大鼠肝细胞与kupffer细胞的分离与鉴定

本研究旨在建立一种简单有效的分离大鼠肝细胞和kupffer细胞的方法。大鼠体外肝脏灌流,采用percoll密度梯度分离法分离肝细胞与kupffer细胞,糖原染色鉴定肝细胞,墨汁吞噬实验鉴定kupffer细胞。结果表明,此方法分离的肝细胞和kupffer细胞活性都在95%以上,新分离的肝细胞鹅卵石样,贴壁能力不是特别强,24 h可分化出不同形态。Kupffer细胞具有较强的吞噬能力和贴壁能力,可看到墨汁被细胞吞噬。结论:本实验建立的分离培养方法较稳定,为开展肝细胞和kuffer细胞的相关研究提供方法依据,也为建立各种体外细胞分离培养方法提供借鉴。     

蛋壳粉少量替代石粉对蛋鸭产蛋性能、蛋品质及钙代谢的影响

【目的】研究蛋壳粉少量替代石粉对蛋鸭产蛋性能、蛋品质和钙代谢的影响。【方法】试验选择80只180日龄的健康山麻鸭蛋鸭,随机分为两组,每组5个重复,每个重复8只蛋鸭。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮基础上,用2 g蛋壳粉取代饲料中等量的钙添加量。试验为期56 d,试验期间检测蛋鸭产蛋性能、蛋品质、钙沉积量、血液中钙磷含量和钙代谢相关激素水平等指标。【结果】试验组平均蛋重、蛋壳强度和蛋白高度均显著高于对照组,表明添加蛋壳粉能明显提高蛋品质量。试验组蛋壳钙沉积量、血磷含量和血浆甲状旁腺素水平显著高于对照组,试验组血钙含量为4.74(±1.17)μmol/mL,极显著高于对照组的2.79(±1.00)μmol/mL,表明蛋壳粉更有利于钙沉积,能明显提高血液中钙磷含量和甲状旁腺素水平。【结论】蛋壳粉少量替代石粉可促进蛋鸭钙吸收代谢和蛋壳钙沉积,提高平均蛋重,改善蛋品质。     

水禽StAR基因克隆、表达及其对睾丸发育的影响

旨在获取水禽StAR基因的结构和组织表达规律，初步了解其对水禽睾丸发育的影响。本研究选取山麻鸭和狮头鹅的下丘脑和睾丸组织为材料，克隆StAR基因，并采用实时荧光定量PCR方法检测该基因在山麻鸭和狮头鹅不同组织中的表达规律，并进一步比较该基因在不同时期鹅睾丸组织中的表达差异。本试验克隆获得鸭StAR基因3个转录本（dSTAR-A、dSTAR-B和dSTAR-C），dSTAR-A和dSTAR-B编码序列相同，编码283个氨基酸，而dSTAR-C编码238个氨基酸；获得鹅STAR基因两个转录本（gSTAR-A和gSTAR-B），均编码283个氨基酸。比对分析发现，鸭和鹅StAR氨基酸序列与其他禽类的同源性较高，在物种间的保守性高。StAR基因在鸭和鹅的各个组织中均有表达，其中在睾丸中表达量最高，在腹脂、胸肌和腿肌也有较高的表达水平。比较不同时期公鹅的睾丸，发现该基因在3岁龄时表达水平极显著高于1和52日龄（P<0.01），且在成年公鹅繁殖期的表达水平极显著高于休产期（P<0.01）。结果表明，StAR基因可能是鹅睾丸发育所必需的关键基因，并参与成年公鹅繁殖性能的调控。     

两种不同肉鹅杂交配套方式效果比较

为了研究马岗鹅的杂交改良效果,试验比较了两种肉鹅杂交配套生产方式的效果:马岗鹅母鹅与"阳江白沙鹅"公鹅杂交(简称"阳马鹅");四川白鹅母鹅、马岗鹅公鹅的杂交一代母鹅(简称"马川鹅")与马岗鹅公鹅进行杂交(简称"马马川鹅")。测定0~90日龄杂交鹅的体重和体尺变化,在70和90日龄对杂交后代进行屠宰测定,并记录"马川鹅"的第一个产蛋期的产蛋性能。结果表明:"马马川鹅"的体重在早期极显著低于"阳马鹅"(P0.01),到90日龄时与"阳马鹅"相当;"马马川鹅"各个体尺指标几乎均低于"阳马鹅",饲料转化率也均低于"阳马鹅"。"马川鹅"产蛋时间历时9个多月,平均每只母鹅累计产蛋44.08个。研究表明,通过杂交后的"马马川鹅"繁殖性能比父本马岗鹅高,且具有较快的生长速度和较好的产肉性能。     

OPN5对鸭颗粒细胞凋亡、增殖及类固醇激素生成的影响

旨在研究视神经蛋白（neuropsin,OPN5）对鸭颗粒细胞凋亡、增殖及类固醇激素生成的影响。本研究分别对鸭颗粒细胞进行OPN5过表达质粒和OPN5 siRNA处理72 h （n=6）,应用EdU细胞增殖检测技术、流式细胞技术、Annexin V-FITC、RT-PCR、Western blot及ELISA技术系统地检测颗粒细胞的增殖、凋亡情况及生殖相关基因的mRNA、蛋白水平及激素水平的变化规律。结果显示,OPN5过表达能促进鸭卵泡颗粒细胞增殖,抑制鸭卵泡颗粒细胞凋亡;能极显著地促进GnRHR、FSHR、LHR的表达 ,并抑制GnIH、GnIHR的表达（P<0.01）;能显著或极显著上调StAR、CYP11A1、3β-HSD、CYP17A1、CYP19A1的mRNA水平（P<0.05或P<0.01）;显著升高OPN5、3β-HSD及CYP19A1的蛋白表达水平（P<0.05）和极显著升高E2、P4分泌水平（P<0.01）,并极显著降低INHβ的水平（P<0.01）。OPN5 siRNA能够显著降低OPN5的表达水平（P<0.01）,抑制卵泡颗粒细胞增殖并促进凋亡,极显著下调GnRH、GnRHR、FSHR、LHR（P<0.01）,促进GnIH、GnIHR的表达（P<0.01）;并极显著抑制StAR、CYP11A1、CYP17A1的表达（P<0.01）;显著降低OPN5、3β-HSD及CYP19A1蛋白表达水平（P<0.05）及极显著降低E2、P4的分泌水平（P<0.01）,并能极显著升高INHβ的水平（P<0.01）。研究表明,OPN5能促进鸭卵泡颗粒细胞的增殖,抑制其凋亡,促进颗粒细胞中类固醇激素的生成和分泌。     

不同生长期狮头鹅体尺性状、屠宰性能和种蛋品质的测定与分析

本研究旨在更好地了解广东狮头鹅的生产性能,为狮头鹅育种和生产提供参考。本试验比较不同生长期狮头鹅体重、体尺及屠宰性能,同时测定种蛋品质。结果表明:1 ~70日龄期间狮头鹅体重增加较快,70及120日龄的公母体重存在显著性差异(P<0.05);120日龄狮头鹅各项体尺较70日龄高,且公鹅的增长趋势较母鹅更快;不同生长期公鹅体重、肝重、翅重和脚重显著高于母鹅(P<0.05),而腹脂率和胸肌率却显著低于母鹅(P<0.05);120日龄狮头鹅体重、胸肌率、翅重和脚重显著高于70日龄(P<0.05),而肝重却显著低于70日龄(P<0.05)。狮头鹅蛋重壳质量较好,有利于保存,蛋品质也较高。     

两种不同养殖模式对肉鹅生长性能和粪便微生物区系的影响

为了解笼养和平养模式对肉鹅生长性能和粪便微生物区系的影响,试验将70只0日龄马岗鹅随机分为笼养组和平养组,每组35只,记录肉鹅的死淘率、体重和采食量,到9周龄试验结束时,检测血液生长激素水平,并用16S rRNA测序技术分析和粪便微生物区系变化.结果 显示:在整个试验期,笼养组的死淘率和料重比均高于平养组,且料重比呈极...     

笼养模式对肉鹅生长性能和抗氧化指标的影响

为探究笼养模式对于肉鹅产出回报的影响,跟踪检测了笼养与平养模式对生长发育期马岗鹅的成活率、生长性能及血液抗氧化指标的影响,结果发现,整个试验期,笼养组肉鹅死淘率为17%,明显高于平养组的9%;3周龄以前,笼养组与平养组生长性能较为接近,且笼养组略优于平养组,笼养组肉鹅的体质量、饲料回报率在3周龄以内也比平养组高;但3周以后其生长发育受到显著性抑制,体质量增长、饲料转化率和多数体尺指标均显著低于平养组;且笼养组谷胱甘肽还原酶（Glutathione reductase,GR）、超氧化物岐化酶（Superoxide dismutase,SOD）、丙二醛（Malondialdehyde,MDA）均比平养组高,过氧化氢酶（Catalase,CAT）较低.结果表明3周龄前笼养模式较平养模式更有利于鹅的生长发育和饲料转化,3周龄后受空间限制和环境应激影响,平养模式对肉鹅生长性能较笼养模式有着更明显的优势.     

反季节生产中马岗鹅与狮头鹅繁殖性能的观察

为调查和了解广东鹅反季节生产中的潜在问题和改进空间,以广东省主导鹅种马岗鹅和狮头鹅为研究对象,观察并分析了反季节生产中两鹅种全年的产蛋性能、种蛋受精、孵化及孵化过程中胚胎死亡等情况.研究结果显示,马岗鹅和狮头鹅的年均产蛋数分别为41.5和29.7枚,受精率为66.3%和73.0%,种蛋孵化率为57.0%和62.2%,受精蛋孵化率为86.1%和86.4%,总死胚率为9.4%和9.0%;种鹅公母比例和气温条件对受精率和孵化率有明显影响;孵化前半段胚胎死亡率高于后半段.结果表明,狮头鹅的反季节生产技术更为成熟,马岗鹅的反季节生产技术还有待提高,环境温度、公母鹅比例等是影响马岗鹅生产性能和孵化效果的主要因素.     

狮头鹅RFRPR基因克隆和组织表达

RFRPR是下丘脑神经肽促性腺激素抑制激素(GnIH)的受体,为了获取鵝RFRPR基因结构及其在各组织中的表达情况,本研究采用獅头鹅作为实验材料,采集其下丘脑、睾丸和肌肉等组织样品提取RNA逆转录后,应用RT-PCR克隆的方法对RFRPR基因进行克隆,并用RACE扩增cDNA全长序列,同时运用实时荧光定量PCR的方法检测鵝RFRPR基因的组织表达规律。结果我们获得鵝RFRPR基因4个不同转录本V1-V4,这4个转录本的编码序列一样,共1200bp,编码399个氨基酸;荧光定量检测发现RFRPR基因在鹅的12个组织中均有表达,其中,在睾丸的表达量最高,在胸肌、腿肌和小脑表达量也相对其他组织较高,而在脾脏肾脏和十二指肠中表达量较低。这些结果表明RFRPR基因可能参与调控獅头鶴的公鹅的繁殖和肌肉生长。