶活性为(126.06±0.36)U/mL,高于商品菌剂中酶活性最高的纤维素菌。经形态学、生理生化鉴定及16S rDNA序列分析确定M2是鞘氨醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)的少动鞘氨醇单胞菌(Sphingomonas paucimobilis)。以此菌株制作强化菌剂后与商品菌剂进行堆肥发酵对比发现,强化菌剂有效提升了菌剂的纤维素降解能力,产品成色均一,无明显纤维素杂质,总养分得到一定程度提高。说明筛选出的M2可用于羊粪堆肥的专一性菌剂研发。     

健脾消导中药复方对6月龄西杂牛生长性能、瘤胃发酵参数和血清指标的影响

【目的】研究健脾消导中药复方对6月龄西门塔尔牛×本地黄牛杂交犊牛（西杂牛）生长性能、瘤胃发酵参数和血清生化指标的影响。【方法】选取体重为193 kg±20 kg的西杂牛28头,随机均分为对照组和试验组。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中添加0.5%健脾消导中药复方,预试期7 d后连续饲喂90 d,于第91天晨饲前称重并采集瘤胃液和血液,测定瘤胃液短链脂肪酸和血清生理生化指标。【结果】与对照组相比,试验组平均日增重（ADG）显著增加（P＜0.05）,料重比（F/G）降低;瘤胃液pH、乙酸、丙酸、丁酸、总短链脂肪酸含量及乙酸/丙酸比值均无显著差异（P＞0.05）;血清总胆固醇（CHO）含量升高;总胆红素（TBIL）、直接胆红素（DBIL）、谷丙转氨酶（ALT）和丙二醛（MDA）含量均显著降低（P＜0.05）;免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白G（IgG）、胃泌素（GAS）、三碘甲状腺原氨酸（T₃）、还原型谷胱甘肽（GSH）含量均显著升高（P＜0.05）;胃动素（MTL）和生长激素（GH）含量虽有升高但均差异不显著（P＞0.05）。【结论】在6月龄西杂牛的饲粮中添加健脾消导中药复方可以调节激素分泌、促进草料消化吸收、增强抗氧化能力、提高机体免疫力,进而提升西杂牛的生长性能。     

缩合单宁对海鲈生长性能、体成分、营养物质表观消化率及肠道组织结构的影响

【目的】通过研究饲料中添加缩合单宁对海鲈生长性能、体成分、营养物质表观消化率及肠道组织结构的影响,探讨缩合单宁作为水产饲料添加剂的潜在应用价值。【方法】选择初始体重为(2.76±0.05) g的健康海鲈480尾,随机分为3组,每组4个重复,每个重复40尾。分别投喂3种等氮等脂饲料,即T1(基础饲料,对照组)、T2(基础饲料＋1 g/kg缩合单宁)和T3(基础饲料＋2 g/kg缩合单宁)。采取饱食投喂方式,试验周期为63 d。【结果】各组之间成活率和饲料系数无显著差异(P＞0.05),T3组终末体重、增重率和特定生长率显著低于T1和T2组(P＜0.05);各组之间全鱼水分、粗蛋白质、粗脂肪和灰分含量均无显著差异(P＞0.05);干物质和粗蛋白质表观消化率均表现为T1＞T2＞T3(P＜0.05),T3组粗脂肪表观消化率显著低于T1组(P＜0.05),T1和T2组之间粗脂肪表观消化率无显著差异(P＞0.05),各组之间灰分表观消化率无显著差异(P＞0.05);与T1组相比,T2和T3组海鲈肠道出现不同程度损伤,表现为绒毛长度显著降低(P＜0.05),杯状细胞数量显著增加(P＜0.05)。【结论】饲料中添加1 g/kg缩合单宁不影响海鲈生长性能,但降低了干物质和粗蛋白质表观消化率,添加2 g/kg缩合单宁抑制了海鲈生长,降低了干物质、粗蛋白质和粗脂肪的表观消化率,且破坏了肠道组织结构。缩合单宁可作为饲料添加剂应用于海鲈,建议添加剂量不超过1 g/kg。     

饲粮中添加地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能及血液指标的影响

【目的】研究饲粮中添加地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能、血常规、血清生化及抗炎抗氧化指标的影响。【方法】选取108头28日龄杜长大断奶仔猪,按体重分为3组,每组6个重复,每个重复6头。对照组饲喂基础饲粮,其余两组分别在基础饲粮中添加1 g/kg地衣芽孢杆菌、1 g/kg解淀粉芽孢杆菌,试验期28 d。在试验第14和28天,空腹称重并计算采食量,每个重复选取2头仔猪,前腔静脉采血并用血细胞分析仪和试剂盒方法测定血常规及血清生化指标。【结果】各组断奶仔猪之间的平均日增重、平均日采食量、料重比均无显著性差异（P＞0.05）。与对照组相比,解淀粉芽孢杆菌组断奶仔猪的腹泻率显著降低（P＜0.05）;地衣芽孢杆菌组和解淀粉芽孢杆菌组断奶仔猪第14天血液淋巴细胞百分含量均显著升高,白细胞介素-2（IL-2）、丙二醛含量及乳酸脱氢酶、谷草转氨酶活性均显著降低（P＜0.05）;解淀粉芽孢杆菌组断奶仔猪第14天血液中碱性磷酸酶活性显著降低,血红蛋白含量显著升高,第28天血液中IL-2含量显著降低,总蛋白、球蛋白含量均显著升高（P＜0.05）。【结论】饲粮中添加地衣芽孢杆菌或解淀粉芽孢杆菌对断奶仔猪生长性能无显著影响,但能够改善仔猪血液指标,保护肝脏功能,且添加解淀粉芽孢杆菌还可以提高仔猪新陈代谢,降低仔猪腹泻率。     

柑橘提取物对肥育猪后肠食糜蛋白质代谢产物的影响

【目的】通过研究柑橘提取物对肥育猪后肠食糜蛋白质代谢产物的影响,旨在为柑橘提取物从源头调控臭气的产生提供依据。【方法】选取108头56日龄（19.73±0.39）kg杜×长×大猪,公母各半,随机分为3组,每组分6栏,每栏6头猪。对照组饲喂基础饲粮,抗生素组在基础饲粮中添加75 g/t金霉素,柑橘提取物组在基础饲粮中添加柑橘提取物（56~112日龄添加250 mL/t柑橘提取物,113~194日龄添加200 mL/t柑橘提取物）。194日龄时收集肥育猪盲肠和结肠食糜,测定食糜中游离氨基酸、酚和吲哚类物质、生物胺的含量。【结果】①在盲肠食糜中,与对照组相比,柑橘提取物组和抗生素组牛磺酸、天冬氨酸、丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、赖氨酸、组氨酸、精氨酸、吲哚和甲胺含量均显著降低（P＜0.05）。与对照组相比,柑橘提取物有降低苏氨酸、丝氨酸、谷氨酸、甘氨酸、瓜氨酸、异亮氨酸、脯氨酸和粪臭素含量的趋势（0.05≤P＜0.10）,苯酚、腐胺、酪胺和精胺含量均显著降低（P＜0.05）。与抗生素组相比,柑橘提取物组腐胺和酪胺含量均显著减少（P＜0.05）。②在结肠食糜中,与对照组相比,柑橘提取物组和抗生素组天冬氨酸、丝氨酸、异亮氨酸、胱硫醚、亮氨酸、γ-氨基丁酸、总氨基酸、苯酚、对甲酚、粪臭素和甲胺含量均显著降低（P＜0.05）,脯氨酸和吲哚含量均有降低的趋势（0.05≤P＜0.10）。柑橘提取物组丝氨酸、异亮氨酸、胱硫醚、亮氨酸、总氨基酸和对甲酚含量均显著低于抗生素组（P＜0.05）;与对照组相比,柑橘提取物组苏氨酸、谷氨酸、甘氨酸、鸟氨酸和酪胺含量均显著降低（P＜0.05）,亚精胺含量有降低的趋势（0.05≤P＜0.10）;与对照组和抗生素组相比,柑橘提取物组苯丙氨酸、色氨酸和赖氨酸含量均显著降低（P＜0.05）。【结论】柑橘提取物降低了肥育猪后肠食糜蛋白质代谢产物的含量,可减少臭气的产生。     

2-氨基乙基联苯基硼酸酯对玻璃化冷冻牛成熟卵母细胞发育能力的影响

【目的】研究内质网IP3受体（IP3R）抑制剂2-氨基乙基联苯基硼酸酯（2-APB）对玻璃化冷冻-解冻牛MⅡ期卵母细胞发育能力的影响。【方法】将体外成熟24 h的卵丘-卵母细胞复合体（COCs）用0.1%透明质酸酶消化去除卵丘颗粒细胞，获得的卵母细胞分为对照组和2-APB组，采用OPS法进行玻璃化冷冻，对照组直接进行玻璃化冷冻，2-APB组在玻璃化冷冻前先用10 μmol/L 2-APB预处理10 min。2 d后解冻卵母细胞，统计解冻后（0 h）及恢复培养2 h时卵母细胞的存活率，用FITC-PNA荧光探针检测恢复培养2 h时卵母细胞皮质颗粒（CG）的分布，用2'，7'-DCHFDA和Cell Tracker Blue CMF2HC分别检测胞内活性氧（ROS）和谷胱甘肽（GSH）含量。将成熟培养24 h未冷冻卵母细胞（Fresh组），与解冻后恢复2 h的对照组和2-APB组卵母细胞同时进行孤雌激活，于培养的第2、7天分别统计孤雌胚胎的卵裂率和囊胚率。【结果】与对照组相比，2-APB组冷冻-解冻卵母细胞0和2 h的存活率均显著增加（P＜0.05）；2-APB组皮质颗粒皮质区分布比例显著提高（P＜0.05），损伤型分布比例显著降低（P＜0.05）；2-APB组卵母细胞内GSH含量显著增加（P＜0.05），ROS含量显著降低（P＜0.05）；2-APB组卵母细胞孤雌激活胚胎的卵裂率、囊胚率均显著增加（P＜0.05），且与Fresh组无显著差异（P＞0.05）。【结论】2-APB预处理可通过增加卵母细胞内GSH含量，降低卵母细胞皮质颗粒损伤型分布比例和胞内ROS含量，提高玻璃化冷冻保存牛MⅡ期卵母细胞质量及早期胚胎发育能力。     

猪粪与玉米秸秆好氧堆肥处理及其安全性评价

【目的】探讨以不同比例的猪粪和玉米秸秆为原料进行好氧堆肥对堆肥质量的影响,并对堆肥产品进行安全评价,为猪粪与秸秆的资源化利用研究提供参考。【方法】以猪粪和玉米秸秆为材料,分别按猪粪和玉米秸秆体积比4：6（A组）、6：4（B组）和8：2（C组）混合堆肥。堆肥期共55 d,每天记录堆体和环境温度,在第0、5、15、25、35、45、55天采集堆体样品,并测定样品的含水量、pH和种子发芽指数,以及第0和55天养分含量（全磷、全钾、总氮）、有机质含量、重金属含量（总砷、总汞、总铅、总镉、总铬）、粪大肠菌群数和蛔虫卵死亡率。【结果】试验A、B和C组堆肥温度随着堆肥时间的增加均呈先上升后下降趋势,各组间差异不显著（P>0.05）;含水量随堆肥时间增加均不断减少,各组间差异不显著（P>0.05）;pH均在7.5~9.1之间波动,变化趋势基本一致,各组间差异不显著（P>0.05）。试验A、B和C组堆肥结束时样品总养分含量分别为6.94%、7.36%和6.95%,有机质含量分别为48%、45%和39%,均达到NY/T 525-2021标准的要求;3组种子发芽指数在堆肥结束时都在80%以上,表明腐熟完全,其中A和B组在35 d后均超过100%;A、B和C组堆肥结束时样品重金属含量、粪大肠菌群数和蛔虫卵死亡率的检测结果均低于有机肥标准的限值,其中A和B组的粪大肠菌群数<3个/g,蛔虫卵死亡率均为100%。【结论】猪粪和玉米秸秆按体积比4：6配比更有利于堆肥腐熟,可缩短堆肥周期,并达到了粪便无害化和有机肥料的标准要求。     

绵羊FUT8基因多态性及其与生长性状的关联分析

【目的】研究岩藻糖基转移酶8(fucosyltransferase 8,FUT8)基因g.74522417 C＞T位点多态性及其对绵羊生长性状的影响,为绵羊分子育种筛选新的遗传标记。【方法】采用Sequenom MassARRAY? SNP分型技术、Illumina OvineSNP 600K BeadChip及Illumina OvineSNP 50K BeadChip芯片检测技术对湖羊(n=992)和乌珠穆沁羊群体(n=333)FUT8基因g.74522417 C＞T位点进行分型,并将其多态性与湖羊和乌珠穆沁羊的生长性状进行关联分析。【结果】FUT8基因g.74522417 C＞T位点在乌珠穆沁羊和湖羊群体中均检测出3种基因型:CC、TC和TT。群体遗传分析表明,g.74522417 C＞T位点在乌珠穆沁羊和湖羊群体中均处于中度多态(0.25＜PIC＜0.50)。卡方适应性检验结果表明,g.74522417 C＞T位点在乌珠穆沁羊和湖羊群体中均处于哈代-温伯格平衡状态(P＞0.05)。关联分析结果表明,FUT8基因g.74522417 C＞T位点与乌珠穆沁羊4月龄体长和6月龄体高均呈显著相关(P＜0.05);与湖羊3月龄管围、5月龄腰角宽和管围、6月龄眼肌面积和管围均呈显著或极显著相关(P＜0.05;P＜0.01)。【结论】FUT8基因g.74522417 C＞T位点可作为绵羊生长发育潜在分子标记,为FUT8基因在绵羊分子育种中的应用提供参考。     

菊苣对不同性别麻黄肉鸡生长性能、屠宰性能和肉品质的影响

【目的】研究菊苣对不同性别麻黄肉鸡生长性能、屠宰性能及肉品质的影响。【方法】选取42日龄麻黄肉鸡576只,随机分为8组,每组6个重复,每个重复12只鸡,公母各半。采用2(性别)×4(菊苣水平)双因素试验设计,菊苣添加水平为0、3%、6%、9%。试验期42 d。试验结束时统计生产性能指标;每重复屠宰1只鸡,测定屠宰性能和免疫器官指数;取胸肌和腿肌用于肉质分析。【结果】(1)与不添加菊苣相比,添加6%和9%菊苣可显著提高麻黄肉鸡的料重比(F/G)(P<0.05);公鸡生长性能显著优于母鸡(P<0.05)。(2)母鸡的法氏囊指数显著高于公鸡(P<0.05)。(3)公鸡的全净膛率显著高于母鸡(P<0.05),腹脂率显著低于母鸡(P<0.05)。(4)与不添加菊苣相比,添加6%和9%菊苣可显著提高麻黄肉鸡胸肌的黄度(b^*_{24 h})(P<0.05),母鸡胸肌的亮度(L^*_{24 h})显著高于公鸡(P<0.05)。(5)性别和菊苣水平对麻黄肉鸡腿肌的剪切力存在显著交互作用(P...     

miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响

【目的】研究miR-449b对绵羊早期胚胎发育的影响。【方法】采用Percoll密度梯度离心法获得纯化绵羊精子，将绵羊卵丘-卵母细胞复合体（COCs）在培养箱中培养16~18 h获得成熟卵母细胞，从1月龄纯种萨福克绵羊耳组织分离成纤维细胞，通过实时荧光定量PCR比较绵羊精子、成熟卵母细胞与成纤维细胞中miR-449b的相对表达量；给成熟卵母细胞分别显微注射0.9 %生理盐水（Con组）、miR-449b模拟物对照（NC mimic）与miR-449b模拟物（miR-449b mimic），注射后进行孤雌激活，分别于激活的第2、7天统计胚胎卵裂率与囊胚率；将成熟卵母细胞进行体外受精（IVF），收集IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎，采用免疫荧光法比较组蛋白H3K9me3的变化。【结果】miR-449b在精子中的表达显著高于成熟卵母细胞和成纤维细胞（P＜0.05）；与Con组相比，miR-449b mimic和NC mimic组胚胎的卵裂率均显著降低（P＜0.05），NC mimic组胚胎卵裂率显著低于miR-449b mimic组（P＜0，05）；miR-449b mimic组胚胎囊胚率提高，但差异不显著（P＞0.05）；IVF、Con、NC mimic与miR-449b mimic组2-细胞胚胎均表达组蛋白H3K9me3，且都在细胞核表达。与Con组相比，NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著增加（P＜0.05），miR-449b mimic组显著降低（P＜0.05）；NC mimic组2-细胞胚胎组蛋白H3K9me3的表达水平显著高于miR-449b mimic组（P<0.05），miR-449b mimic与IVF组无显著差异（P＞0.05）。【结论】miR-449b能显著提高绵羊早期胚胎的发育率，且降低早期胚胎中H3K9me3的表达水平。     

花椒精油对小尾寒羊生产性能和胃肠道组织结构的影响

【目的】本研究测定分析了不同剂量的花椒精油(EOZB)对小尾寒羊生产性能和胃肠道组织结构的影响,旨在为花椒精油在反刍动物方面的应用提供一定的理论参考。【方法】选取20只3月龄、活重接近的小尾寒羊随机分为4组,分别为对照组(CON)和试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组,对照组饲喂基础饲粮,试验Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组分别在基础饲粮中添加5(EOZB5)、10(EOZB10)和15 mL/kg(EOZB15)花椒精油;试验期52 d,试验结束后屠宰所有试验羊并采集10个部位(瘤胃、网胃、瓣胃、皱胃、十二指肠、空肠、回肠、盲肠、结肠和直肠)的胃肠道组织样,通过测定生产性能和胃肠道乳头长度、乳头宽度、黏膜下层厚度、肌层厚度、固有膜厚度、角质层厚度、绒毛长度、绒毛宽度和隐窝深度等指标系统性评价花椒精油对小尾寒羊胃肠道组织结构的影响。【结果】(1)花椒精油可以提高小尾寒羊生产性能。与对照组相比,EOZB10组平均日增重、干物质采食量和料重比显著增加,且显著高于其他两个试验组(P<0.05)。(2)花椒精油可以促进小尾寒羊复胃发育。与对照组相比,EOZB10组瘤胃黏膜下层厚度和肌层厚度显著增加(P<0.05),角质层...     

兔粪堆肥技术初步研究

试验旨在研究兔粪堆肥过程中的参数变化,为规模化兔场兔粪堆肥处理提供技术储备。以兔粪和稻草为原料进行室内堆肥,设置兔粪-稻草组、兔粪-稻草翻堆组和兔粪组,在为期55d的堆肥过程中,测定了各堆体温度、水分、酸碱度(pH)、总有机碳(TOC)、总氮(TN)、总磷(TP)、总钾(TK)、大肠杆菌和种子发芽指数(GI)随时间的变化。结果表明:在堆肥过程中,各组高温期温度均能维持5 d以上,能达到了粪便无害化卫生标准的要求,兔粪-稻草翻堆组高温阶段持续时间最长;各组有机质相对含量总体呈上升趋势,堆肥结束时,有机质均稳定在35%以上;TP和TK总体呈上升趋势;高温期时大肠杆菌数均为0,但随着温度的降低,又出现了少量的大肠杆菌;种子发芽指数总体呈上升趋势,堆肥37d后均能达到腐熟标准。由此可见,生产中对兔粪进行处理,既可以单独利用兔粪进行堆肥,也可以采用兔粪和稻草按7.4∶1的比例进行混合堆肥。     

牛粪堆肥不同处理全N、P、K及有机质含量的动态变化

[目的]为了实现畜禽粪便的无害化处理和资源化利用。[方法]以新鲜牛粪、玉米秸秆和生物腐熟剂作为堆料,分别向鲜牛粪中添加0.05%、0.5%、1%的生物腐熟剂和5%的秸秆,以未添加任何物质的鲜牛粪为对照制定五种不同处理的好氧堆肥体系,研究了堆肥过程中全氮、全磷、全钾以及有机质的动态变化。[结果]堆肥结束时,全氮的相对含量增加,其中向牛粪中添加1%的生物腐熟剂可以减少牛粪中氮素的流失;不同处理对全磷、全钾含量影响不大,相对含量略显上升趋势。[结论]有机质含量呈阶段性变化,整体含量呈下降趋势。     

奶牛子宫内膜上皮细胞氧化应激模型的建立及奶牛脂肪间充质干细胞对其迁移的影响

【目的】探讨奶牛脂肪间充质干细胞（bovine adipose-derived mesenchymal stem cells,bAD-MSCs）对氧化应激条件下奶牛子宫内膜上皮细胞迁移能力的影响。【方法】使用0、5、25、50、100、200 μmol/L H₂O₂处理奶牛子宫内膜上皮细胞2、4、6、8、12 h后,通过MTT试验检测细胞存活率、流式细胞术检测细胞内活性氧（ROS）水平来筛选H₂O₂诱导奶牛子宫内膜上皮细胞氧化应激模型的最佳条件。在细胞划痕试验中设立对照组、H₂O₂组、bAD-MSCs共培养组（1∶0.5）、bAD-MSCs共培养组（1∶1）、奶牛乳腺上皮细胞（MACT）共培养组（1∶0.5）和MACT共培养组（1∶1）共6组,分析奶牛子宫内膜上皮细胞迁移能力,并利用Western blotting检测细胞外蛋白调节激酶（Erk）和磷酸化细胞外蛋白调节激酶（pErk）蛋白的表达水平。【结果】MTT试验结果显示,4~12 h内50 μmol/L H₂O₂组细胞存活率为50%~80%,适用于构建氧化应激模型。流式细胞术结果显示,用50 μmol/L H₂O₂刺激奶牛子宫内膜上皮细胞2 h时,ROS水平显著高于对照组与4、6、8、12 h组（P<0.05）。划痕试验结果显示,与对照组相比,H₂O₂组奶牛子宫内膜上皮细胞的迁移能力显著降低（P＜0.05）;与H₂O₂组相比,bAD-MSCs共培养组奶牛子宫内膜上皮细胞的迁移能力均显著增加（P＜0.05）,MACT共培养组细胞迁移能力均显著降低（P＜0.05）。Western blotting结果显示,与对照组相比,H₂O₂组奶牛子宫内膜上皮细胞中pErk蛋白表达水平显著降低（P＜0.05）;与H₂O₂组相比,bAD-MSCs共培养组奶牛子宫内膜上皮细胞中pErk蛋白表达水平均显著升高（P＜0.05）,MACT共培养组细胞中pErk蛋白表达水平均显著降低（P＜0.05）。【结论】50 μmol/L H₂O₂处理2 h可成功构建奶牛子宫内膜上皮细胞氧化应激模型,bAD-MSCs可促进氧化应激条件下奶牛子宫内膜上皮细胞的迁移并参与调控Erk蛋白的表达。     

ZZMZ菌剂在牛粪堆肥过程中对微生物群落的影响

[目的]为了提高牛粪堆肥中分解纤维素的微生物含量.[方法]以人工接种灭活ZZMZ堆肥微生态调节剂堆肥处理(JSM 堆肥)和未接种ZZMZ堆肥微生态制剂处理作为对照,按40 L/40 t(1‰)添加灭活ZZMZ堆肥微生态调节剂.[结果]表明:接种ZZMZ菌剂可以使牛粪便堆肥细菌数量提高4.53%,放线菌数量提高6.37%...