MTT试验中细胞特性状态及细胞数与OD值的关系探讨

MTT比色法是用于检测体外培养细胞生长存活及数目的方法之一。细胞特性，接种密度是否理想直接关系到实验结果的准确性和客观性。为了进一步提高MTT法在不同条件下检测细胞活性的灵敏性和显著性，本文以神经细胞有PC12细胞为实验材料，探讨了它们在正常及病理生长状态下，细胞数目与MTT法所得细胞活性的OD值之间的关系，比较了不同数目细胞活性OD值之间的差异。最后得到OD值得显著性差异的最佳细胞浓度范围。     

利用SAGE方法分析家蚕基因表达数目的初探

SAGE(serial analysis of gene expression)是基因表达水平差异分析和大规模发现新基因的分子生物学技术。已构建了家蚕卵、幼虫、蛹、成虫等4个不同发育时期的SAGE表达库,经测序分别得到69 100、62 232、63 966和62 666个基因标签序列,其中特异标签数目依次为17 718、13 243、14 044和15 224。这些特异标签数目即为家蚕在这4个不同发育时期的基因转录本数量。根据测序数与获得标签的数量动态监测,发现测序的数目尚未达到饱和,因此基因转录本的数目还可能会有所增加。在上述研究的基础上,利用SAGE数据为基础,采用双倒数作图求最大值的方法,推测出了家蚕在4个不同发育时期的基因表达数目,同时也发现家蚕卵期的基因表达数目远远大于其它3个时期。     

骡子不能生育的原因分析

大多数哺乳动物是通过雌、雄交配产生，实际上是雌性细胞和雄性细胞的结合，而性细胞（在雄性称精子，雌性称卵子）是通过减数分裂的方式形成。在这个过程中，性细胞染色体的数目较母体细胞的染色体减少了一半，也就是说，性细胞染色体数目只有母体细胞染色体数目的1／2。染色体是细胞进行分裂时主要遗传物质的存在形式。同种动物的染色体数目一定，且每种生物个体中的每个细胞染色体数目也是相同的，亦即体细胞与性细胞染色体数目也相同。     

小鼠胚胎计数方法的研究及应用

胚胎细胞计数是评定胚胎活力,检验胚胎体外操作方案和培养效果的常用方法。实验以昆明小鼠体内发育胚胎和体外聚合囊胚为实验材料,对几种细胞的计数方法及应用进行了详细的研究。结果表明:（1）低渗压片法的实验效果最佳。（2）根据形态学观察,结合细胞计数,可以把小鼠8-细胞以后胚胎划分为:8-细胞晚期[细胞数目为（11.9±0.65）个];同一时间收集的桑椹胚和早期囊胚细胞数目相似;不同时间收集的囊胚细胞有明显差异。（3）细胞计数分析表明:8-细胞聚合胚发育形成聚合囊胚时,其细胞数目未发生调整。     

禽流感病毒HA基因DNA疫苗诱导鸡CD8+T细胞的动态变化

用表达禽流感病毒血凝素HA抗原的重组质粒pCAGGoptiHA5 100μg免疫SPF鸡,用流式细胞仪检测鸡体内CD8 T细胞的动态变化。一次免疫后,免疫组外周血中CD8 T淋巴细胞数目逐渐上升,并于第3周达到峰值,在二次免疫后,SPF鸡体内CD8 T细胞数量上升速率明显高于初免时上升速率,并于第二次免疫后2周达到一个峰值,攻毒后,二次免疫的SPF鸡外周血中CD8 T淋巴细胞数量略有上升,但上升幅度不大,2周时检测发现其下降幅度明显低于一次免疫组。而阴性对照组SPF鸡外周血中CD8 T淋巴细胞的数目则无明显变化,但在攻毒后其外周血中CD8 T淋巴细胞数量也呈上升趋势,但未达到免疫组的水平,并且在1周内全部死亡。结果表明,pCAGGopti-HA5 DNA疫苗质粒可诱导有效的细胞免疫应答。     

中药成分小檗碱对小鼠2-细胞胚胎体外培养及移植效果的研究

以添加抗菌素的mCZB液为对照组,筛选比较了中药有效成分小檗碱不同浓度对小鼠2-细胞胚胎体外培养效果的影响,并计数所培养的孵化胚胎细胞数目,观察中药有效成分对胚胎细胞数目增殖的作用;通过将体外培养发育的囊胚进行移植,进一步验证其对小鼠胚胎移植效果和产仔发育的影响。结果表明:小檗碱最佳浓度为0.10μg/mL,120h孵化胚胎发育率和孵化胚胎细胞数目(89.9%,83.7±9.10)极显著高于对照组(50.7%,69.5±7.14)(P<0.01);小檗碱组培养囊胚移植妊娠率(66.7%)和离窝成活率(55.8%)均显著高于对照组(50.0%,45.2%)(P<0.05),其组间产仔率、初产仔鼠平均体重、离窝小鼠平均体重无显著差异(P>0.05)。其结果说明,小檗碱对体外胚胎生长发育和细胞增殖有促进作用,对胚胎附植及初生仔鼠无不良影响。     

堆型艾美耳球虫单克隆抗体细胞株的鉴定

通过对杂交瘤细胞染色体分析、单克隆抗体的免疫组化和免疫荧光等指标的检测，对已建立的单克隆抗体细胞株5B4和5G7进行鉴定，结果表明：两株单克隆抗体细胞株的染色体数目均接近两亲本的染色体数目之和；所建立的单克隆抗体细胞株所分泌的特异性抗体是针对子孢子的。     

湘西黄牛青年牛妊娠前后常规血液生化指标分析

采集湘西黄牛保种区湘西黄牛青年母牛的血液样品,运用兽用全自动血液细胞分析仪进行检测。结果发现妊娠后红细胞压积(HCT)、中性粒细胞数目(Gran)及其百分比极显著降低(P<0.01),平均红细胞血红蛋白浓度(MCHC)、淋巴细胞数目(Lymph)及其百分比显著升高(P<0.05),单核细胞数目(Mon)及其百分比、血小板数目(PLT)显著降低(P<0.05),红细胞分布宽度变异系数(RDW)升高,但不显著(P>0.05)。试验结果表明妊娠后血容量明显增加,导致血液稀释引起红细胞、白细胞、血小板数目降低,而平均红细胞体积(MCV)降低导致的HCT显著降低和RDW升高可能由妊娠母体缺铁性贫血引起。     

酸枣仁皂苷A对U251细胞凋亡的影响

为了探究不同浓度的酸枣仁皂苷A(JuA)对胶质瘤U251细胞凋亡的影响，本试验采用体外常规方法培养U251细胞，设空白对照组及不同浓度的JuA干预组；用Muse^TM细胞分析仪检测各组细胞凋亡率变化；用Hoechst 33258染色后激光共聚焦显微镜下观察细胞形态学改变；用AO/EB染色进一步分析不同浓度JuA干预后U251细胞的凋亡情况。Muse^TM细胞分析结果显示，与空白对照组相比，随着JuA浓度增大，U251活细胞数目明显减少(P<0.01);Hoechst 33258染色阳性细胞数与JuA浓度呈正相关；通过AO/EB染色发现，JuA可明显促进细胞凋亡(P<0.01)。结果表明，50μmol/L JuA对胶质瘤U251细胞具有明显的毒性作用，可促使U251细胞凋亡。     

不同种(品种)金鸡菊的染色体数目鉴定及核型分析

为了区分不同金鸡菊的种质,明确目前广为栽培的金鸡菊的染色体数目及核型特征,采用常规压片法,以60个不同的金鸡菊种质为材料,鉴定其根尖细胞的染色体数目,并选取其中18个籽播系材料进行染色体核型分析。结果表明：60个金鸡菊的染色体数目包括12个类型,染色体数目24~52不等,18个核型分析的材料全部为二倍体,染色体基数存在x=10,12,13,14四种。在6个材料中发现了随体,未发现B染色体,染色体类型包括s,sm,st三种。核型全部为2A,核型整体上较为对称,核型不对称系数为58.56%~64.93%,一年生类型的金鸡菊普遍进化程度更高。亲本复杂的染色体基数及染色体倍性是造成栽培金鸡菊染色体数目多变且产生大量非整倍体的主要原因。本研究从细胞学方面为金鸡菊的分类鉴定和杂交育种提供了理论参考。     

獭兔体细胞染色体研究

对獭兔体细胞染色体常规组型、G-分带核型和18S+28S NoRs定位及数目分布进行了研究。结果表明,獭兔的染包体常规组型为2n=44,12m+11sm+12st+9t;獭兔G-分带核型与Read-ing会议制定的家兔标准G-带核型基本一致;獭兔的Ag-NoRs定位于13、16和20号染色体短臂的端部以及21号染色体长臂端部,单个细胞银染颗粒数目分布范围为1～6个,平均数为3.68个,众数为4。本研究还从细胞遗传学水平对獭兔的品种特征以及与其他品种家兔比较进行了分析.     

绵羊睾丸内分泌细胞的季节变化

本文测量并比较了中国美利奴羊四季睾尺的间质细胞和支持细胞的数目及细胞核大小，结果无论是单位面积，间质细胞的数目，还是间质细胞和支持细胞核的大小，均呈季节性变化。从春季到冬季，在０．１ｍｍ＾２切片上的间质细胞数分别为３４．８０±２．９８，４４．００±２．８０，２７．９５±２．９９和２９．８７±２．２３个；间质细胞核直径分别为５．５１±０．６５，６．１１±２．４８，６．３６±０．９２和４．６８±０．４     

多倍体桑品种的栽培技术

多倍体桑树品种是20世纪90年代随着诱变育种技术的应用,利用秋水仙碱处理桑树营养器官(桑树顶芽、幼苗生长点等),使桑树细胞染色体(遗传物质)数目发生变化,染色体数目出现加倍,由二倍体产生三倍体、四倍体……等多倍体,从中获得许多变异芽,然后经过单芽培育,选拔出实用价值高,经济效益显著的三倍体、四倍体……等多倍体桑树新品种.     

冬季宠物犬胃炎的诊治

今年入冬以后,临床中胃炎的病例开始多见,各年龄段均有发病,临床表现为发热或不发热,恶寒,呕吐清水或黄水且粘稠,大便正常或偏软,腹部无明显痛感,精神多不振,少食或不食,其舌色多淡白,也有绛红,脉多浮弦缓,气轮多青郁或兼有赤红血丝。血常规白细胞均升高至17.0×109/L以上,红细胞数目普遍低于正常范围。询问饲主饲养史,发现此病多见于洗浴后,饮食生冷后,食入鸡骨后,多由受寒和食伤所致。     

互叶白千层油(茶树油)对肉鸡小肠黏膜组织结构及肠道免疫细胞的影响

选用1日龄的雌性岭南黄肉鸡99只,随机分为3组,分别为对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组,每组33只。对照组常规饲养,试验Ⅰ组和Ⅱ组分别在饮水中添加0.012 mL/L和0.020 mL/L的茶树油,试验至45日龄结束。解剖取十二指肠、空肠、回肠进行HE染色和PAS染色,观察小肠黏膜形态、上皮内淋巴细胞及杯状细胞数目。结果显示,2个试验组与对照组相比,各段小肠的绒毛长度增加,肠壁变薄,隐窝深度变浅,肠绒毛高度/隐窝深度比值增加;2个试验组的上皮内杯状细胞和淋巴细胞的数目高于对照组。结果表明,茶树油能够改善肉鸡小肠黏膜结构,增加小肠上皮内免疫细胞数量,提示茶树油对肉鸡的肠道吸收和肠道免疫功能具有增强作用。     

青海湖畔鹅绒委陵菜叶肉细胞超微结构的研究

本文对自然生长于青海湖畔盐碱湿地上鹅绒委陵菜叶肉细胞的超微结构进行了研究。结果表明,生长于青海湖畔的鹅绒委陵菜叶绿体类囊体膜局部被破坏,部分类囊体膜解体,空泡化,甚至消失;线粒体被叶绿体所“吞噬”;叶绿体内具有数目较多、个体较大的淀粉粒。鹅绒委陵菜叶肉细胞超微结构的变化是由青海湖畔盐渍、低温、低气压、强辐射等多种生态因子综合作用的结果。     

少突胶质细胞相关microRNA差异性调控大脑和小脑神经前体细胞的增殖

目的 探讨少突胶质细胞相关microRNA (miRNA)对中枢神经系统神经前体细胞增殖的作用.方法 利用Dicerl loxp/loxp基因型小鼠和Oligl-Cre品系小鼠杂交获得miRNA加工酶Dicer基因条件性敲除小鼠,再用免疫荧光染色和BrdU标记等技术检测这种Dicer条件性敲除小鼠大脑和小脑中神经前体细胞的增殖,以及脊髓中新生神经元的变化情况.结果 Dicer条件性敲除小鼠大脑中神经前体细胞增殖加快,而小脑中增殖细胞数目较正常小鼠减少(12%,P＜0.05).此外脊髓中神经元的数目并未受到影响.结论 少突胶质细胞相关miRNA对中枢神经系统的胶质细胞的发生和增殖具有时空特异性或差异性调节作用.     

山羊乳酪蛋白单克隆抗体的制备与鉴定

制备山羊乳酪蛋白单克隆抗体可以为检测乳品中山羊乳成分提供免疫学检测手段。以山羊酪蛋白免疫Balb/c小鼠,应用细胞融合技术,制备特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体,对获得的阳性杂交瘤细胞进行连续传代和反复冻存以测定其稳定性,并对其分泌的单克隆抗体应用ELISA进行抗体特异性分析,对特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体进行抗体亚型鉴定和染色体组型分析。最终,成功的筛选出可以分泌特异性识别山羊乳酪蛋白的单克隆抗体的阳性杂交瘤细胞株,被命名为7H。经染色体组型分析,染色体数目为102条;单克隆抗体7H类别为IGg1,轻链为κ;经连续传代和反复冻存,ELISA检测细胞上清抗体发现其OD450nm值无显著性差异。     

冷应激对白羽黑凤雏鸡外周血白细胞分类及T淋巴细胞变化的影响

选用190只黑凤健雏在较正常饲养温度低5℃和10℃的条件下进行急性、慢性冷应激及冷适应实验,通过瑞氏和酯酶染色法观察外周血白细胞分类及T淋巴细胞数目的变化,结果表明:在低于5℃实验中,H/L值在急性冷应激期间明显增加;T-淋巴细胞数目显著增加.在低于10℃实验中,H/L值变化规律同5℃实验组,T-淋巴细胞数目先增加后减少.冷适应后,低于5℃实验中,淋巴细胞数目明显升高,提示低5℃冷应激对提高黑凤雏鸡免疫水平是有利的.     

犊牛肺炎双球菌败血病病例报告

幼畜肺炎双球菌败血症,自在仔山羊发现病例后,我们自1955年冬季以来在犊牛又陆续发现本病,在犊牛中引起相当数目的死亡,为了促起乳牛业对于本病应有的注意,特将五个病例之发病情况及剖检变化记述于