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鸡大肠杆菌O78对喹诺酮类药物高耐药株的分子鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
就临床分离的鸡大肠杆菌O78对喹诺酮类药物的最低抑菌浓度(MIC)进行了测定,得到对喹诺酮类药物有不同耐药水平的细菌23株。根据GenBank已公布的QRDRs序列,设计了分剐扩增gyrA、gyrB、parC和parE基因的4对引物,以筛选的23株耐药菌DNA为模板,进行了PCR扩增。序列分析及AcrA的Western blotting检测结果表明,临床分离的鸡大肠杆菌对喹诺酮类药物的耐药水平与GyrA和ParC的突变密切相关,而AcrAB外输泵的表达水平无显著变化。提示临床分离的鸡大肠杆菌O78的耐药水平与喹诺酮类药物的选择性压力有关,它诱导了DNA旋转酶和拓扑异构酶IV的基因突变,可能不能激活AcrAB外输泵。 相似文献
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为阐明大肠杆菌耐药菌株药物敏感性变化与acrA和marA的mRNA水平之间的关系。用定量RT—PCR方法比较了多重耐药菌株、单药耐药菌株以及质控株ATCC25922的actA和marA的mRNA水平。结果。actA mRNA水平。多重耐药菌株SEMR是单药耐药菌株SEICI、SEICH和质控株ATCC25922的16倍;/natA mRNA水平。SEMR是SEICH的4倍、SEICI和ATCC25922的8倍;SEICI和SEICH的actA mRNA、marA mRNA水平与ATCC25922的无明显差异;同一菌株actA mRNA和marA mRNA水平的变化保持了较为稳定的一致性。结论:大肠杆菌多重耐药菌株的actA mRNA和marA mRNA水平与其耐药水平存在相关性。 相似文献
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为检测不同耐药水平大肠杆菌的acrA和marA基因转录水平,阐明t耐药大肠杆菌株药物敏感性变化与acrA和marA的mRNA水平之间的关系。用定量RT—PCR的方法比较多重耐药菌株SEMR、单药耐药菌株SEICI和SEICH以及质控株ATCC25922的acrA和marA的mRNA水平。结果表明,acrAmRNA水平,SEMR均是SEICI、SEICH和ATcC25922的16倍;marA mRNA水平,SEMR是SEICH的4倍、SEICl和ATCC25922的8倍;SEICI和SEICH的acrA mRNA和marA mRNA水平与ATCC25922无明显差异;同一菌株acrA mRNA和marA mRNA水平的变化保持了较为稳定的一致性。因此认为,大肠杆菌多重耐药菌株SEMR的acrA mRNA和marA mRNA水平与其耐药水平存在相关性。 相似文献
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鼠防御素基因Crp4在大肠杆菌中的表达及活性检测 总被引:1,自引:0,他引:1
通过基因工程技术,以鼠防御素基因Crp4为研究对象,从鼠回肠末端克隆了鼠防御素Crp4基因的成熟编码序列(约为102 bp),将其与另外2个鼠防御素基因的氨基酸序列进行比对,发现同源性分别高达97.8%和97.1%。将该序列克隆到原核表达载体pET-28a中,构建了重组质粒pET-Crp4,转化DE3感受态并用IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE和Wersiernblot结果表明,该基因在pET-28a中成功表达。体外抑菌试验证实,重组Crp4蛋白对金黄色葡萄球菌、李斯特菌、大肠杆菌等具有一定的抑菌活性。 相似文献
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采用药敏纸片法测定了临床分离的160株金黄色葡萄球菌对14种抗菌药物的耐药性,同时进行了MRSA的检测,并采用琼脂稀释法测定纸片法筛选出的45株金黄色葡萄球菌对环丙沙星的最低抑菌浓度(MIC)。根据金黄色葡萄球菌gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因的核苷酸序列设计引物、以筛选出的45株金黄色葡萄球菌染色体DNA为模板.对gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因片段进行PCR扩增,回收PCR产物.并与pMD18-T载体连接.转化DH5a感受态大肠杆菌.提取质粒并测序。进一步分析考查金黄色葡萄球菌gyrA、gyrB、grlA、grlB和norA基因及其启动子区突变与环丙沙星耐药性的关系。结果表明.grlA中的2个突变(位于80和84密码子)及gyrA中的2个突变(位于84和88密码子)与环丙沙星耐药性明显相关。 相似文献
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大肠杆菌acrA基因的克隆、表达、抗体制备及不同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平的检测 总被引:1,自引:0,他引:1
检测不同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平,探讨耐药水平与AcrA蛋白表达水平之间的关系。对acrA基因进行克隆、表达、制备抗AcrA抗体,Western blot方法比较同耐药水平大肠杆菌AcrA表达水平。结果表明,多重耐药株SEMR的AcrA表达明显高于单药耐药株SEICI和SEICH以及质控株ATCC25922。因此SEMR多重耐药性的产生与AcrA的高效表达直接有关。 相似文献