不同佐剂对猪附红细胞体亚单位疫苗免疫效果的影响

为比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果,本试验提取猪附红细胞体抗原,并将其分别与白油佐剂、弗氏佐剂、明矾佐剂及铝胶佐剂混合,免疫小鼠。应用间接ELISA方法比较不同佐剂的猪附红细胞体亚单位疫苗的免疫效果。结果表明:白油佐剂组免疫效果最好,抗体水平在一周后有明显上升,其次为弗氏佐剂组、铝胶佐剂组和明矾佐剂组。该试验为猪附红细胞体亚单位疫苗的研究提供了可靠的理论依据,为该病的防治奠定了一定的基础。     

3种不同类型佐剂的猪圆环病毒2型亚单位灭活疫苗免疫效果的比较研究

为制备猪圆环病毒2型商品化亚单位疫苗选择良好的佐剂,对由水性佐剂GEL 01、白油佐剂以及氢氧化铝胶佐剂分别制备的3种猪圆环病毒2型亚单位疫苗的免疫效果进行比较研究。本实验选取3~4周龄猪圆环病毒2型抗体阴性猪30头,根据试验疫苗接种情况分为6组,分别为:3种不同佐剂制备的亚单位疫苗(A组、B组和C组)、商品化疫苗(D组)以及空白对照组和攻毒对照组,然后进行临床观察、抗体水平监测和免疫效力评价,观察各组仔猪的不良反应情况、抗体水平以及攻毒保护情况。结果显示:3种不同类型佐剂制备的猪圆环病毒2型亚单位疫苗接种猪后均无任何不良反应、能刺激机体产生良好的ELISA抗体水平和免疫效果,但水性佐剂GEL 01制备的疫苗与另外2种佐剂制备的疫苗相比,综合抗体水平、免疫效果等因素,水性佐剂GEL 01制备的疫苗在临床使用上更具优势,为商品化亚单位疫苗佐剂的选择提供了重要的数据支持。     

不同佐剂GnRH疫苗主动免疫对公猪睾丸发育和血清睾酮的影响

为探讨铝胶佐剂与白油Span佐剂的GnRH疫苗对公猪睾丸发育和血清睾酮的影响,12头初生公猪随机分为GnRH疫苗铝胶佐剂免疫组和GnRH疫苗白油Span佐剂免疫组(下简称铝胶组和白油组).9周龄初免,17周龄加强免疫,25周龄屠宰.游标卡尺测量猪阴囊直径和睾丸大小,石蜡切片观察睾丸组织发育,ELISA法和放射免疫分析(RIA)法分别检测GnRH抗体水平和血清睾酮水平.结果表明,铝胶组与白油组GnRH抗体效价差异不显著(P0.05).铝胶组血清睾酮水平于17,21周龄(P＜0.05)和25周龄(P＜0.01)显著地低于白油组,阴囊直径,睾丸直径、横径、周长及睾丸血量均显著地低于白油组(P＜0.05).铝胶组与白油组猪睾丸曲精小管均出现不同程度的空泡化,白油组零星分布少量精子,铝胶组无精子产生.这表明在公猪免疫去势的效果上,辅以铝胶佐剂的GnRH疫苗比辅以白油Span佐剂的GnRH疫苗好.     

副猪嗜血杆菌灭活疫苗佐剂的筛选

为了评价铝胶、蜂胶及白油佐剂对副猪嗜血杆菌的免疫增强效果,我们将铝胶、蜂胶和白油3种佐剂分别与副猪嗜血杆菌血清5型菌株联合制备灭活疫苗,然后接种雄性成年家兔,采用ELSIA方法分别检测3种灭活苗在免疫期间副猪嗜血杆菌P5蛋白的抗体效价。结果显示:3次免疫后,白油佐剂免疫组的平均效价为1∶4000,铝胶佐剂免疫组的平均效价为1∶700,蜂胶佐剂免疫组的平均效价为1∶100,无佐剂对照组的平均效价为1∶100。说明这3种佐剂中免疫增强效果最好的为白油,铝胶次之。     

猪α干扰素对猪圆环病毒2型亚单位疫苗免疫效果的影响

为了评估酵母表达的PCV2 Cap蛋白在猪体的免疫特性以及猪α干扰素对其的免疫佐剂效果,将酵母表达的PCV2 Cap蛋白配比适量的铝胶或重组猪α干扰素制成亚单位疫苗.30日龄仔猪分别接种铝胶佐剂亚单位疫苗和猪α干扰素佐剂亚单位疫苗,同时设攻毒对照与空白对照,首免后21 d加强免疫,二免后14 d用PCV2 JS株攻毒.铝胶佐剂亚单位疫苗免疫猪体后产生了PCV2特异性中和抗体.猪α干扰素佐剂亚单位疫苗组仔猪免疫后产生的ELISA抗体和中和抗体都显著高于铝胶亚单位疫苗组仔猪.攻毒对照组的4只仔猪攻毒后全都产生了病毒血症,并有较长时间的发热;铝胶亚单位疫苗组4头仔猪中只有1头仔猪产生病毒血症,添加猪α干扰素亚单位疫苗组的仔猪攻毒后都没有产生病毒血症.综合分析试验猪的病毒感染、临床表现和生产性能等情况表明Cap蛋白亚单位疫苗具有免疫保护效果,猪α干扰素可显著增强Cap蛋白亚单位疫苗接种仔猪的体液免疫反应,提高PCV-2 Cap蛋白亚单位疫苗免疫保护效果.     

不同佐剂新城疫疫苗对鸡体液免疫的影响

佐剂是疫苗研究的重要组成部分.选择合适的佐剂不仅可以增强疫苗的免疫效果,而且可以提高机体的抵抗力.不同佐剂对体液免疫会产生不同的作用.本研究选用白油佐剂、弗氏佐剂和蜂胶佐荆与新城疫病毒抗原混合制成疫苗,免疫雏鸡,探讨不同佐剂对鸡体液免疫的影响.结果表明,三种佐剂疫苗均有保护力,试验鸡饲养至61日龄均未发生新城疫,其中弗氏佐剂的效果最好,蜂胶佐剂的效果次之,油佐剂组检测到雏鸡61日龄时仍未出现抗体高峰值.     

三种佐剂对鸡体液免疫影响的比较

佐剂是疫苗的重要组成部分,不同佐剂对体液免疫会产生不同的作用.选择合适的佐剂不仅可以增强疫苗的免疫效果,而且可以提高机体的抵抗力.本试验选用白油佐剂、弗氏佐剂和蜂胶佐剂分别与灭活的新城疫病毒制成疫苗,免疫雏鸡,探讨不同佐剂对鸡体液免疫的影响.结果表明,试验组鸡抗体水平高,饲养至61日龄均未发生新城疫,其中弗氏佐剂的效果最好,蜂胶佐剂的效果次之,油佐剂的效果最次.     

3种不同类型佐剂的猪瘟E2基因工程亚单位疫苗免疫效果的比较研究

为了筛选用于制备猪瘟E2基因工程亚单位疫苗的佐剂,用水佐剂、双相佐剂以及油包水佐剂分别制备了 3种猪瘟E2基因工程亚单位疫苗,在猪上进行了免疫效果的评价.本试验选取4～5周龄猪瘟病毒病原、抗体阴性猪40头,随机分为8组,每组5头,其中3组用于3种不同佐剂制备的亚单位疫苗的单次免疫效果评价,3组用于疫苗的二次加强免疫效果...     

猪圆环病毒2型灭活疫苗免疫佐剂的比较试验

以猪圆环病毒2型(PCV2)遗传标记毒株为毒种,经细胞培养传代,优化了病毒增殖条件,获得较高滴度的病毒培养物用于PCV2灭活疫苗的研制。为了比较不同免疫佐剂的效果,本试验对国产矿物质白油和铝胶两种佐剂以及赛比克公司提供的MONTANIDETMISA206、ISA15VG、IMS1315VG3种佐剂配制的灭活疫苗进行了猪体免疫试验。通过临床观察、血清抗体效价测定,确认ISA15VG佐剂配制的疫苗在增强免疫效果方面优于其它佐剂。按5种佐剂免疫效果排序为ISA15VG、IMS1315VG、铝胶、ISA206、国产白油。ISA15VG佐剂属于水包油剂型,可刺激接种动物产生快速免疫应答反应,抗体产生效价高、持续时间长,有可能成为新型PCV2灭活疫苗佐剂的候选。     

猪附红细胞体阳性血清的制备研究

猪附红细胞体寄生于红细胞表面或游离于血浆、组织液及脑脊液中,引起猪发热、溶血性贫血和黄疽等主要症状。本试验用猪附红细胞体抗原和弗氏佐剂乳化制备免疫原,免疫健康仔猪,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清的效价,当测得免疫猪血清的OD值与阴性对照猪的血清值之比(P/N)为8.16(P/N2.1),采集免疫猪血分离阳性血清,本试验探索出了猪附红细胞体阳性血清的制备方法。     

纳米铝胶佐剂增强猪细小病毒灭活疫苗猪体免疫的效果

将20头35日龄断奶仔猪随机分为4组,将制备的纳米铝胶佐剂猪细小病毒(Porcine parvovirus,PPV)灭活疫苗肌肉注射免疫接种,并以常规铝胶佐剂PPV灭活疫苗组、市售PPV油乳剂灭活疫苗组为疫苗对照,生理盐水组做阴性对照,应用HI和ELISA检测接种猪的体液免疫水平,流式细胞仪检测免疫猪的细胞免疫水平。体液免疫检测结果显示,PPV纳米铝胶佐剂疫苗组能显著提高机体产生抗体的速度,在首免后第2周产生有效保护抗体水平显著高于油乳剂疫苗和常规铝胶佐剂疫苗组(P0.05),在第3周其抗体水平达到峰值;细胞免疫检测结果显示,3种疫苗均能诱导机体产生细胞免疫应答,但各组之间差异不显著(P0.05)。结果表明,以纳米铝胶为佐剂制备的猪细小病毒灭活疫苗,能显著提高机体的免疫水平,并较早刺激机体产生抗体,具有较好的免疫保护效果。     

不同佐剂对猪圆环病毒衣壳蛋白免疫原性的影响

试验旨在研究猪圆环病毒不同佐剂疫苗的制备及其对免疫原性的影响。将去除信号肽的PCV2（porcine circovirus type 2,PCV2）Cap蛋白基因连接在pET-28a载体上,进行诱导表达,用脱氧胆酸钠（DOC）和低浓度尿素对表达产物进行溶解,制备氢氧化铝胶体佐剂、脂质体佐剂、弗氏佐剂、白油佐剂、蜂胶佐剂,并与纯化的PCV2-Cap蛋白混合制成亚单位疫苗,以商品化的灭活疫苗作为阳性对照,免疫小鼠,并使用ELISA方法检测动物血清中抗体及细胞因子含量的变化,评估其免疫保护效果。结果显示,表达产物以包涵体的形式存在,使用DOC溶解包涵体可省略蛋白复性步骤,且纯化方法简单,获得纯度较高的衣壳蛋白;ELISA检测结果表明PCV2-Cap蛋白能诱导产生特异性较高的抗体;水系佐剂制备的亚单位疫苗具有较高的免疫活性,为亚单位疫苗的商品化提供重要的数据支持。     

温氏附红细胞体特异抗原组分免疫效果分析

从感染率90%以上的阳性牛血中分离温氏附红细胞体,利用反复冻融-超声波裂解法制备温氏附红细胞体抗原蛋白悬液,通过切胶纯化和免疫印迹法筛选具有良好免疫原性的抗原组分,制备温氏附红细胞体亚单位疫苗,并同时将抗原悬液灭活后制成温氏附红细胞体灭活苗。疫苗经检测合格后在小鼠动物模型上进行免疫持续期测定和免疫效力检验。结果显示,温氏附红细胞体亚单位疫苗对小鼠的免疫持续期为12周,免疫保护率为100%,灭活苗免疫保护率为80%,表明温氏附红细胞体特异抗原组分亚单位疫苗具有较好的免疫原性,能诱导小鼠产生良好的免疫保护作用。     

猪旋毛虫病免疫方法的研究

本试验比较了３日龄及７日龄旋毛虫成虫可溶性抗原的免疫原性，比较了不同佐剂对免疫效果的影响，观察了不同免疫途径对免疫效果的影响及疫苗的免疫持续期。结果表明，３日龄及７日龄成虫可溶性抗原免疫猪所诱导产生的免疫力接近，说明免疫原性基本一致。以白油—司班佐剂乳化抗原的免疫效果优于弗氏完全佐剂（ＦＣＡ）乳化抗原，其减虫率分别为８６．３乏％与７０．２２％２而且白油—司班佐剂苗的粘稠度适中，便于注射。免疫途径对免疫效果的影响，以成虫可溶性抗原经腹腔注射（ＩＰ）的免疫效果优于肌肉注射（ＩＭ）。疫苗保存于４℃６个月不影响其免疫效力。猪免疫接种成虫可溶性抗原疫苗后免疫持续期至少６个月。     

使用不同佐剂去势疫苗免疫效果的比较

分别应用明矾、氢氧化铝和弗氏佐剂的去势疫苗免疫 SD大鼠 ,检测大鼠 LHRH抗体效价、睾酮水平、观察睾丸肉眼及组织学变化 ,以及精子数量、畸形率的变化 ,确定去势疫苗的效果。结果表明明矾、氢氧化铝和弗氏佐剂组均能够较好的诱导大鼠产生 L HRH抗体 ,引起睾酮明显降低。三个免疫组与阴性对照组相比 ,都能使大鼠明显增重 ,并起到萎缩性腺的作用     

猪圆环病毒2型灭活疫苗的制备与免疫效力研究

猪圆环病毒2型（PCV2）经0.2%甲醛37℃作用一定时间后接种PK-15细胞,盲传3代,用PCR方法检测灭活效果。将灭活的PCV2加入适量的白油和氢氧化铝胶制成PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗,免疫小鼠,共免疫2次,时间间隔为3周,分别于一免后第21天和二免后第14天进行ELISA抗体检测。同时为了评价国产油佐剂和进口油佐剂的免疫效果,笔者进行了猪体免疫效力试验。通过ELISA抗体、攻毒后临床表现及体温变化、剖解时的病理变化、平均日增重及病毒血症等指标对疫苗免疫效果进行评价。结果如下：①PCV2能被0.2%甲醛完全灭活,灭活时间为16 h。②PCV2油佐剂和铝胶佐剂灭活疫苗免疫小鼠后均能产生较好的免疫应答,并且油佐剂灭活疫苗免疫效果好于铝胶佐剂灭活疫苗。③猪体免疫效力试验表明,两种油苗均能产生较高水平的ELISA抗体。攻毒后,攻毒对照猪的体温高于免疫猪,空白对照猪体温正常。免疫猪及空白对照猪平均体重均升高,而攻毒对照猪平均体重有所降低,且两个免疫组和空白对照组之间平均日增重差异显著（P〈0.05）。病毒血症检测及病毒DNA在组织中的分布检测表明两油苗均能够有效降低猪体的带毒。以上结果表明,PCV2灭活疫苗免疫小鼠和猪体后均能诱导机体产生免疫应答,并能够在一定程度上抵抗PCV2对猪体的感染。     

蜂胶对猪细小病毒灭活疫苗佐剂作用的试验

68只豚鼠随机均分为4组,1³组分别免疫蜂胶、铝胶和油佐剂PPV疫苗,第4组为空白对照组,注射等量生理盐水。免疫后不同时间点采集血清分析特异性血凝抑制抗体效价评价蜂胶佐剂对免疫豚鼠体液免疫的影响,测定淋巴细胞增殖、IL-2和IL-4含量评价蜂胶佐剂对免疫豚鼠细胞免疫的影响。结果表明,蜂胶、油佐剂和铝胶3种佐剂均能提高豚鼠对PPV灭活疫苗的免疫应答能力,油佐剂提高血清HI抗体效果较好,其次为蜂胶佐剂,再次为铝胶佐剂。蜂胶佐剂促进T淋巴细胞增殖和提高IL-2、IL-4、IL-6和IFN-γ含量效果优于油佐剂和铝胶佐剂。结论:蜂胶能增强PPV灭活疫苗的免疫效果。     

兔抗猪附红细胞体阳性血清的制备研究

猪附红细胞体寄生于红细胞表面或游离于血浆、组织液及脑脊液中,引起猪发热、溶血性贫血和黄疽等主要症状。本试验用猪附红细胞体抗原和弗氏佐剂乳化制备免疫原,免疫试验兔,并通过酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清的效价,当测得血清的OD值与阴性对照组的血清值之比(P/N)分别为8.02(P/N﹥2.1)、7.16(P/N﹥2.1),采集兔血分离阳性血清。本试验为进一步研究猪附红细胞体的粘附阻抑以及该病的诊断、治疗提供了试验材料,并探索出了兔抗猪附红细胞体阳性血清的制备方法。     

肠毒素性大肠杆菌菌毛对产蛋鸡免疫性的研究

采用热抽提法提取4种肠毒素性大肠杆菌菌毛蛋白。K88、K99、F41和987p菌毛蛋白分别制成弗氏佐剂苗;K88还制成白油佐剂苗,氢氧化铝胶苗和蜂胶佐剂苗;另将4种菌毛等比例混合制成弗氏佐剂苗。分别对产蛋鸡进行免疫,用微量凝集反应和血凝抑制试验检测卵黄抗体效价。结果表明,K88菌毛较其他3种菌毛免疫性好,诱导抗体效价最高而且能长时间维持;987p菌毛能快速诱导抗体的产生,但整体效价低。K88不同佐剂苗中,铝胶佐剂能较快地诱导抗体的产生,蜂胶佐剂苗抗体持续时间短,弗氏佐剂能诱导高效价的抗体产生而且能长时间持续。     

细菌DNA对小鼠接种犬细小病毒灭活苗的免疫增强效果

用大肠杆菌 DNA、弗氏佐剂、铝胶、蜂胶等不同佐剂 ,与犬细小病毒灭活疫苗配合免疫小鼠 ,以血凝抑制试验检测病毒特异性血凝抑制抗体。结果表明 ,各佐剂均能增强特异性抗体的产生 ,经组间单因素相关性分析 ,细菌 DNA与弗氏佐剂的免疫增强效果明显高于铝胶与蜂胶 (P <0 .0 5或 P <0 .0 1)。细菌 DNA具有强烈免疫刺激作用、无不良反应等特性 ,可望作为疫苗佐剂应用