质粒介导的大肠杆菌对喹诺酮类药物耐药性研究进展

由于临床不合理用药,喹诺酮耐药菌株逐年增加,而且多重耐药菌株也越来越多,这给临床用药和新药开发带来了较大的困难,尤其是在临床分离菌株中出现质粒介导的喹喏酮耐药(PMQR)机制,使喹喏酮耐药性在人类、动物病原菌之间迅速传播成为可能。文章对大肠杆菌PMQR机制进行综述,以便对耐药分子机制的了解和控制耐药菌株的传播。     

800株不同动物源大肠杆菌的耐药性监测

采用微量稀释法,检测了2007年12月分离自四川省5个市的牛源、猪源、鸡源800株大肠杆菌对13种抗菌药物的敏感性.结果显示,分离菌株的耐药率除阿米卡星仅5.9%外,其余药物均超过35%,对磺胺异(口惡)唑、磺胺甲嗯唑+甲氧苄啶、氨苄西林的耐药率较高,分别为100%、96.6%、75.8%;分离菌株多重耐药情况严重,耐受3种以上药物的菌株占92.6%.不同地区及不同动物源大肠杆菌耐药水平存在差异.其中成都地区耐药性最严重,鸡源大肠杆菌耐药率最高.监测结果表明,四川省动物源大肠杆菌的耐药现状已不容乐观,有必要加强耐药性监测,指导兽医临床合理使用抗菌药物.     

致病性大肠杆菌的耐药性监测

大肠杆菌普遍存在于动物体内，在外部环境突然改变及诸多应激条件下，极易暴发大肠杆菌导致的疾病，如仔猪黄痢、仔猪白痢、猪水肿病；鸡大肠杆菌病；鸭大肠杆菌病；牛、羊大肠杆菌引起的腹泻等。随着近年来大量抗生素的使用，耐药菌株不断地增加，耐药谱也越来越广。大肠杆菌能够通过畜禽产品的加工及储藏等传播给人类，许多耐药菌株引起的疾病治疗非常困难。为了降低大肠杆菌给我市畜禽业带来的危害，以及减少由其给人类造成的潜在威胁，必须经常对其耐药性进行监测。我们在淮安市科技局的项目资金支持下，对危害全市畜禽业较严重的大肠杆菌进行了监测，现汇报如下。     

广东地区畜禽源大肠杆菌的耐药性与流行性研究

【目的】调查广东地区畜禽源大肠杆菌的耐药特征与流行情况,为动物源大肠杆菌耐药性防控提供参考。【方法】对2019年从广东地区10个不同生产用途养殖场采集饲料、饮水和健康动物的肛/泄殖腔拭子等样品进行大肠杆菌分离鉴定、药敏试验、耐药基因和插入序列共同区(insertion sequence common region, ISCR)检测及种族系统进化分析。【结果】共分离获得416株大肠杆菌,其中种猪源78株、肉猪源77株、蛋鸡源122株、肉鸡源139株。菌株呈现多重耐药特点,不同动物源大肠杆菌中,肉鸡源大肠杆菌耐药率最高。79.6%(331/416)的菌株对3种或3种以上药物产生耐药,最多可对13种药物耐药,共组成156种耐药图谱,耐药谱以复方新诺明/氟苯尼考/多西环素/阿莫西林/氨苄西林居多,占比为11.1%。耐药基因以floR基因检出率最高,为50.0%;其次是sul2和sul3基因,检出率分别为44.2%和42.5%。与替加环素、黏菌素耐药表型相关的耐药基因tet(X3)、tet(X4)和mcr-1检出率均低于10%。插入序列共同区ISCR1、ISCR2和ISCR3的检出率分别为14....     

2012-2014徐州地区禽源大肠杆菌耐药性监测

为了掌握徐州地区大肠杆菌耐药菌株的情况和耐药程度,指导临床合理用药,笔者2012-2014年对徐州地区禽源大肠杆菌进行耐药监测,从临床分离鉴定出86株禽源大肠杆菌,采用纸片扩散法测定86株分离菌株对15种抗菌药物的敏感性。结果表明,禽源大肠杆菌分离株多重耐药现象严重,其中11耐和12耐的菌株所占比例最大,分别为25.58%和23.25%;分离的菌株对头孢类抗生素,特别是阿莫西林耐药率最高,达到100%,对氨基糖苷类药物则耐药率相对较低,粘杆菌素耐药率最低,仅为2.3%。     

肉鸽大肠杆菌的分离鉴定与耐药性的研究

以南京市郊某肉鸽场病鸽为样本进行细菌分离鉴定,研究肉鸽大肠杆菌的耐药性。从病死鸽体内分离到14株大肠杆菌,鉴定出4种血清型,分别是O2、O18、O78、O101,其中O2型8株,为主要血清型,占血清型总数的66.67%。将分离到的菌株接种20～25日龄雏鸽进行动物回归试验,死亡率达85.17%,说明该分离菌株对雏鸽具有较强的致病性。对分离菌株进行药敏试验,结果表明,14株大肠杆菌对庆大霉素、卡那霉素、头孢拉定3种药物敏感率达100%,对环丙沙星、阿米卡星等13种药物均产生不同程度的耐药,对强力霉素和新霉素2种药物完全耐药。     

致病性大肠杆菌的耐药性监测

大肠杆菌是医学和兽医临床最常见的病原之一。在兽医临诊中大肠杆菌引起的疾病如鸡大肠杆菌病、猪水肿病、仔猪黄、白痢是近几年发病率和死亡率都很高的传染病,长期困扰着养殖业的发展。随着抗生素的大量应用,耐药菌株越来越多,耐药谱越来越广。有的菌株甚至对尚未用于兽医临床的新型抗生素也表现出很强的耐药性。而且动物源性带耐药质粒的肠道菌可通过畜禽产品的加工、食用等过程传播到人类[1],因而兽医临床大剂量盲目使用抗生素不但给兽医临床治疗带来了困难,助长了耐药菌的产生,加剧了治疗和用药的恶性循环,而且对人医临床构成潜在的危害…     

牛源大肠杆菌耐药性研究进展

牛源致病性大肠杆菌是导致牛细菌性疾病的重要病原体之一,抗菌药是治疗及预防牛大肠杆菌病的重要手段,然而在养殖过程中,长期且不合理的使用抗菌药物,导致大肠杆菌耐药问题频发,且耐药性具有通过人与动物的直接接触或借助食物链将耐药基因从动物传播给人类的可能,严重威胁人类健康及公共卫生安全。本文根据近几年国内外关于牛源大肠杆菌耐药性基因的研究报道,对大肠杆菌耐药机制、耐药基因检出率及耐药表型进行综述,以期为大肠杆菌耐药性的研究提供参考。     

不同动物源性大肠杆菌的耐药性检测

致病性大肠杆菌是医学和兽医学临床感染中最常见的病原菌之一，是威胁人类和动物健康的重要致病菌。大肠杆菌的血清型复杂，仅国内报道就有80余种之多，因而应用疫苗对大肠杆菌病进行预防尚不能满足该病的防治要求，多采用抗生素进行治疗，但由于抗生素的广泛、持续及不当使用，由耐药菌株引起的人及动物细菌感染性疾病不断增加。本文拟通过检测从我国部分地区分离的40株（9种动物源性）大肠杆菌对临床常用5种抗生素的耐药性，为兽医临床正确选择药物治疗大肠杆菌病提供借鉴。     

2019年湖南省部分地区鸡、鸭、猪源大肠杆菌耐药性调查

旨在调查2019年湖南省部分地区不同来源的大肠杆菌对抗生素的耐药水平,为养殖合理用药提供参考。从4个市畜禽养殖场采集猪、鸡和鸭粪便285份,使用麦康凯琼脂培养基和伊红美蓝培养基对大肠杆菌筛选,利用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱进行鉴定,采用微量肉汤稀释法检测16种抗生素对大肠杆菌的最小抑菌浓度(MIC)。共分离出203株大肠杆菌(鸡源146株、鸭源20株和猪源37株),对四环素和氨苄西林耐药率最高,分别达到89.2%和84.7%;对头孢他啶、奥格门丁、黏菌素耐药率较低,分别为2.5%、2.0%和0.5%;所有菌株均对美罗培南敏感。抗3种及以上抗生素的菌株数目占比为87.7%,而仅5.42%的菌株对所有检测的抗生素敏感。另外,来源于减抗示范养殖场的大肠杆菌对大部分抗生素的耐药率,与来源于非减抗养殖场大肠杆菌相比未见显著差异。上述结果表明,湖南省动物源大肠杆菌的耐药水平仍处在较高水平,重视兽药使用管理并持续开展对大肠杆菌的耐药性监测十分必要。     

不同禽源致病性大肠杆菌的多重耐药性分析

采用K-B法,对实验室分离、保存的37株不同年代、不同禽源致病性大肠杆菌,用14种药物进行了体外敏感性测定.结果显示,20世纪80年代分离株耐药性较低,耐药谱从1重耐药到6重耐药,未见5重耐药和超级耐药株,其中,3重耐药株数最多,占总分离株比例的16.2%;多数分离株对呋喃唑酮、头孢氨苄、新霉素、壮观霉素、洛美沙星和诺氟沙星等6种药物具有高度敏感性.20世纪90年代以后的分离株均出现了不同程度的多重耐药,耐药谱从8重耐药到11重耐药,其中8重耐药菌株数最少,占总株数比例的2.7%,11重耐药最高,占总株数比例的18.9%;14种抗菌药物耐药率也出现新高,其中链霉素耐药率达到了94.4%.结果表明,随着时间的推移,大肠杆菌耐药性问题日益严重,应加强重视和研究,严格控制大肠杆菌耐药性的广泛传播以及由此带来的恶性循环.     

猪源肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定与药敏试验

已知多种动物均易被病原性大肠杆菌感染发生大肠杆菌病。在世界各地,大肠杆菌是猪群中很多疾病,包括新生仔猪腹泻、断奶仔猪腹泻、败血症、多发性浆膜炎、乳腺炎、尿路感染的一个重要原因。肠外致病性大肠杆菌(Extraintestinal Pathogenic Escherichia coli,ExPEC)是一组不同种类的大肠杆菌,不仅可正常定植于肠道,而且能侵入引起菌血症,并诱发败血症或局部肠道外感染,如脑膜炎、关节炎、肺炎、心内膜炎等[1]。临床上通常使用抗生素进行大肠杆菌病的治疗,但近年来随着抗生素的大量使用,多重耐药大肠杆菌菌株日益增多,给人和动物的安全带来了极大隐患;而ExPEC产生的抗生素耐药性明显高于其他菌群,50%以上的菌株为多重耐药,甚至许多菌株已演化成超级细菌,严重影响了选择有效的抗生素对该类细菌引起的疾病进行防治[2]。由于发病率、死亡率升高和体重降低的增加,以及治疗、疫苗和饲料添加剂的成本增加,ExPEC引起的猪大肠杆菌病导致的经济损失日益显著。     

主要动物性食品生产链大肠杆菌的耐药性分析

为了解主要动物性食品生产链大肠杆菌(Escherichia coli)的耐药情况,采用美国临床和实验室标准协会（CLSI）推荐的微量肉汤稀释法,对源自猪肉、鸡蛋、鸡肉生产链的350株大肠杆菌进行常用10种抗菌药(组合)的敏感性测定,参考CLSI标准（2010）判定药敏结果。结果显示,350株大肠杆菌对四环素（TET）耐药率（82.0%）最高,其次是甲氧苄啶/磺胺甲噁唑（SXT）（75.4%）,对庆大霉素（GEN）耐药率（26.9%）最低。尽管不同来源大肠杆菌对10种抗菌药中大部分药物耐药率较一致,但不同生产链环节的菌株耐药率却存在差异。76.2%（267株）受试菌株多重耐药,其中以8重耐药菌株（17.7%）最多。菌株共产生108种耐药谱,猪肉、鸡肉和鸡蛋生产链中大肠杆菌的耐药谱分别为40、46和55种,但优势耐药谱不明显。菌株数较多的耐药谱为：NAL-CIP-AMP-AMC-CEF-SPT-GEN-SXT-TET（21/350）、TET（20/350）、NAL-CIP-AMP-AMC-CEF-SPT-SXT-TET（16/350）、NAL-CIP-AMP-CEF-FLO-SPT-SXT-TET（16/350）及SPT-SXT-TET（15/350）。提示,主要动物性食品生产链大肠杆菌耐药情况较严重,应加强其耐药性连续监测与控制。     

不同省区鸡源大肠杆菌耐药性调查与系统进化群分析

为有效控制鸡大肠杆菌病,对不同省区鸡源大肠杆菌致病菌株的分布情况及耐药特征进行了调查分析,分别采用PCR法和MIC法进行了系统进化群分群检测和药敏试验,采用皮下注射进行了动物致病性试验,并采用SPSS17．0软件进行差异显著性分析。结果显示：低致病群B1（38．13％）和非致病群A（34．02％）菌株分布相对较多,其次是高致病群D（21．23％）和B2（6．16％）;鸡源大肠杆菌耐药严重,12种药物的耐药率在50％以上,多重耐药问题突出,多重耐药率高达98．86％;不同省区鸡源大肠杆菌菌株的耐药程度存在差异,个别药物（如奥格门丁、头孢噻呋等）差异显著;高致病群B2和D群菌株的耐药程度较B1和A群菌株严重,其中氧氟沙星、庆大霉素、大观霉素、头孢噻呋、磺胺异噁唑、复方新诺明、奥格门丁等7种药物差异显著（ P＜0．05）。试验表明,我国鸡源大肠杆菌高致病菌株检出率高,且耐药程度相对严重,在适宜条件下更易导致鸡群发病且较难控制。     

动物源性大肠杆菌的耐药性和氨基糖苷类耐药基因的检测

为调查不同动物源性大肠杆菌的耐药性,本试验对65株源于畜禽的大肠杆菌进行18种常见抗菌药的药敏试验,用PCR法检测3种氨基糖苷类耐药基因aac(3)-II、arm(A)和aac(6′)-Ib。结果显示：65株大肠杆菌中对氨基糖苷类药物链霉素耐药率最高(75.38%),其次为复方新诺明(69.23%),耐药率最低的是头孢哌酮舒巴坦(0%);耐药基因aac(3)-II、arm(A)和aac(6′)-Ib的检出率分别为29.23%、1.54%和9.23%;有51株分离菌株存在多重耐药,占总株数的78.46%。结果表明,动物源大肠杆菌对多种抗菌药具有耐药性,在氨基糖苷类耐药基因中以携带aac(3)-II为主。     

兔源大肠杆菌耐药表型分析

从9个规模化兔场分离到50株大肠杆菌,选取了16种抗生素对这50株大肠杆菌运用Kirby-Barer法进行药敏试验,结果表明：先锋霉素、新霉素、痢特灵、丁胺卡那霉素的抑菌作用比较强;而细菌对氨苄青霉素、阿莫西林、强力霉素、林可霉素则表现出极其高的耐药性,对四环素、氯霉素、卡那霉素、庆大霉素、复方新诺明、恩诺沙星、诺氟沙星、链霉素也有很高的耐药性。所分离的大肠杆菌以耐药8～12种居多,占细菌总数的78％,未发现不耐药的菌株与全部耐药的菌株。     

牛源大肠杆菌质粒介导喹诺酮类耐药基因的检测分析

为研究近年来新疆地区牛源大肠杆菌中质粒介导喹诺酮类药物耐药基因的分布及其对喹诺酮类抗生素的耐药情况,本研究于2016-2018年从新疆石河子、沙湾、奎屯、玛纳斯和伊犁5个地区12个规模化奶牛场分离出116株牛源大肠杆菌,药敏试验检测其耐药性,同时利用PCR扩增PMQR耐药基因。药敏试验结果显示,62.93%的菌株对氨苄西林耐药,耐药率最高。对链霉素、四环素、卡那霉素和恩诺沙星的耐药率依次为56.90%、54.31%、43.10%和42.24%。对头孢他啶和头孢噻肟的耐药率较低,分别为7.76%和11.21%。分离菌主要携带qnrA、qnrS和aac（6'）-Ⅰb-cr 3种耐药基因;116株大肠杆菌中有31株携带PMQR的耐药基因,检出阳性率为26.72%,其中26株仅携带1种PMQR耐药基因,占所有菌株的22.41%,4株携带2种PMQR耐药基因,占所有菌株的3.45%,1株携带3种PMQR耐药基因,占所有菌株的0.86%。综上所述,新疆地区牛源大肠杆菌质粒介导喹诺酮类药物基因主要为qnrA、qnrS和aac（6'）-Ⅰb-cr 3种,且对恩诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星均产生不同程度的耐药性。     

大肠杆菌整合子的研究进展

<正>大肠杆菌(E.coli)是肠杆菌科细菌中最广泛分布及最常分离的革兰阴性菌。由于抗生素的广泛使用和滥用,导致了多重耐药(multidrug resistant,MDR)大肠杆菌的大量出现,对人类健康及动物安全造成了致命威胁[1-2]。建模研究预测,到2050年,大肠杆菌MDR致命性感染将达到每年300万例,占致命性MDR感染的30%[3-4]。抗微生物药物耐药(antimicrobial resistance,AMR )产生的主要原因是     

不同耐药水平大肠杆菌acrA和marA基因转录水平的比较

为检测不同耐药水平大肠杆菌的acrA和marA基因转录水平，阐明t耐药大肠杆菌株药物敏感性变化与acrA和marA的mRNA水平之间的关系。用定量RT—PCR的方法比较多重耐药菌株SEMR、单药耐药菌株SEICI和SEICH以及质控株ATCC25922的acrA和marA的mRNA水平。结果表明，acrAmRNA水平，SEMR均是SEICI、SEICH和ATcC25922的16倍；marA mRNA水平，SEMR是SEICH的4倍、SEICl和ATCC25922的8倍；SEICI和SEICH的acrA mRNA和marA mRNA水平与ATCC25922无明显差异；同一菌株acrA mRNA和marA mRNA水平的变化保持了较为稳定的一致性。因此认为，大肠杆菌多重耐药菌株SEMR的acrA mRNA和marA mRNA水平与其耐药水平存在相关性。     

致病性大肠杆菌毒力因子和耐药性研究进展

大肠杆菌(Escerichia coli是重要的肠道菌群,致病性大肠杆菌也是引起许多肠内、肠外疾病的罪魁祸首.近些年大肠杆菌耐药现象尤为严重,尤其是多重耐药菌株的出现,在致病性大肠杆菌的预防、控制和治疗上带来巨大困难,给我国养殖业带来巨大的经济损失,同时也对人类的健康造成潜在的威胁.因此,大肠杆菌毒力因子和耐药基因之间关系的研究也是近年来研究的重点问题之一.文章将从毒力因子和细菌耐药性方面阐述研究进展,探讨有效的预防和控制该细菌引起疾病的方法.