产气荚膜梭菌B型C58-1株β1毒素基因的克隆表达

利用PCR技术,从B型产气荚膜梭菌中国标准株C58-1株扩增出β1毒素基因,连接pMD18-T载体筛选阳性克隆,然后用限制性核酸内切酶BamHⅠ和SalⅠ对其进行酶切,回收927bp的β1毒素基因片段,将其定向克隆到载体pET-32a中,获得重组质粒pETβ927。将pETβ927转化至受体菌BL21(DE3)中,其表达产物经His-Trap FF预装柱纯化、SDS-PAGE检测目的蛋白大小和分布及Western blotting检测其反应原性。结果表明,完整的β1毒素基因大小为1 011bp,与GenBank发表的B型和C型产气荚膜梭菌β1毒素蛋白序列同源性达99.4%以上;SDS-PAGE结果显示重组目的蛋白在大肠杆菌中成功表达,融合蛋白大小为54ku,在超声波裂解上清和包涵体中均有分布,但以包涵体为主。Western blotting检测结果显示表达的重组蛋白可与特异性血清抗体发生免疫反应,表明β1毒素蛋白具有较好的反应原性。     

兔瘟的诊断与防控技术探讨

兔瘟又名兔病毒性出血症,是由兔出血症病毒引起的一种急性、热性、败血性和毁灭性的传染病,是兔业养殖的头号"杀手"。近年来,随着养兔业的不断发展,兔瘟的发病情况也随之出现了多元化现象,呈现出早龄化、非典型性与散发性等特点。笔者通过对多年临床经验的总结,从该病的流行病学特点、临床症状、病理剖检变化、实验室诊断及免疫防控等方面进行阐述,以期能够对该病进行更好的防控有所指导和帮助。     

猪传染性胸膜肺炎放线杆菌分离株的分子生物学鉴定

根据已有的猪传染性胸膜肺炎放线杆菌(APP) dsbE基因序列,合成了一对特异性引物,从3株APP分离菌(BZ1株,BZ2株和BZ3株)均扩增出预期342 bp的DNA片段.分别将扩增的目的基因连接到pMD18-T载体中,构建重组质粒,转化大肠埃希菌DH5α感受态细胞,提取质粒并进行序列分析.结果表明BZ1株dsbE基因与所有14种血清型APP参考株dsbE基因的同源性达98%～100%,BZ2株dsbE基因与所有14种血清型APP参考株dsbE基因的同源性达98%～99%,BZ3株dsbE基因与所有14种血清型APP参考株dsbE基因同源性达97%～98%,证明3株分离菌均为APP.     

雏鹅感染曲霉菌及黄曲霉毒素中毒的诊疗体会

曲霉菌病的病原主要是曲霉菌属的烟曲霉和黄曲霉等,引起鸡、火鸡、鸭、鹅、鹌鹑等发病,以幼龄多发,常呈急性群发,发病率和死亡率都较高,成年禽多为散发。曲霉菌是普遍存在的微生物,存在于土壤、腐烂的有机物及种子中,如谷物和花生壳上。这些病原体不仅可以引起禽类病变,而且可以引起大动物发病,同时对人类也有危害。该病的特征是呼吸困难,于肺脏和气囊上出现广泛性炎症和霉菌结节。     

一例蛋鸡血管瘤型白血病的诊断

对某鸡场发病鸡经过临床诊断、病理剖检观察与实验室诊断,确诊为血管瘤型白血病,对该病的诊断提供了可靠的方法。     

鸡大肠杆菌地方菌株的分离培养与药敏试验

由于鸡大肠杆菌血清型（群）比较复杂 ,且变异性较强 ,很难用疫苗得到有效的预防 ,并且对抗生素容易产生耐药性 ,在临床防治工作中 ,要取得较好的治疗效果 ,就需要选择对大肠杆菌比较敏感的药物 ,来进行预防与治疗 ,才能达到控制该病的目的。本文针对这一方面作了有益的探讨。１材料１．１病料采自黄河三角洲部分县市。１．２试剂ＭＲ、Ｖ -Ｐ、靛基质、明胶液化、氧化酶、过氧化氢酶、尿素酶试验培养基及反应试剂由本所自制。１．３普通琼脂平板按照常规 ,由本所自制。１．４麦康凯琼脂、伊红美兰琼脂、三糖铁琼脂均购自山东省卫生防疫站 ,…     

3株猪胸膜肺炎放线杆菌山东株的分离及鉴定

从山东省几个猪场的疑似猪传染性胸膜肺炎病例中,采集病猪的肺脏、气管和扁桃体等病变组织,经细菌分离得到3个分离株BZ1株、BZ2株、BZ3株。经过革兰氏染色镜检、菌落形态观察、培养特性试验、生化试验、药敏试验、动物感染试验等一系列细菌学鉴定方法,可将3株分离菌鉴定为猪胸膜肺炎放线杆菌。     

一起貉犬瘟热继发链球菌病的诊疗

<正>1发病情况该特种养殖户共饲养貉子330只,其中发病170只,发病率达51.51%,死亡120只,死亡占发病数的70.5%。     

兔支气管败血波氏杆菌的分离鉴定及药敏试验

山东枣庄某大型兔场送检死亡幼兔病例,经过病原菌的分离鉴定、PCR 检测、药物敏感性试验、敏感动物致病性分析及临床综合治疗等,成功分离到一株对小鼠有一定的致病性的兔败血性波氏杆菌,该菌株对氟苯尼考、多西环素、红霉素等高敏,临床上采取疫苗紧急防疫结合药物治疗的综合防治措施顺利控制了该病的发生。     

新城疫（ND）—减蛋综合征（EDS76）蜂胶二联灭活疫苗的研制Ⅰ．制苗工艺、疫苗安全性和免疫原性试验

将新城疫病毒（NDV）Colon-30株和减蛋综合征病毒（EDS76AV）－127株分别接种于非免疫鸡胚和鸭胚，制备抗原液。抗原液经甲醛灭活后，与纯化的天然免疫增强剂蜂胶乳化，制成鸡新城疫（ND）－减蛋综合征（EDS76）蜂胶二联灭活疫苗，对疫苗的安全性和免疫原性进行了测定。对3－6周龄易感雏鸡以2倍使用剂量肌内注射，安全性良好；对1日龄雏鸡接种1个使用剂量进行急性毒性试验。15d生长曲线表明，对雏难 影响。对6周龄雏鸡注射1个使用剂量，每批疫苗免疫10只鸡，免疫后5－32d，鸡血清中EDS76血凝抑制（HI）抗体的几何平均滴度（GMT）为6．5－11．8log2,ND血凝抑制（HI）抗体的几何平均滴度（GMT）为4．8－9．8log2；对ND免疫攻毒试验表明，3批疫苗，每羽份含有的半数保护量（PD50）分别为≥127、≥131和≥127。