种公猪精液中与繁殖障碍有关的5种垂直传播病毒的检测

为了有效防控由精液垂直传播的病毒病,采用RT-PCR/PCR技术对广西15个中小规模种猪场共248份公猪精液样品进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)等5种与猪繁殖障碍有关的病毒的检测。结果表明:广西部分中小规模种猪场种公猪精液中垂直传播病带毒严重,PRRSV检出率最高,达48.39%(120/248),其次依次为PPV占42.34%(105/248),CSFV占16.94%(42/248),PRV占5.24%(13/248),PCV-2占3.23%(8/248);存在二重、三重和四重混合感染。二重感染中以PRRSV+PPV最为严重,检出率达14.92%(37/248);三重感染以PRRSV+PPV+CSFV检出率最高,达到5.65%(14/248)。检测结果表明部分种猪场公猪精液中垂直传播病带毒情况严重,PRRSV仍然是危害养猪生产的头号大敌,PPV带毒率的迅速升高值得重视。整顿公猪精液市场,加强检疫,淘汰健康带毒猪,搞好种公猪疫病的净化,是控制垂直传播疾病的关键环节。     

云南省部分地区种公猪精液携带繁殖障碍性病毒调查研究

为了解云南省部分地区规模化猪场种公猪精液繁殖障碍病毒性病原的感染状况,应用PCR对2014年—2016年间云南省部分地区规模化猪场212份种公猪精液进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)5种与猪繁殖障碍有关的病原检测。结果表明,PPRSV阳性率为7.08%,CSFV阳性率为3.77%,PCV2阳性率为6.60%,PRV阳性率为3.30%,没有检测出PPV,PRRSV和PCV2的感染率呈上升趋势,其他疫病保持相对平稳态势。所有的混合感染样品中,均检测出了PRRSV,其中PRRSV和PCV2的混合感染最为常见。结果提示,控制猪场疫病发生的关键是控制PRRSV和PCV2的流行,有必要加强对种猪群的疫病病毒检测,推行种猪场主要疫病的控制与净化工作。     

种公猪精液携带繁殖障碍性疫病病原的检测与分析

种公猪精液中携带的相关病毒会在生产中通过水平或垂直传播给母猪或仔猪,造成猪群繁殖障碍性疫病的爆发。为了解由精液垂直传播病毒病感染情况,本研究采用RT-PCR和PCR技术,对2015~2016年云南省某地区种猪场送检的50份精液样品进行猪瘟病毒(Classical swine fever virus,CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)、猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)、日本乙型脑炎病毒(Japanese B encephalitis virus,JEV)和猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV-2)的病毒检测。检测结果显示,CSFV、PRRSV、PPV、JEV和PCV-2均有检出,阳性数和阳性率分别为1份(2%)、2份(4%)、4份(8%)、1份(2%)和2份(4%),总的阳性率为20%。送检的样品既有单一感染,又有混合感染,其中PPV检出率最高。结果表明种公猪精液中存在繁殖障碍相关病毒,PPV带毒率在2016年的迅速升高值得重视,应加强对种公猪精液管理,及时淘汰带毒种公猪。     

种公猪精液中与繁殖障碍有关的6种病毒的检测

采用PCR和RT-PCR技术,于2006年4月～10月对上海及其周边地区的30个猪场和人工授精站的生产公猪精液样品355份进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒(PCV)、猪瘟病毒(CSFV)和日本脑炎病毒(JEV)等6种与猪繁殖障碍有关的病毒的检测,结果表明,日本脑炎病毒检测为阴性,检出PRRSV、PRV、CSFV、PPV和PCV阳性数和阳性率分别为6份(1.69%)、9份(2.54%)、5份(1.41%)、75份(21.1%)、6份(1.69%),有一个猪场的5份样品存在PRV和PPV混合感染.     

湖南省部分原种猪场主要繁殖障碍性疫病的调查

为了解湖南省原种猪场主要繁殖障碍性病原感染情况及免疫抗体水平。从2011年开始,对我省部分原种猪场进行采样;每年监测5个原种猪场,连续4年,共采血清样品900份、扁桃体样本888份。样品进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪细小病毒(PPV)病原检测。结果显示,CSFV、PRRSV、HPPRRSV、PRV、PCV-2和PPV在我湖南原种猪场存在不同程度的感染,病原阳性率分别为0.12%、2.78%、0.45%、5.33%、9.02%和13.5%。血清样品进行了CSFV、PRRSV、PRV(gB)、PCV-2抗体检测,合格率分别为84.9%、90.6%、93.3%合100%。各猪场根据自身情况,加大监测力度,适时开展动物疫病净化工作,并采取严格的生物安全措施,从源头控制疫病的发生。     

江西省规模化猪场公猪精液中5种病毒RT-PCR/PCR检测与分析

为了了解公猪精液是否携带病毒,试验采用PCR/RT-PCR技术对采自江西省3个规模化猪场的111份公猪精液的猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪丁型冠状病毒(PDCo V)进行了检测。结果表明:3个规模化猪场的公猪精液都有不同程度的带毒情况,A猪场和B猪场均检出了PRRSV、PRV和PCV-2三种病毒,C猪场检出了PRRSV和PCV-2两种病毒,所有猪场均未检出PEDV和PDCo V。在111份样品中,PCV-2的阳性率最高,为74.77%;其次是PRV,阳性率为15.32%;PRRSV的阳性率为9.91%;同时还发现存在PRRSV+PCV-2和PCV-2+PRV混合感染的情况,其混合感染率分别为9.01%和13.51%。说明公猪精液也能作为多种病毒,特别是影响猪只健康的重要病毒的传播媒介,从而给猪群的健康带来潜在威胁。     

南充地区规模化猪场4种病毒性传染病的流行病学调查与分析

为了掌握南充地区规模化猪场主要疫病的免疫状况与流行情况,试验分别采用ELISA和PCR/RT-PCR方法对2018,2019年采集的南充地区规模化猪场的1 857份血清样品和152份临床病料样品进行了猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)的血清学和病原学调查。结果表明:CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2免疫抗体合格率分别为87.45%、73.07%、80.02%和93.32%,CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2的感染阳性率分别为9.21%、17.11%、18.42%和22.37%;存在CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2的单独感染和混合感染,总单独感染率为38.16%,总混合感染率为13.82%。说明当前南充地区CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2的疫苗免疫效果整体上较好,但仍存在4种猪病毒病的散发性流行及混合感染,应加强重视。     

一种精液净化保护剂对公猪精子活率的影响及对精液中5种病毒的杀灭作用研究

本实验检测了一种精液净化保护剂对公猪精子活率的影响,以及对存在于公猪精液中猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病毒(PRV)、猪瘟病毒(CFSV)、细小病毒(PPV)和圆环病毒2型(PCV-2)5种猪病病毒的杀灭作用。用不同浓度的精液净化保护剂处理公猪精子,检测精子活率及存活时间。结果表明:当精液净化保护剂的浓度低于1.00%时,精子活率和精液存活时间都优于空白组;用不同浓度的精液净化保护剂处理5种猪病病毒,在非精液环境中,当净化保护剂的浓度分别不低于0.156%(PCV-2)、0.156%(PPV)、0.125%(PRV)、0.125%(PRRSV)、0.156%(CSFV)时,5种相应的病毒都能全部杀灭;在精液环境中,能完全杀灭这5种病毒的净化保护剂浓度分别不低于0.063%(PCV-2)、0.125%(PPV)、0.125%(PRV)、0.125%(PRRSV)、0.250%(CSFV)。实验结果表明,在浓度低于安全使用浓度范围内应用该精液净化保护剂,既能提高公猪精子活率、延长存活时间,又能完全杀灭公猪精液中的5种常见猪病病毒。     

2017—2021年南阳市猪主要病毒病的病原学检测与分析

为了掌握2017—2021年南阳市猪主要病毒病的流行情况，试验应用RT-PCR/PCR方法对采集的261份临床病料样品进行猪瘟病毒(Classical swine fever virus, CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2, PCV-2)、猪圆环病毒3型(Porcine circovirus type 3, PCV-3)、猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)5种病原的检测，并按不同地区、不同年份、不同季节及混合感染和单一感染情况进行统计分析。结果表明：南阳市存在CSFV、PRRSV、PCV-2、PCV-3和PRV的流行，以PCV-2的阳性率(24.52%)最高，PRV(9.96%)次之，CSFV和PRRSV的阳性率(3.45%和3.83%)较低。CSFV、PRRSV、PCV-2、PCV-3、PRV阳性率最高的地区分别为宛城区(6.90%)、镇平县(8.57%)、社旗县(3...     

"猪高热病"的流行病学调查与主要病因分析

按浙江省出现"猪高热病"流行高峰前后两个时段,采集了53个养猪场户的病猪组织病料和114份病猪及健康猪血清样品,应用PCR或RT-PCR同时检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环II型病毒(PCV-2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪流感病毒(SIV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、猪细小病毒(PPV)等7种病毒,应用ELISA方法检测PRRSV、PCV-2、PRV(gE)三种抗体。高热病病猪的病毒检测结果表明,疫情发生前对病猪检测7种病毒性病原,检到PRRSV、CSFV、PCV-2、PRV和PPV共5种病毒,检出率分别为24%、32%、34%、1.5%和0.5%,与发生疫情后的检出率比较,只有PRRSV的病毒检出率呈明显上升,从24%上升到57.7%,PCV-2病毒检出率基本持平,CSFV、PRV和PPV病毒检出率则出现下降或未检到,且流行高峰出现前后均未检到SIV和JEV。抗体检测结果显示,疫情发生后发病猪群的PRRS抗体上升最为显著,从8.97%上升到80.6%,PCV-2抗体从16.7%上升到27.8%,PR(gE)抗体下降为0,提示此次疫病是以PRRS为主要病原或诱因所致的多病原综合性传染病。     

多重PCR对猪病毒性繁殖障碍疾病的调查分析

为了解猪群中病毒性繁殖障碍疾病的流行状况,用多重PCR诊断方法,对太原市附近14个养猪场和门诊病例共1068份样品进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒（PRRSV）、猪瘟病毒（CSFV）、猪细小病毒（PPV）、猪伪狂犬病病毒（PRV）、猪圆环病毒2型（PCV-2）的检测,其平均感染率分别为：PRRSV 32%、CSFV 40%、PPV 20%、PRV 12%、PCV-2 27%。其中混合感染2种病毒的猪群为39%,感染2种病毒的猪为24%。用RT-PCR试剂盒对山西省11个地市66个猪场及121个散养户的1572份血样进行了PRRSV和CSFV的检测,结果PRRSV感染率为33%,CSFV感染率为46%。用间接血凝试验对61个县38个乡136个村179户的1593份血样进行了猪瘟免疫抗体的检测,平均合格率为43.9%,从而为防控此类疫病的发生,制定综合防制措施提供试验数据。     

猪五种繁殖障碍性疫病病原体多重PCR的建立及初步应用

为了建立能够同时检测猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪细小病毒(PPV)的多重PCR,并用于猪场感染情况的动态监控以及临床诊断,根据GenBank中已发表的5种病毒的基因序列,针对CSFV的E2、PRRSV的Nsp2、PRV的gB、PCV2的ORF2和PPV的VP2基因,分别设计了特异性引物。在建立的单项PCR基础上,通过优化反应条件,建立了能同时检测5种病毒的多重PCR,并具有较高的灵敏性和良好的特异性。采用建立的多重PCR对127份疑似病猪的扁桃体活体组织进行检测,检出了5种病毒的存在,其中感染2种及以上病毒的样品比例为38.6%(49/127),表明该方法是一种快速、灵敏、高效的病原学检测手段。     

猪精液中五种病毒的初步检测

为探明猪精液在疫病传播中的作用,应用PCR和RT-PCR技术分别从发病猪场和未发病猪场采集种公猪精液进行猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的检测。结果发现,发病猪场的种公猪精液中CSFV、PRRSV、PRV、PCV-2的感染率分别为30.0%、50.0%、4.0%和30.0%,而未发病猪场的感染率分别为4.0%、20.0%、0.0%和8.0%,这表明精液是多种猪病原传播的良好媒介,提示种公猪对于疫病的发生和传播起着重要作用。     

广西德保县黑猪主要疫病病原学和血清学检测

为了解德保黑猪主要疫病流行状况和免疫效果,2018—2020年采集166个德保黑猪饲养场点的300份病死猪样品进行非洲猪瘟(ASF)、猪瘟(CSF)、口蹄疫(FMD)、猪繁殖与呼吸综合征(PRRS)、猪伪狂犬病(PR)、猪圆环病毒病(PCV-2)、猪支原体病(PPLO)、猪传染性胸膜肺炎(PCP)、猪链球菌病(SS)、猪流行性腹泻(PED)、猪传染性胃肠炎(TGE)等11种主要疫病的病原学检测,2017—2020年采集35个场点的临床健康德保黑猪血清样品840份进行FMD、CSF、PRRS抗体检测。结果显示:PCV-2样品平均阳性检出率为68.3%,PRRS、PR、PED、PPLO、SS等疫病的病原阳性检出率分别为1.7%、1.0%、1.0%、0.3%、0.3%;CSF平均抗体阳性率为95.8%,而FMD、PRRS平均抗体阳性率较低,分别为79.3%、73.2%,且各年份变化较大。结果表明,德保黑猪主要疫病防控效果较好,大部分疫病得到有效控制,但PCV-2感染仍较严重,这是导致德保黑猪发病死亡以及FMD、PRRS免疫效果不佳的主要因素之一,需要重点加强控制。     

SIV与PRRSV、CSFV、PCV-2和PRV交叉感染的检测

采用RT-PCR方法对37份疑似猪流感病毒(SIV)感染病料进行了病原学检测。同时,还运用PCR和RT-PCR方法对SIV阳性病料进行了猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病毒(PRV)目的基因片段的扩增。结果,扩增出了SIV特异目的基因片段,且4份病料都为混合感染,感染状况分别为SIV/PRRSV/PRV,SIV/CSFV/PRRSV三重感染,SIV/PCV-2和SIV/PRRSV二重感染。     

2013-2014年广西省主要猪病毒性传染病流行病学调查

为掌握广西猪主要病毒性传染病流行情况,为猪传染病预防方案提供依据,本研究于2013年1月1日至2014年12月31日从广西省共收集410份样品,运用PCR及RT-PCR方法检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)、猪瘟病毒(CSFV)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒(PORV)、猪流感病毒(SIV)的感染情况。检测结果表明,PRRSV、PCV-2、CSFV、PRV、PEDV、TGEV、 PORV和SIV的平均感染率分别为35.12%、18.54%、1.17%、0.98%、10.00%、2.44%、0和1.22%;PRRSV和PCV-2混合感染率为6.83%;PRRSV在秋、冬季节呈现高感染率为36.67%、45.31%和63.64%、48.78%,而PCV-2在春、夏、冬季节呈现高感染率为44.44%、25.00%,11.29%、19.35%和39.39%、14.63%。PRRSV和PCV-2是混合感染的主要病原,它们互相之间或是与CSFV、PEDV、PRV、SIV及副猪嗜血杆菌、链球菌等混合感染,PRRSV和PCV-2将是今后广西地区猪病防控的重点。     

猪瘟病毒和不同型猪繁殖与呼吸综合征病毒的多重RT-PCR检测方法的建立

为建立能同时检测猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的方法,针对CSFV和PRRSV的基因序列设计3对特异性引物,第1对引物扩增CSFV毒株NS2基因508bp片段,第2对引物扩增PRRSV美洲型经典毒株和变异毒株Nsp2基因338bp/248bp片段,第3对引物扩增PRRSV欧洲型毒株ORF5基因614bp片段。经过反应条件的优化,建立了能同时检测并区分CSFV毒株和PRRSV美洲型经典毒株、变异毒株及欧洲型毒株的多重RT-PCR方法。该方法可以特异扩增CSFV和PRRSV,而与猪口蹄疫病毒(FMDV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)均无交叉反应;对CSFV和PRRSV 4种重组质粒标准品的检出下限均为1.67×103拷贝/μL。对采集的106份临床疑似病料进行检测,结果CSFV和PRRSV变异株混合阳性4份,占3.77%(4/106);CSFV阳性7份,占6.60%(7/106);PRRSV变异株阳性17份,占16.04%(17/106)。结果表明,建立的多重RT-PCR检测方法可以用于CSFV和PRRSV的临床快速鉴别诊断和流行病学调查。     

5种猪病多重PCR检测方法的建立

To establish a method for simultaneous detection of classical swine fever virus (CSFV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), pseudorabies virus (PRV), porcine circovirus type 2 (PCV2) and porcine parvovirus (PPV), a multiplex PCR was developed with a set of specific primers designed based on the conserved sequences of CSFV, PRRSV, PRV, PCV2 and PPV. Under the optimized conditions of multiplex PCR,five special fragments of 167 (CSFV),433 (PRRSV),305 (PRV), 559 (PCV2) and 882 bp (PPV) were amplified with a detection limit of 220, 1.6, 72, 400 and 370 pg, respectively. But the multiplex PCR amplification results of swine influenza virus （SIV）, Japanese encephalitis virus （JEV）, Streptococcus suis （SS） and porcine epidemic diarrhea virus （PEDV） were negative．The results showed that the multiplex PCR method was capable of CSFV, PRV, PRRSV, PCV2, PPV infection of single or mixed clinical samples for rapid diagnosis.     

Seroprevalence of economically important viral pathogens in swine populations of Trinidad and Tobago,West Indies

The objective of this study was to evaluate the seroprevalence and identify the strains of swine influenza virus (SwIV), as well as the seroprevalence of porcine parvovirus (PPV), transmissible gastroenteritis virus (TGEV), porcine reproductive and respiratory syndrome virus (PRRSV), porcine respiratory coronavirus (PRCV), porcine circovirus type 2 (PCV-2), and classical swine fever virus (CSFV) in pigs in Trinidad and Tobago (T&T). Blood samples (309) were randomly collected from pigs at farms throughout T&T. Serum samples were tested for the presence of antibodies to the aforementioned viruses using commercial ELISA kits, and the circulating strains of SwIV were identified by the hemagglutination inhibition test (HIT). Antibodies against SwIV were detected in 114 out of the 309 samples (37%). Out of a total of 26 farms, 14 tested positive for SwIV antibodies. HI testing revealed high titers against the A/sw/Minnesota/593/99 H3N2 strain and the pH1N1 2009 pandemic strain. Antibodies against PPV were detected in 87 out of the 309 samples (28%), with 11 out of 26 farms testing positive for PPV antibodies. Antibodies against PCV-2 were detected in 205 out of the 309 samples tested (66%), with 25 out of the 26 farms testing positive for PCV-2 antibodies. No antibodies were detected in any of the tested pigs to PRRSV, TGEV, PRCV, or CSFV.