新型鹅星状病毒一步法RT-PCR检测方法的建立与应用

新型鹅星状病毒（goose astrovirus, GoAstV）感染引起的鹅痛风病,是近年严重危害我国养鹅业的传染病之一,给我国养鹅产业造成严重经济损失,快速准确诊断有助于更好地防控该病。为了建立一种鉴定新型GoAstV的一步法RT-PCR方法,根据新型GoAstV ORF2基因序列设计特异性引物,构建质粒标准品,并对引物用量和退火温度等反应体系和条件进行了优化。结果表明,该方法能特异性扩增新型GoAstV 512 bp基因片段,其他鹅常见病毒性病原扩增结果均为阴性,具有较高的特异性。敏感性试验结果提示,最小检测限量达4.54×10²拷贝/μL。此外,该方法重复性良好,应用所建立的方法对新型GoAstV临床样品进行检测,102份鹅泄殖腔拭子的阳性率为46.08%,24份痛风症状患病鹅内脏样本阳性率为91.70%。本研究建立的新型GoAstV一步法RT-PCR检测方法具有良好的特异性、敏感性和重复性,且操作简便、经济、快速,可用于新型GoAstV的临床鉴别诊断和流行病学调查。     

安徽省5株新型鹅星状病毒的分离鉴定与遗传进化分析

为研究近年来引起雏鹅痛风病的新型鹅星状病毒流行毒株的病原学和遗传学特征，于2018—2021年从安徽省疑似感染新型鹅星状病毒的雏鹅中采集病料，使用健康鹅胚进行病毒分离，并对分离到的毒株进行全基因组测序和序列分析。结果表明，共分离鉴定到5例新型鹅星状病毒感染样品，利用鹅胚盲传3代成功分离到5株新型鹅星状病毒，均可在鹅胚上稳定传代，分别将其命名为AHAU2018、DY-19、ZY02、HR2105/2和HR2110/1株。全基因组测序结果表明，5株分离毒株的基因组全长均为7 175 nt。系统进化树分析结果表明，5株分离毒株均属于致雏鹅痛风的新型鹅星状病毒，但2019年前的毒株与2019年后的毒株处于不同的进化亚分支上。新型鹅星状病毒在我国已发生变异，出现了新的进化亚分支，但优势基因型是否发生变化还有待进一步研究。     

鹅副粘病毒病的防治

鹅副粘病毒病是1997年以来在我国新发生的一种以消化道症状和病变为特征的急性传染病。该病在全国许多省市的鹅群中流行,给鹅场造成了极大的危害,已成为我国养鹅业危害最大的传染病之一。主要感染60日龄以下雏鹅,尤以15日龄以下雏鹅的发病率和致死率最高。该病一年四季均可发生,多流行于春季和夏季,各个品种的鹅均具有易感性,日龄越小发病率和死亡率越高,随着日龄的增长,易感性有所下降,为了研究鹅副粘病毒病的致病机理、免疫机理以及特异性的诊断和防治,国内多家科研院所在病原的分离与鉴定、流行病学、病理变化的研究等方面做了大量的工作,取得了较大的进展。     

凤台县疑似小鹅瘟流行病学调查

调查了凤台县39户7776羽雏鹅疑似小鹅瘟的流行情况。结果表明,10日龄以内的雏鹅最易感染,其发病率达81.13%(1720/2120),病死率达93.26%(1604/1720);规模养殖鹅群发病率36.68%(2014/5490)较农户散养鹅群发病率30.45%(696/2286)高,而其病死率79.54%(1602/2014)则较农户散养鹅群95.55%(665/696)低。     

浅述鹅病的综合性防控措施

目前养鹅业正在稳定蓬勃发展,养鹅业又是节粮型的畜牧业,以草食为主。因此,要快速发展养鹅业,必须控制疾病,制定合理的综合性防控措施。1采取科学的饲养管理,提高鹅的抗病力 1.1把好引种关 引进的种雏和种鹅,必须来自于健康和高产的种鹅群。外来鹅隔离观察20天后,未发现疾病的才允许混入原来的鹅群或鹅场,     

一株雏鹅痛风型鹅星状病毒的分离鉴定及其生物学特性研究

[目的]2017年以来,在中国东部地区的许多鹅场中,4—16日龄雏鹅暴发了严重的痛风,导致2%～20%的死亡率,给养鹅场带来巨大经济损失,本试验旨在分离、鉴定导致此次雏鹅痛风的病原并分析其生物学特性。[方法]将发病雏鹅病料接种10日龄鹅胚,分离病毒,通过PCR、基因测序和系统进化分析对分离的病毒进行鉴定;病毒尿囊液接种鹅肾脏上皮细胞测定病毒滴度;攻毒扬州白鹅雏鹅进行动物回归实验,观察剖检和组织病理变化,PCR方法检测肛拭子和各脏器病毒含量,ELISA方法检测血清中尿酸含量。[结果]从第3代鹅胚尿囊液中分离到一株鹅星状病毒(GAstV),命名为JSHA株。对星状病毒ORF2基因氨基酸进化树的分析结果表明,JSHA毒株与2018年从患痛风的鹅上分离得到的星状病毒毒株(SD01、SDPY、GD)具有99%以上的同源性,而与其他禽星状病毒同源性仅为27.3%～57.0%。阳性尿囊液感染鹅胚肾脏上皮细胞后出现变圆、聚团和脱落等细胞病变,病毒滴度为10~(4.25) TCID_(50)·mL~(-1)。动物回归实验结果显示,该病毒可致雏鹅25%的死亡率,发病鹅体质量减轻、肾脏发白肿胀、脏器表面和关节腔内尿酸盐沉积以及血清尿酸升高;组织病变表现为肾小管上皮细胞变性坏死,尿酸盐结晶形成,大量炎性细胞浸润,肝脏和脾脏中出现坏死区和炎性细胞浸润;组织病毒载量结果显示肾脏、肝脏和脾脏的病毒载量高于其他组织;雏鹅从感染后3 d开始排毒,排毒高峰出现在6～9 d。[结论]鹅星状病毒JSHA毒株是此次雏鹅发生痛风的主要原因。     

鹅副粘病毒病的防治

1997年以来,江苏、广东、上海、浙江、江西、山东、安徽等地的鹅群发生了一种以整个消化道粘膜结痂、溃疡、出血、坏死为特征的急性传染病,发病率和死亡率都很高,对鹅业造成威胁,后经确诊为副粘病毒感染引起的鹅副粘病毒病。我省今年也有发生,应该对这种新疫病引起高度重视。1　流行特点　本病一年四季都可发生和流行,各种日龄的鹅均有易感性,日龄越小发病率越高,不同日龄鹅的发病率30%～100%,平均60%左右,死亡率30%～100%,平均40%左右。10日龄以内的雏鹅发病率和死亡率可高达100%,11～15日龄雏鹅为90%以上。随鹅群日龄的增长,发病率和死亡…     

科学养鹅讲座(七)鹅病防治

一、鹅病的传播流行鹅传染病与寄生虫病发生和流行过程,必须具备3个基本环节,即传染源、传播途径和易感动物。传染源,指正在患病或隐性感染的带菌(毒)与带虫的鹅,健康带菌、带毒或带虫者有时也包含非同种动物。传播途径,鹅的多数传染病是由病鹅污染的饲料、饮水、土壤、空气、垫料等传播的,饲养人员、饲养用具、车辆、野兽、老鼠也可传播病源。易感动物,鹅对某种疫病缺乏免疫力,病原侵入,就能引起某疫病在鹅群中感染传播。二、鹅场的综合性防疫1.增强鹅群自身抵抗力①引进的雏鹅和种鹅必须来自健康高产的种鹅群。②配制日粮要突出多样性,精…     

小鹅瘟的综合防治

小鹅瘟是雏鹅的一种由病毒引起的急性败血性传染病,多发生于3～25日龄的雏鹅,个别1个月以上的小鹅也时有发生.雏鹅的日龄愈小,对本病的易感性愈高,成年鹅未发现有自然感染的病例.发病率和死亡率的高低,在很大程度上取决于被感染雏鹅的日龄,以及母鹅群受感染状况和免疫的程度.通常经过1次大流行之后,当年剩下来的鹅都是患病后痊愈或是经过隐性感染的鹅,因而获得了免疫力,这种鹅产的种蛋孵出的雏鹅具有被动免疫力,能抵抗小鹅瘟病毒的感染而不发病.因此,本病的流行常具有一定的周期性,在1次大流行后的1年或数年中,往往不见或少见发病,但以后又会暴发.     

小鹅瘟的诊治

<正>一、发病情况。1.本病全年均有发生,但多发生于春季,主要侵害3～20日龄的雏鹅。2.鹅群发病呈暴发流行,发病突然,传播迅速,具有高度的传染性和死亡率。3.饲养管理水平低,育雏温度低,鹅舍地面潮湿,卫生环境差,鹅     

浙江地区鹅星状病毒分离鉴定及其衣壳蛋白多克隆抗体的制备

鹅星状病毒(GAstV)是当前鹅养殖业的重要病原,易引起雏鹅内脏痛风症状和死亡,造成巨大经济损失。于浙江省内采集30份病料,进行核酸检测、病原分离和测序,并克隆其ORF2序列至pET-28a原核表达载体,转化BL21菌株后经诱导获得衣壳蛋白,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。结果显示,临床死亡雏鹅剖检均发现典型内脏痛风症状,核酸检测鉴定为鹅星状病毒阳性,且出现不同基因型鹅星状病毒混合感染情况。共分离得到ZJC14和ZJLD20两个毒株,其中,ZJLD20在鹅胚和LMH细胞中均稳定增殖,但ZJC14并不能适应LMH细胞。病毒基因组测序显示,ZJC14与ZJLD20亲缘关系较远,ZJC14属于GAstV-Ⅰ基因型,而ZJLD20为GAstV-Ⅱ基因型。重组表达载体pET28a-ORF2诱导后获得纯化目的蛋白,经免疫成功制备兔源多克隆抗体,该抗体可与目的蛋白结合。此外,间接免疫荧光和Western-blot试验结果显示,ZJLD20衣壳蛋白制备的多克隆抗体可与病毒结合反应。研究成果有利于后续对该病原致病能力的研究,同时,试验制备的ORF2衣壳蛋白与多克隆抗体为鹅源星状病毒感染的诊断试剂开发奠定了基础。     

广东地区外来植物南美蟛蜞菊入侵的历史阶段与特点

广东是物种跨国界、跨洲界迁移最为密集的省份之一.南美蟛蜞菊是广东地区主要的外来入侵植物,对本土植物的生存及生态环境的稳定性造成严重威胁.广东地区南美蟛蜞菊的入侵可分为3个历史阶段:引进利用与逸生建群时期、大规模暴发与危害时期、防治与利用共存时期.南美蟛蜞菊在广东快速扩散蔓延主要因为盲目绿化种植,化感作用则是其造成危害的主要手段.     

广东省猪圆环病毒2型毒株分离 及全基因序列分析

为了解广东省猪圆环病毒2 型(PCV2）的流行、变异及进化情况,对2013 年广东省多个猪场发生PCV2 感染的病猪血清进行PCV2 病毒分离,参考GanBank 上已发表的PCV2 全基因序列,设计3 对引物,用PCR 方法扩 增其全基因序列,测序并进行序列分析。结果分离到9 株PCV2 毒株,全基因序列长度都为1 767 bp。同源性分析表 明,9 株PCV2 分离株核苷酸同源性为93.6%~99.4%,与2012 年分离株同源性为94.5%~99.7%,与2011 年分离株同 源性为94.2%~99.7%,与GenBank 中其他PCV2 分离株的同源性为93.2%~99.7%。9 株PCV2 的ORF2 核苷酸及其推 导的氨基酸序列同源性分别为89.0%~99.9%和86.4%~100%,存在一定的变异。基因型分析表明,有5 株属于 PCV2d,3 株属于PCV2b,1 株属于PCV2a。对2011要2013 年分离的PCV2 基因组特征进行分析,发现PCV2 核苷酸序 列比较稳定,与世界其他分离株也具有较高的同源性。     

广东省近60年极端气温的时空演变研究

极端气温反映了气候变化的趋势， 对极端气温的时空特征进行深入分析能更准确地预报各种极端天气事件的发生.根据广东省1961-2019年的36个台站逐日最高气温和最低气温资料，利用RClimDex模型、结合Mann-Kendall 非参数检验方法及空间插值、Pearson相关性分析等方法探究了广东省近60年间极端气温的时空演变特征. 结果表明，广东省在近60年间，极端气温指数的年际倾向率呈现上升趋势，在近10年以来极端气温变化趋势的上升幅度更为明显，表明广东省近60年间极端气温呈显著变暖趋势. 极端高温指数中极高值（Max Tmax, TXx）和日最低气温的极低值(Min Tmax, TNn)发生突变的时间分别在90年代末期和80年代初期，且TNn、日最低气温的极高值(Max Tmin, TNx)率先开始呈上升趋势. 空间分布上，TXx表现为离海岸线的距离越远，温度越高，日最高气温的极低值(Min Tmax, TXn)、TNn刚好与之相反，TNx则表现为纬度越高温度越低，呈现出海陆地带性和纬度地带性特征. 广东省不同区域极端气温极值指数变化趋势与整个广东省情况大体一致，但珠三角地区的极端气温极值指数上升趋势更快. 极端气温指数与自然、社会经济因素均存在相关性，其中纬度和人口数量对其影响更大.     

广东福寿螺暴发危害状况调查及防治对策

为了解广东部分地区福寿螺的暴发危害状况,以问卷调查的方式对广东省19个地级市福寿螺暴发危害状况进行了研究。结果表明:大约有50%的受访农民认为,每年大约有1/2的稻田遭受到福寿螺危害,若不采取控制措施,38%的受访农民认为减产将超过50%;杀螺剂和人工拾取是农民防治福寿螺的主要方式;福寿螺通常会被作为动物饲料加以利用;广东地区双季稻的种植模式受福寿螺侵害的风险较高。针对存在问题及危害状况,提出了相应的对策建议。     

珠江三角洲水稻白叶枯病流行模型的研究

 本文对珠江三角洲50年代中期至今的水稻白叶枯病的流行变动进行了系统的调查和分析。用多元回归和逐步回归法在IBM-PC/XT电子计算机上建立了5个多因子流行模型，用X#+（2）-法检验模型的理论值和实测值的拟合概率均达99.5%，经1986、1987年的实际数据检验，效果相符。     

2013年龙眼生产投入产出与经济效益分析——基于对广东和广西农户的调查

在对广东和广西农户调查数据基础上,研究两个地区龙眼在成本结构、产出结构、成本收益、生产效率及要素密集度等方面的差异.结果表明,2013年广东龙眼售价总体高于广西龙眼,但每667 m2产值与每667 m2产量较低,因此广西龙眼生产的收益率远高于广东龙眼.广西龙眼生产系统对资源和要素投入的转化率、产出率高于广东龙眼.广东龙眼生产投入主要是土地和劳动力,广西龙眼更注重物质成本投入.从各要素投入和产出效益来看,增加资本的投入,不仅有利于提高龙眼总体产出水平,也有利于提高龙眼经济效益、促进农民增收.     

小鹅瘟病的诊治报告

通过对病例的发病情况、流行特点的调查和临床症状、剖检变化的观察，结合实验室检验，对确诊的小鹅瘟疫病采取预防与治疗措施；种鹅接种小鹅瘟疫苗．是预防本病的最经济有效途径。     

用判别分析法预测早稻穗瘟流行程度的研究

应用判别分析法对 1 981～ 1 995年广东化州市早稻穗瘟的流行程度进行了分析 ,建立了早稻穗瘟流行程度的判别函数。经检验 ,判别效果显著 ,而且历史符合率达93 .3 % ,1 996～ 2 0 0 0年的预报准确率达 80 %。     

七彩山鸡痛风病的防治

对因饲喂高蛋白饲料和药物使用不当而引发的七彩山鸡痛风,制定治疗方案,以验证其治疗效果,为临床生产提供适合的治疗和预防措施。结果表明,控制饲料中蛋白质的含量,在饲料中添加维生素,使用碱质缓冲剂,可防治七彩山鸡痛风病的暴发。