鸭源巴氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

本试验为确定江西新余地区鸭发病的病原,对3个鸭场的病死鸭进行细菌分离,并通过形态特征、培养特性和生化试验对分离菌进行鉴定。从病死鸭的肝脏和心脏中分离到5株鸭多杀性巴氏杆菌,且分离菌对试验鸭和小白鼠有较强的致病性。药敏试验结果表明,分离的5株菌对左氧氟沙星、卡那霉素、头孢西丁、先锋必和大观霉素较为敏感。     

鸭疫里默菌3型河南株的分离与鉴定

为了研究鸭疫里默菌的生物学特性及其发病机制,从河南地区某鸭场临床症状、剖检病变疑似鸭疫里默菌病例进行细菌分离,从中分离到1株细菌。对分离的病菌进行形态培养、生化试验、动物试验、琼扩试验和血清型鉴定,鉴定为鸭疫里默菌3型。药敏试验表明鸭疫里默菌对头孢噻肟、卡那霉素、环丙沙星等敏感性较高。     

鸭疫里默菌的分离鉴定与动物回归实验

为了解最近吉林地区某鸭场大量鸭病死的原因,对该鸭场送检的病料进行细菌分离培养并成功分离出一株革兰阴性菌。通过生化试验、16S r RNA鉴定及序列测序分析、玻片凝集试验和动物回归试验等对分离菌进行鉴定,16S r RNA基因测序结果显示,分离菌与鸭疫里默菌同源性达到99%;该菌能够使雏鸭死亡且致病性较强。结果表明,该鸭场鸭群死亡原因是1株血清2型鸭疫里默菌感染。     

鸭疫里默氏菌的分离鉴定及免疫原性

自西安某鸭场病鸭中分离到 1株菌 ,经染色镜检、分离培养、生化试验、动物回归试验 ,鉴定为鸭疫里默氏菌 ;用分离菌株制作成油佐剂灭活疫苗 ,免疫 10日龄雏鸭 ,于免疫后 30 d用同源菌攻击 ,保护率为 83%(5 / 6 ) ,结果表明 ,本菌具有良好的免疫原性。     

鸭传染性浆膜炎病的诊治

鸭传染性浆膜炎病是危害养鸭业最严重的传染病之一。从海南省定安县某鸭场的病死鸭中分离得到疑似鸭疫里默杆菌的菌株,并对该菌进行分离鉴定、革兰染色镜检、生化鉴定、PCR鉴定和药敏试验。结果表明：分离菌为鸭疫里默杆菌;该菌对庆大霉素、氟苯尼考、头孢噻肟、林可霉素、环丙沙星高度敏感,而对氨苄青霉素、链霉素、卡那霉素不敏感。说明该鸡场出现了耐药性的鸭疫里默杆菌。     

鸭传染性浆膜炎病的诊治

鸭传染性浆膜炎病是危害养鸭业最严重的传染病之一。从海南省定安县某鸭场的病死鸭中分离得到疑似鸭疫里默杆菌的菌株,并对该菌进行分离鉴定、革兰染色镜检、生化鉴定、PCR鉴定和药敏试验。结果表明:分离菌为鸭疫里默杆菌;该菌对庆大霉素、氟苯尼考、头孢噻肟、林可霉素、环丙沙星高度敏感,而对氨苄青霉素、链霉素、卡那霉素不敏感。说明该鸡场出现了耐药性的鸭疫里默杆菌。     

一株鸭源维氏气单胞菌的分离鉴定与致病性的初步研究

江苏某养殖场种鸭突然发生散发性死亡,为了探究其死亡原因,本研究通过临床解剖观察、病原分离、生化试验、药敏试验、雏鸭人工感染试验和致病性试验对分离菌株进行检测。结果显示该分离菌为革兰阴性短杆菌,在麦康凯培养基和LB培养基中呈现圆形灰白色菌落,在血琼脂培养基中呈现出β溶血;16S rRNA基因序列分析结果显示该菌为维氏气单胞菌(A.veronii);药敏结果显示该菌对头孢氨苄、氨苄西林等10种抗生素敏感;人工感染试验显示该菌可造成雏鸭的死亡;小鼠的致病性试验显示该菌对小鼠的LD50为5.0×10^6.5cfu。总之,本实验从病鸭中分离到1株A.veronii,并筛选出敏感药物,为A.veronii病的诊断和治疗提供了参考依据。     

一株鸭源大肠埃希菌强毒株的分离鉴定

为确定江西某养鸭场发病的病原和筛选敏感药物用于临床治疗,通过常规的细菌分离方法,从送检病死鸭的肝、心脏中分离细菌,并对分离菌进行培养特性、生化试验、动物致病性试验和耐药性分析.结果分离并鉴定到1株大肠埃希菌,该菌对小鼠和雏鸭有很强的致死性；药敏试验结果显示,分离的大肠埃希菌仅对头孢噻呋钠、阿莫西林/棒酸、奈替米星和红霉...     

Ⅰ型鸭疫里默氏杆菌的分离与鉴定

从扬州仪征某樱桃谷肉鸭鸭场病死鸭的肝、脾、脑、心血中分离到9株细菌,经对分离菌进行染色、形态观察、生化鉴定及凝集试验,其中5株鉴定为Ⅰ型鸭疫里默氏杆菌（Rimerella anatipestifer,RA）。经动物回归试验,表明该菌对雏鸭有较强的致病力。     

一株鸭大肠杆菌的分离鉴定及致病性分析

广西省某种鸭场40余日龄的鸭群发病,从病死鸭脑部分离到一株革兰阴性杆菌,经分离纯培养、革兰染色镜检、PCR分子生物学鉴定、血清型鉴定,确定是血清型为O154的鸭大肠杆菌;致病性试验显示,该分离菌对小鼠具有较强的致病性。药物敏感试验结果表明,该菌对替米考星、氧氟沙星、新霉素3种药物产生了耐药性,对头孢曲松、丁胺卡那等7种药物敏感。     

不同周龄SPF级SD大鼠胰腺自发性病变的组织学观察

研究不同周龄SPF级SD大鼠胰腺自发性病变的种类及其病变发生率,为药物安全性评价提供背景资料。收集3年安评试验中11、19、31周龄试验对照组大鼠胰腺制作病理切片,光学显微镜下观察SD大鼠胰腺病变的种类及组织形态学特点,并统计其病变发生率。结果显示,大鼠胰腺主要出现了以下病变:①单核细胞浸润:11周龄大鼠该病变的总体发生率为0.6%,其中雌性为0,雄性为1.25%;19周龄大鼠该病变的总体发生率为1.0%,其中雌性为1.0%,雄性为1.0%;31周龄大鼠该病变的总体发生率为1.0%,其中雌性为0,雄性为1.96%。②腺泡细胞空泡变性:11周龄大鼠未观察到该病变的发生;19周龄大鼠该病变的总体发生率为1.0%,其中雌性为0,雄性为2.0%;31周龄大鼠该病变的总体发生率为3%,其中雌性为2.1%,雄性为3.9%。③腺泡细胞萎缩、腺管增生:11周龄大鼠未观察到该病变的发生;19周龄大鼠该病变的总体发生率为0.5%,其中雌性为0,雄性为1.0%;31周龄大鼠该病变的总体发生率为3.0%,其中雌性为1.0%,雄性为4.9%。结果表明,SPF级大鼠胰腺可发生单核细胞浸润、腺泡细胞空泡变性、腺泡细胞萎缩及腺管增生等自发性病变,且病变发生率可随着年龄的增加而增加。     

规模化奶牛场产奶牛和育成牛粪中污染因子的四季动态监测研究

本研究对规模化奶牛场产奶牛和育成牛粪中污染因子进行了四季监测,结果表明,鲜粪中含水率两类牛群夏季最高、春季最低;风干粪样中,除产奶牛夏季全氮和全磷外,产奶牛和育成牛5项检测指标及其年均值的季节变化规律均保持一致,即有机质＞全氮＞全磷＞锌＞铜;两类牛群全磷含量夏季最高、秋季最低,有机质含量春季最高、夏季最低,铜和锌含量夏季均最低;产奶牛全氮含量夏季最低、春季最高,铜含量春季最高,锌含量冬季最高;育成牛全氮含量夏季最高、秋季最低,铜含量秋季最高,锌含量春季最高.     

奶牛养殖小区育成牛粪中污染因子的四季动态监测研究

本文研究了奶牛养殖小区育成牛粪中污染因子的季节变化规律,结果表明,育成牛鲜粪中含水率春季最低,冬季最高;风干粪样中,除夏季全氮和全磷顺序颠倒外,五项检测指标及其年均值的季节变化规律均保持一致,即有机质〉全氮〉全磷〉锌〉铜;育成牛全氮含量夏季最低、冬季最高,全磷含量秋季最低、夏季最高,有机质含量夏季最低、秋季最高,铜含量夏季最低、春季最高,锌含量春季最低、夏季最高。     

犬正常发情期与患子宫蓄脓的子宫和卵巢组织结构及乳铁蛋白表达的对比

本研究旨在探明犬子宫和卵巢在正常发情期与患子宫蓄脓时，其组织结构及乳铁蛋白（lactoferrin，LF）表达的变化特征。应用Masson’s、VVG、PAS组织化学染色方法观察乏情期、发情期、患子宫蓄脓时犬子宫及卵巢的组织结构特点，用免疫组织化学SP法观察LF的分布特征。结果显示，正常发情期犬：乏情期、发情期子宫内膜肌层厚度比分别为0.762 0、0.924 3；乏情期子宫固有层中胶原纤维含量大于发情期，发情期卵巢中胶原纤维含量大于乏情期；子宫血管层及卵巢血管内弹性膜清晰完整；子宫腺在乏情期时浅层管腔小，深层较大、腺管上皮为单层柱状上皮、上皮细胞及管腔内PAS阳性反应较强，发情期子宫腺管腔变大、腺管上皮为单层立方上皮、上皮细胞及管腔内有PAS阳性反应；子宫黏膜上皮在乏情期和发情期均为单层柱状上皮，但胞核位置不同，乏情期胞核位于中央，发情期胞核位于顶部。患子宫蓄脓犬：子宫内膜肌层厚度比为1.615 0；子宫固有层和卵巢中胶原纤维含量少于正常发情期；子宫腺管腔大，且形状不规则，管腔内有炎性细胞浸润，腺管上皮为单层立方上皮，有淋巴细胞位于基膜，上皮细胞及管腔内PAS阳性反应较弱；子宫血管层及卵巢血管内弹性膜较正常发情期变薄，且有断裂现象；子宫黏膜上皮为单层柱状上皮，胞核位于基底。LF在乏情期子宫腺上皮和卵巢中的表达水平高于发情期，而在子宫黏膜上皮中发情期的表达水平高于乏情期。患子宫蓄脓时犬子宫和卵巢中LF的表达水平均较低。综上表明，犬正常发情期与患子宫蓄脓时的子宫和卵巢组织结构特点显著不同，LF的表达水平也存在差异。     

芪板青颗粒质量控制研究

为建立芪板青颗粒中绿原酸、咖啡酸和黄芪甲苷含量测定的方法。测定绿原酸和咖啡酸采用Agilent Eclipse XDB-C18 250 mm×4.6 mm 5μm色谱柱,流动相为0.05%磷酸溶液-乙腈(92∶8,V∶V),进样量10μL,柱温30℃,流速为1.0 m L/min,在190 nm～400 nm范围进行扫描,记录327 nm色谱图;测定黄芪甲苷采用Waters symmetry C18 5μm 4.6 mm×250 mm色谱柱,进样量10μL,漂移管温度35℃,雾化器温度35℃,气流速度1.2 L/min,流动相为水-乙腈(65∶35,V∶V),柱温30℃,流速1.0 m L/min。绿原酸在3.611～72.23μg/m L范围内线性关系良好,r为0.99999,平均加样回收率97.1%;咖啡酸在3.060～61.20μg/m L范围内线性关系良好,r为0.99999,平均加样回收率96.2%;黄芪甲苷在1.0～10μg范围线性关系良好,r为0.9997,平均加样回收率为98.0%。该方法定性、定量准确,适用于芪板青颗粒含量测定。     

徐淮山羊H-FABP基因克隆、表达产物亚细胞定位的研究及转基因小鼠的制备

旨在克隆徐淮山羊心脏型脂肪酸结合蛋白(H-FABP)基因的cDNA,探讨其生物信息学功能。通过EGFP融合蛋白对该基因亚细胞水平的表达定位,探究该基因在异种生物体内表达情况,探索制备异种转基因动物的可能性。采用反转录PCR(RT-PCR)方法克隆徐淮山羊H-FABP基因cDNA,进行生物信息学分析,构建其融合表达载体pEGFP-H-FABP。脂质体(LTX)介导基因转染山羊成纤维细胞(GEF),48h后进行荧光检测,RT-PCR检测mRNA在细胞内的表达。利用睾丸注射将目的基因转入小鼠体内,在DNA和蛋白水平上检测目的基因的表达情况。结果,徐淮山羊H-FABP基因完整编码区(CDS)大小为402bp,编码133个氨基酸,GenBank登录号为AY466498.1。徐淮山羊H-FABP序列与人、鸡、褐家鼠、奶牛、野猪、驴及斑马鱼相应编码区同源性为89%、76%、85%、84%、93%、91%、70%,氨基酸序列同源性为90%、79%、88%、97%、95%、94%、72%。成功构建融合表达载体pEGFP-H-FABP,目的基因在mRNA水平上成功表达。目的蛋白定位于细胞质中,与在线预测结果相同(无信号肽,定位于细胞质中)。通过尾静脉注射和睾丸注射,该基因可以在小鼠体内实现暂态表达和持续性表达。本研究成功克隆了徐淮山羊H-FABP基因cDNA,而且H-FABP基因在进化过程中是保守的。该蛋白无信号肽,在单细胞水平上可表达于细胞质中,在小鼠体内也可以成功表达。     

2013年-2015年宁夏地区牛支原体感染的血清学调查分析

为了摸清宁夏地区肉牛和奶牛牛支原体(Mycoplasma bovis)感染情况及流行趋势,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)对2013年-2015年采集自宁夏地区肉牛主要养殖区的57个肉牛场886份血清和奶牛主要养殖区的39个奶牛场1 088份血清进行检测.结果发现,2013年抽检的16个奶牛场阳性率为32.17％(148/460),场群阳性率100％(16/16);2014年抽检的银川地区12个奶牛场,阳性率为26.52％(61/230),场群阳性率100％(12/12);2015年抽检的11个奶牛场,阳性率为44.97％(179/398),场群阳性率100％(11/11);2014年阳性率较2013年和2015年低,2015年最高,2013年与2014年阳性率差异不显著(P>0.05),2015年与2013年和2014年的阳性率差异极显著(P<0.01).2013年抽检的19个肉牛场,阳性率为7.26％(18/248),场群阳性率为26.32％(5/19);2014年抽检的38个肉牛场,阳性率为5.02％(32/638),场群阳性率为50％(19/38);2014年较2013年的阳性率低,但差异不显著(P>0.05),而且部分地区和肉牛场未检测到牛支原体阳性血清.上述结果表明,宁夏地区奶牛养殖场牛支原体感染状况较为严重,应引起养殖场的高度重视.     

黑莓体细胞胚诱导中的细胞生理特性差异

为了解黑莓不同类型愈伤组织与胚前体组织的生理特性差异，为体细胞胚诱导提供依据，本文通过对黑莓均质、松散型胚性愈伤组织进行诱导研究，比较了黑莓3种不同类型的愈伤组织与胚前体组织生理特性方面的差异。结果显示：球形胚前体组织的可溶性糖含量最高，其余3种愈伤组织间无差异；球形胚和硬块型组织脯氨酸含量最高，其次是稀软型，松散型的最低；硬块型的丙二醛含量最高，其他3种间无差异；稀软型的SOD酶活性最高，其次是松散型和硬块型，球形胚的最低；稀软型的POD酶活性最高，其他3种间无差异。隶属函数综合分析认为，加拿大黑莓的松散型愈伤组织的生理特性最接近于球形胚前体组织，因此松散型愈伤组织更适于体细胞胚的诱导。     

牦牛PLIN2基因的克隆及其在卵巢不同发情阶段的表达

试验旨在研究牦牛PLIN2基因的序列特征和表达特性,并分析其表达与不同发情时期的卵巢的相关性。根据GenBank中已知的普通牛序列,设计克隆引物,经RT-PCR扩增得到牦牛PLIN2基因序列。RT-PCR检测PLIN2基因在各个组织中的表达量,实时荧光定量PCR分析卵巢不同发情时期的表达量。结果表明,牦牛PLIN2基因的编码区长为1 353 bp,共编码450个氨基酸,为无跨膜结构的非分泌蛋白。与GenBank中已知的普通牛序列同源性达到99.4%,表明PLIN2基因在进化过程中相当保守。在牦牛的各个组织中PLIN2分布广泛,但不同组织中的表达有差异,卵巢、乳腺、胃和肾脏中相对较多,而肺脏中几乎没有表达。实时荧光定量PCR结果显示,在卵巢的不同发情时期PLIN2都有表达,且在黄体期的表达量最高,表明PLIN2基因在牦牛发情周期中起着不可忽视的作用。     

多种药物治疗奶牛子宫内膜炎的疗效比较试验

对患有卡他性和脓性子宫内膜炎的病牛采用多种药物进行治疗,对治疗效果进行比较分析。结果表明:治疗卡他性子宫内膜炎时,乳宫安的治愈率为80%,金乳康的治愈率为93%,洁尔阴的治愈率为87%,青链霉素的治愈率为73%。在治疗脓性子宫内膜炎的试验中,乳宫安的治愈率为75%,金乳康的治愈率为88%,洁尔阴的治愈率为75%,青链霉素的治愈率为67%。乳宫安、金乳康和洁尔阴的总受胎率均为100%,而青链霉素的总受胎率为75%。露它净和宫得康配合应用,对卡他性子宫内膜炎的治愈率达100%,对脓性子宫内膜炎的治愈率达90%,并且对愈后奶牛的一次输精受胎率达100%。