狮头鹅AR基因克隆和组织表达

本研究旨在克隆鹅雄激素受体基因（Androgen receptor，AR），并了解其在不同组织中的表达情况.以狮头鹅为试验材料，采集下丘脑和睾丸组织样品，提取RNA逆转录后进行AR基因克隆，并用RACE扩增其cDNA全长序列，其它同采用实时荧光定量PCR的方法检测AR基因在各个组织中的表达情况.结果克隆获得AR基因全长cDNA序列，共得到4个转录本.通过氨基酸序列同源进行分析，发现狮头鹅AR基因在禽类和哺乳类动物中同源性较高，说明该基因在禽类和哺乳类进化保守.荧光定量PCR结果显示AR基因在狮头鹅12个组织中均有表达量，其中在腿肌、胸肌和睾丸表达量较高，表明AR基因可能参与调控狮头鹅公鹅的肌肉生长与繁殖.     

一例猪异物性胸膜炎案例分析

免疫接种是预防、控制疫病的重要环节。因免疫操作或接种方法不当引起的免疫失败常给猪场造成巨大经济损失。通过介绍一例由于免疫操作不当导致猪异物性胸膜炎,造成大批量仔猪死亡的案例,分析免疫正确操作的重要性。     

通过比较转录组分析鉴定山麻鸭开产调控基因

蛋鸭开产与卵巢发育有紧密联系，本实验旨在探索山麻鸭开产前后卵巢形态变化及基因表达的差异，鉴别参与启动开产的关键基因，为后期蛋鸭开产相关的分子遗传机制研究奠定基础。在山麻鸭开产前后的S1期（81日龄）和S2期（137日龄）分别选取3个个体的卵巢基质进行转录组测序，对转录组数据开展差异表达分析、功能富集分析及关键基因筛选，同时对关键基因进行荧光定量PCR(qRT-PCR)验证。在差异倍数log2转换的绝对值（|log2(FoldChange)|）大于1.5、矫正P值<0.05的筛选条件下鉴别出382个差异表达基因。基于382个差异表达基因的GO功能注释发现与卵泡生长和卵巢功能调节相关的通路：细胞外基质的组织、细胞外基质结构成分和含有胶原蛋白的细胞外基质相关途径；KEGG富集分析发现上述基因显著富集于ECM受体相互作用和PI3K-Akt信号通路。在涉及上述重要富集通路的基因中有9个基因交集：CD44、COL1A1、COL6A1、CREB3L1、ITGB2、THBS2、VWF、VEGFC、WNT5B，通过qRT-PCR验证了这9个基因在转录组数据差异表达方面的可靠性。在这9个基因中，CO...     

大鼠肝细胞与kupffer细胞的分离与鉴定

本研究旨在建立一种简单有效的分离大鼠肝细胞和kupffer细胞的方法。大鼠体外肝脏灌流,采用percoll密度梯度分离法分离肝细胞与kupffer细胞,糖原染色鉴定肝细胞,墨汁吞噬实验鉴定kupffer细胞。结果表明,此方法分离的肝细胞和kupffer细胞活性都在95%以上,新分离的肝细胞鹅卵石样,贴壁能力不是特别强,24 h可分化出不同形态。Kupffer细胞具有较强的吞噬能力和贴壁能力,可看到墨汁被细胞吞噬。结论:本实验建立的分离培养方法较稳定,为开展肝细胞和kuffer细胞的相关研究提供方法依据,也为建立各种体外细胞分离培养方法提供借鉴。     

蛋壳粉少量替代石粉对蛋鸭产蛋性能、蛋品质及钙代谢的影响

【目的】研究蛋壳粉少量替代石粉对蛋鸭产蛋性能、蛋品质和钙代谢的影响。【方法】试验选择80只180日龄的健康山麻鸭蛋鸭,随机分为两组,每组5个重复,每个重复8只蛋鸭。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮基础上,用2 g蛋壳粉取代饲料中等量的钙添加量。试验为期56 d,试验期间检测蛋鸭产蛋性能、蛋品质、钙沉积量、血液中钙磷含量和钙代谢相关激素水平等指标。【结果】试验组平均蛋重、蛋壳强度和蛋白高度均显著高于对照组,表明添加蛋壳粉能明显提高蛋品质量。试验组蛋壳钙沉积量、血磷含量和血浆甲状旁腺素水平显著高于对照组,试验组血钙含量为4.74(±1.17)μmol/mL,极显著高于对照组的2.79(±1.00)μmol/mL,表明蛋壳粉更有利于钙沉积,能明显提高血液中钙磷含量和甲状旁腺素水平。【结论】蛋壳粉少量替代石粉可促进蛋鸭钙吸收代谢和蛋壳钙沉积,提高平均蛋重,改善蛋品质。     

一株新型鹅星状病毒鉴定及遗传演化分析

近几年,我国主要养鹅地区暴发了一种以关节腔和内脏器官尿酸盐沉积为特征的高度致死的关节型和内脏型痛风,给我国养鹅业造成了巨大的经济损失.多项研究结果表明,引起此次雏鹅痛风的病原是一种新型鹅星状病毒（Goose Astrovirus,GoAstV）.为了解GoAstV在广东地区的流行情况及其遗传变异,本研究对广东地区雏鹅群开展GoAstV流行病学调查,结果表明,GoAstV在广东地区雏鹅群中广泛流行,其阳性率为40%.对GoAstV/Guangdong/DBN-1/2019（GoAstV-DBN）进行全基因组测序和遗传演化分析,结果显示GoAstV-DBN与AHAU2/2018同源性最高.与参考毒株相比广东地区GoAstV未发生明显变异,但GoAstV-DBN Cap蛋白发生了Y36V和L540Q两个氨基酸突变.本研究可为广东地区GoAstV的防控和疫苗毒株的筛选提供理论依据.     

鹅源大肠杆菌的分离鉴定及致病性研究

针对当前南方养鹅生产中大肠杆菌(Escherichia coli)病频发的问题,从省内规模化养鹅场收集病料,通过分离培养、生化鉴定、血清型鉴定分离不同血清型大肠杆菌,并在小鼠和雏鹅上开展攻毒试验.结果显示:成功分离得到O_(114)、O_(26)、O_(119)、O_(126)和O_(124)5个血清型大肠杆菌,且对小鼠和雏鹅均有不同程度致病性,其中O_(26)对小鼠致病性最强,死亡率达100%;O_(119)对小鹅致病性最强,达50%;O_(124)致病性最弱,均未使动物致死.     

水禽StAR基因克隆、表达及其对睾丸发育的影响

旨在获取水禽StAR基因的结构和组织表达规律，初步了解其对水禽睾丸发育的影响。本研究选取山麻鸭和狮头鹅的下丘脑和睾丸组织为材料，克隆StAR基因，并采用实时荧光定量PCR方法检测该基因在山麻鸭和狮头鹅不同组织中的表达规律，并进一步比较该基因在不同时期鹅睾丸组织中的表达差异。本试验克隆获得鸭StAR基因3个转录本（dSTAR-A、dSTAR-B和dSTAR-C），dSTAR-A和dSTAR-B编码序列相同，编码283个氨基酸，而dSTAR-C编码238个氨基酸；获得鹅STAR基因两个转录本（gSTAR-A和gSTAR-B），均编码283个氨基酸。比对分析发现，鸭和鹅StAR氨基酸序列与其他禽类的同源性较高，在物种间的保守性高。StAR基因在鸭和鹅的各个组织中均有表达，其中在睾丸中表达量最高，在腹脂、胸肌和腿肌也有较高的表达水平。比较不同时期公鹅的睾丸，发现该基因在3岁龄时表达水平极显著高于1和52日龄（P<0.01），且在成年公鹅繁殖期的表达水平极显著高于休产期（P<0.01）。结果表明，StAR基因可能是鹅睾丸发育所必需的关键基因，并参与成年公鹅繁殖性能的调控。     

两种不同肉鹅杂交配套方式效果比较

为了研究马岗鹅的杂交改良效果,试验比较了两种肉鹅杂交配套生产方式的效果:马岗鹅母鹅与"阳江白沙鹅"公鹅杂交(简称"阳马鹅");四川白鹅母鹅、马岗鹅公鹅的杂交一代母鹅(简称"马川鹅")与马岗鹅公鹅进行杂交(简称"马马川鹅")。测定0~90日龄杂交鹅的体重和体尺变化,在70和90日龄对杂交后代进行屠宰测定,并记录"马川鹅"的第一个产蛋期的产蛋性能。结果表明:"马马川鹅"的体重在早期极显著低于"阳马鹅"(P0.01),到90日龄时与"阳马鹅"相当;"马马川鹅"各个体尺指标几乎均低于"阳马鹅",饲料转化率也均低于"阳马鹅"。"马川鹅"产蛋时间历时9个多月,平均每只母鹅累计产蛋44.08个。研究表明,通过杂交后的"马马川鹅"繁殖性能比父本马岗鹅高,且具有较快的生长速度和较好的产肉性能。     

肉用种鸡产蛋后期繁殖性能与氧化应激的相关性研究

如何控制产蛋高峰过后产蛋率下降过快是饲养肉用种鸡最关键的问题,氧化应激是引起母禽卵巢功能下降的主要因素之一,但氧化应激与肉用种鸡产蛋后期繁殖性能的关系尚不清楚,本试验随机选取连续产蛋15周和22周的种母鸡各6只,测定血清、肝脏和卵巢组织过氧化氢酶（CAT）、超氧化物歧化酶（SOD）、一氧化氮合酶（NOS）、一氧化氮（NO）、丙二醛（MDA）及谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）等6个抗氧化指标,以及卵巢功能的差异,结果显示产蛋15周和产蛋22周的种母鸡卵巢指数、等级前卵泡(大白卵泡和小黄卵泡）数量差异不显著;随着产蛋周龄的增加,种鸡机体氧化损伤程度加剧,种鸡血清和肝脏组织中的SOD,CAT,NO及GSH-Px显著或极显著降低（P<0.05或P<0.01);产蛋15周种鸡肝脏中GSH-Px和CAT均显著高于产蛋22周（P<0.05),而NOS和MDA则显著低于产蛋22周（P<0.05);卵巢组织的6个抗氧化指标均差异不显著. 产蛋22周种鸡血清中的促性腺激素释放激素（GnRH）浓度与雌二醇（E2）浓度均显著低于产蛋15周样品组（P<0.05或P<0.01),血清中GnRH浓度与血清SOD,CAT和NO水平之间存在显著正相关;血清中E2浓度与血清CAT和NO水平之间存在显著正相关;结果表明,肉用种鸡产蛋高峰过后卵巢机能衰退可能与血清和肝脏氧化损伤不断累积和加重相关.