GDNF对海仁酸损伤体外培养新生大鼠背根神经节神经元的影响

N1无血清培养基原代分离培养新生大鼠背根神经节（dorsal root ganglion DRG)神经元，用兴奋性毒素海仁酸（kainic acidKA)损伤体外培养细胞后，加入胶质源性神经营养因子（glial-derived neurotrophic factor,GDNF)作用。最后通过MTT法检测，细胞总蛋白测定，胎盘兰染色计数，形态学观察等方法研究分析GDNF对兴奋性毒素海仁酸损伤后大鼠DRG神经元的活性，存活及突起生长的影响，结果表明：GDNF对体外正常生长的DRG神经元的存活，活性及突起生长没有明显的促进作用。而在海仁酸损伤后，GDNF对其存活和活性有明显的促进作用。但对突起生长没有明显的影响。     

嗅鞘细胞对无血清培养诱导PC12细胞凋亡的作用

采用无血清培养诱导PC12细胞凋亡,研究嗅鞘细胞(Olfactory ensheathing cells,OECs)对去血清后诱导PC12细胞凋亡中的作用。通过MTT法检测细胞的活性,细胞形态学观察,以及结合流式细胞仪检测细胞的凋亡率,井对不同组细胞凋亡率进行比较。结果表明：①OECs培养上清对去血清后PC12细胞的存活有明显的促进作用;②从形态学上观察,OECs对去血清诱导PC12细胞凋亡有明显的抑制作用,使得细胞向死亡过渡受阻;②流式细胞对细胞周期分析,去血清诱导后的PC12细胞,大部分细胞滞留在G1期,细胞向S期过渡受阻,造成G1期细胞的堆积,它们所占比例分别为：73．6％,25．9％,0．5％;而OECs联合培养组所占比例：53％,42．3％,4．7％;OECs上清组：42．1％,52．2％,5．7％;正常有血清培养组：45,6％,41．4％,13％。凋亡细胞所占百分比分别为：60．3％,45,6％,37．4％,0．5％。     

MTT试验中细胞特性状态及细胞数与OD值的关系探讨

MTT比色法是用于检测体外培养细胞生长存活及数目的方法之一。细胞特性，接种密度是否理想直接关系到实验结果的准确性和客观性。为了进一步提高MTT法在不同条件下检测细胞活性的灵敏性和显著性，本文以神经细胞有PC12细胞为实验材料，探讨了它们在正常及病理生长状态下，细胞数目与MTT法所得细胞活性的OD值之间的关系，比较了不同数目细胞活性OD值之间的差异。最后得到OD值得显著性差异的最佳细胞浓度范围。     

EGCG对羟自由基损伤小鼠胚胎海马神经元的保护作用

为了探讨表没食子儿茶素没食子酸酚(tea polyphenol(-)-epigallocatechin gal-late,EGCG)对羟自由基损伤小鼠海马神经元的保护作用,采用原代细胞培养技术,分离培养18 d小鼠胚胎海马神经元,培养4 d后,加入FeSO4和H2O2进行处理,随后加入不同浓度的EGCG培养24 h,通过观察细胞的形态学变化,四甲基偶氮唑盐(methylthiazolydi-phenyl-tetrazolium bromide,MTT)比色法分析细胞活性,检测神经元中丙二醛(malondi-aldehyde,MDA)以及培养液中乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)含量的变化,以探讨EGCG对羟自由基损伤神经元的保护作用。结果显示,EGCG能够抑制神经元MDA的产生,降低神经元细胞外液中LDH的含量,增加细胞的活性,从而进一步证明EGCG能够清除羟自由基产生,减轻羟自由基对神经元损伤,对神经元的存活有一定的保护作用,为其用于治疗中枢神经系统病理性损伤的打下实验基础。     

上海地区商品代蛋鸡J亚群禽白血病的病理学观察

对上海地区2个规模化商品蛋鸡场疑似禽白血病病例进行了组织病理学观察和ELISA检测，发现发病鸡群中血管瘤占50％，纤维肉瘤占37．5％，髓细胞瘤占12．59／5，J亚群禽白血病的血清抗体阳性率分别达25％和15％。血管瘤主要见于脚部和翅膀，组织病理学观察表明为海绵状血管瘤，纤维肉瘤主要见于肌肉组织内，对弥漫性肝、脾肿大的病例观察表明肿瘤组织为髓细胞瘤。证实该鸡群感染了J亚群禽白血病病毒，并表现为以髓细胞瘤、血管瘤和纤维肉瘤为主的多种肿瘤性传染病。     

羊垂体前叶降钙素基因相关肽(CGRP)与P物质(SP)免疫反应神经纤维

应用免疫组化ＡＢＣ法发现羊垂体前叶有降钙素基因相关肽免疫反应神经纤维存在,这些纤维呈串球状分布于结节部及远侧部前２／３区域。纤维形态多样,细长者穿行于腺细胞之间;短小弯曲者围绕于腺细胞周围;反复分支折叠盘曲缠绕成团簇状者将腺细胞成堆的网络其中。神经纤维及串珠与腺细胞关系密切,提示有可能对腺细胞分泌起直接支配作用。在纤维分布区域可见散在的免疫反应细胞,形态不规则,大部分与神经纤维无接触关系,但有少数可位于纤维的网络之中。Ｐ物质免疫反应神经纤维及细胞在羊垂体前叶分布稀疏,且多位于结节部,远侧部很少。     

嗅神经鞘细胞条件培养液对PC12细胞活性及分化影响

研究嗅神经鞘细胞(OEC)条件培养液对PC12细胞活性和分化的影响。原代培养并纯化OEC，收集其培养上清并制备条件培养液，然后用其培养PC12细胞，随后于倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化，通过MTT检测PC12细胞活性，免疫细胞染色观察β-tubulin的表达变化。结果显示OEC条件培养液可促进PCI2细胞突起生长，增加细胞活性，促进其β-tubulin的表达升高。从而证明OEC能够分泌一些促进PC12细胞和诱导其向神经元分化的营养因子。     

嗅鞘细胞生物学特性及其在脊髓再生中应用的研究

近年来研究证明嗅球及嗅神经组织可以分离出嗅神经鞘细胞(olfactory ensheathing cells,OECs)，OECs具有中枢神经系统（CNS）星形胶质细胞和外周雪旺式细胞的特性，移植后的OCEs能够在宿主损伤的脊髓组织进行迁移，能够引导支持损伤的神经元突起再生、生长、延伸。而且还可以通过转基因技术使其携带某些促进神经元再生的外源性基因，表达一些促神经再生的分子，从而改善神经损伤的内环境，诱导损伤的脊髓神经元再生，使得受损脊髓再生的潜力得以发挥，达到脊髓再生和功能恢复的目的。本文就OECs的生物学特性及其在脊髓损伤和CNS的基因治疗进行综述。     

GDNF对缺气损伤的体外培养新生大鼠背根节神经元的作用

运用体外缺气损伤的细胞模型,研究GDNF对损伤的新生大鼠背根节神经元(DRG)是否有保护作用.采用原代培养的方法,用N1无血清培养基分离培养DRG神经元24 h后,加入含20 μg/mL GDNF的无血清培养液,然后液体石蜡封闭培养液,继续培养4,8,12,24 h,分别做MTT实验检测细胞活性OD值,台盼蓝染色记数,细胞总蛋白测定以及形态学观察突起生长状况.结果表明:①封闭12 h后,GDNF组的DRG细胞存活数同对照组相比有显著升高(P <0.01),其余各时间点均无显著性差异.缺气损伤8 h和12 h后,GDNF组的DRG细胞总蛋白较对照组显著升高 (** P <0.01,* P <0.05),其余各时间点均无显著性差异;②各时间点 DRG细胞活性及突起长度的变化差异均不显著.缺气损伤一定时间后,GDNF对新生大鼠DRG细胞的存活数及细胞总蛋白有明显的保护作用,而对细胞活性及突起的生长则没有明显的促进作用.